(一)葡萄糖分析
利用血糖機(德國拜耳 ELITE 易理測血糖機)，於動物採血時滴取一滴血液(約 2μl)
Cholesterol oxidase
lipase
glycerokinase
Glycerol phosphate oxidase 於血糖試紙上，等待讀取數值 30 秒，即可測得動物血液中葡萄糖濃度。
(二)膽固醇分析 1.原理
主要原理是利用 detergent 將膽固醇及固醇酯自 lipoprotein 中釋出，
以 cholesterol esterase 水解膽固醇酯得游離膽固醇 (free cholesterol)。
Free cholesterol cholesterol-3-one + H2O2 作二重複，產生紅色的 quinoneimine 測其 500nm 吸光值。以 cholesterol calibrator standard (Randox)做一標準曲線，利用內插法換算濃度。
(三)三酸甘油酯分析
Dihycroxyacetonephosphate + H2O2 peroxidase
在 peroxidase 催化下，H2O2 與 4-aminophenazone 和 4-chlorophenol 作用，產生 紅色的 quinoneimine
2.實驗方法
所採用的是市售組合試劑 (Randox)，以 Enzymatic CHOD-PAP method 測定。
取 5μl 血清加 500μl 反應劑並作二重複，所採用的是市售的組合試劑(Randox)，以 Enzymatic CHOD-PAP method 測定。產生紅色的 quinoneimine 測其 500nm 吸光值。
以 cholesterol calibrator standard (Randox)做一標準曲線，利用內插法換算濃度。
(四)游離脂肪酸分析 standard (1mmol/l)於 96 well plate，加入 100μl reagent 1，37℃下反應 10 mins，再加 入 200μl reagent 2，在 37℃下反應 10 mins，於波長 550nm 測吸光值，做一標準曲線，
下可測其吸光值，換算其 insulin 濃度。
2.實驗方法
先將 50 μl 的 conjugate solution 置於 96 well plate，再將 25 μl 標準品(系列稀釋)、
血樣加入分析盤中，室溫反應 2 小時後，進行 wash，移除未與抗體結合的樣品，再 加入 200 μl peroxidase substrates 室溫下反應 15 分鐘，最後加入酸性溶液終止酵素呈 色反應，於波長 450 nm 下可測其吸光值，吸光值越高者表示樣品中所含 insulin 濃 度越高，其濃度值利用標準品並乘上稀釋倍數即可相對換算出。
(六)Adiponectin 分析 1.原理
利用 96 孔的分析盤中已結合抗 adiponectin 的單株抗體，能專一的與 adiponectin 分子結合，再與 horseradish peroxidase conjugates anti mouse adiponectin polyclonal antibady 結合，利用 horseradish peroxidase 與 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine 及 H2O2 反應呈色而得知樣品中 adiponectin 濃度。
2.實驗方法
本實驗採用市售 adiponectin ELISA kit (R&D)，根據三明治 (sandwich)酵素免疫分 析原理測量血液中 adiponectin 濃度，此法係操作過程為：將標準品 (系列稀釋)、血 樣 (稀釋 8000 倍)加入分析盤中，室溫反應 3 小時後，進行 wash，使未結合的樣品 在清洗過程中被洗去，再加入 horseradish peroxidase conjugates anti mouse adiponectin polycolonal antibady 室 溫 下 反 應 1 小 時 ， 進 行 wash 後 加 入 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine 及 H2O2 (新鮮配置)，室溫下避光反應 30 分鐘，最後 加入酸性溶液終止酵素呈色反應，並使藍色產物轉變為黃色，於波長 450 nm 下可
再與 horseradish peroxidase conjugates anti mouse leptin polyclonal antibady 結合，利 用 horseradish peroxidase 與 peroxidase choromogen substrate tetramethylbenzidine 反應
呈色而得知樣品中 leptin 濃度。
2.實驗方法
本實驗採用市售 Leptin ELISA kit (Assay Pro)，根據三明治 (sandwich)酵素免疫分 析原理測量血液中 leptin 濃度，此法係利用 96 孔的分析盤中已結合抗 leptin 的多株 抗體，能專一的與 leptin 分子結合，再與 horseradish peroxidase conjugates anti mouse leptin polyclonal antibady 結合，利用 horseradish peroxidase 與 peroxidase choromogen substrate tetramethylbenzidine 反應呈色而得知樣品中 leptin 濃度。操作過程為：將標 準品 (系列稀釋)、血樣 (稀釋 4 倍)加入分析盤中，室溫反應 2 小時後，進行 wash，
使未結合的樣品在清洗過程中被洗去，再加入 horseradish peroxidase conjugates anti mouse leptin polycolonal antibady 室溫下反應 2 小時，進行 wash 後加入 peroxidase choromogen substrate tetramethylbenzidine，室溫下反應 30 分鐘，最後加入 0.5N hydrochloric acid 終止酵素呈色反應，並使藍色產物轉變為黃色，於波長 450 nm 下 可測其吸光值，吸光值越高者表示樣品中所含 leptin 濃度越高，其濃度值利用標準 品並乘上稀釋倍數即可相對換算出。