出流水排放雖然有法規管制其排放濃度，但卻無法確保流放至水體後對水生 生物的安全性，因此本實驗使用斑馬魚胚胎評估其生物毒性，除了評估此股廢水 對斑馬魚胚胎存活率的影響，亦將出流水稀釋為不同倍數，降低廢水中各污染物 的濃度，以分析各污染質可能對胚胎產生的影響。
斑馬魚胚胎暴露於各不同稀釋倍數的出流水，從圖 4-11 可以看到經出流水暴 露後，不管是 48 或 96 小時，各個稀釋倍數的死亡率皆不超過 20%，如單以死亡 率來評估此股廢水對胚胎的生物毒性，跟上述 HF/CMP 與酸鹼兩股廢水相比毒性 是較低的。從累積孵化率來看(圖 4-12 (a))，胚胎在暴露 20%的出流水即會抑制其 孵化的速度與成功率，當濃度提高抑制的程度更加嚴重，暴露於濃度 40%以上的 出流水時僅只有低於 60%的胚胎孵化成功，可是這些未孵化的胚胎依然有心跳尚 未死亡，為瞭解其後續孵化或存活的狀況，此處將觀測時間延長至 120 小時，發 現這些尚未孵化的胚胎在延長觀察時間後約 15%孵化成功，但大多數依然以胚胎 形式存活甚至已有部分胚胎死亡，可能是胚胎生存的環境存在著毒性物質，雖然 不至於導致胚胎直接死亡，但外在的毒物使胚胎產生壓力反應，而減緩絨毛膜敷 化酵素的產生，導致胚胎無法孵化成幼魚(Hallare et al., 2004; Cheng et al., 2007)。
心跳量測結果為圖 4-12 (b)，經統計計算 48 小時的心跳與控制組相比皆有顯 著降低(p < 0.05)，尤其暴露 40%以上的出流水其統計結果更為顯著(p < 0.01)，與 累積孵化率互相對照，同樣在稀釋倍數 40%的時候對孵化的抑制情形便明顯，心 臟為供給全身血液運送及養分供給的重要器官(Incardona et al., 2004)，假如早期發育時心 跳變緩慢，對於全身養分的供給效率亦會降低，同樣的結果亦反應在胚胎孵化後 幼魚的發育體長(圖 4-12 (c))，當暴露濃度 80%的時候，與控制組相比有生長速度 趨緩的現象(p < 0.01)，不過將 96 小時的胚胎心跳次數與控制組進行統計比較時，
發現原本 48 小時有統計顯著的濃度反而不顯著，僅剩暴露濃度 100%的胚胎有顯
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Dilution (%)
control 20 40 60 80 100
M o rt a li ty r a te ( % )
0 20 40 60 80 100
48 h 96 h
圖 4- 11 不同稀釋倍數之出流水對斑馬魚胚胎死亡率之影響
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Exposure time (h)
0 24 48 60 72 96
C u m u la ti v e h a tc h in g r a te ( % )
0
H e a rt b e a t (p e r 1 0 s e c )
0
55
Dilution (%)
control 20 40 60 80 100
B o d y l e n g th ( m m )
0
M a lf o rm a ti o n r a te ( % )
0
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著差異(p < 0.01)。可能是因暴露 48 小時心臟發育尚未完全，對於環境的影響比 較敏感，不過 Hill (2005)曾指出斑馬魚胚胎相較於囓齒類動物，如在發育時心臟 受損程度不嚴重，亦有可能在發育完全後恢復其生理機能。雖某些濃度的出流水 不致於影響心跳功能，但從發育型態來分析，這些低濃度的毒性物質依然對胚胎 生長產生畸形發育的現象，圖 4-12 (d)即為暴露於不同濃度的出流水產生畸形發 育的機率，以及各個畸形型態出現的數量，當暴露濃度為 100%時，銨離子的濃 度為 53.11 mg NH3-N/L，與圖 4-5 (a)氯化銨濃度 50 mg NH3-N/L 的畸形率相比，
畸形率雖比實驗室配製溶液高，但因這裡還存在 3.50 mg NO3
--N/L 的硝酸鹽離子，
亦有可能對胚胎發育畸形率產生加成的作用，以發育型態來看，這裡脊椎彎曲出 現的比例較高，與實驗室配製的氯化銨溶液有相同的結果，且當暴露濃度比例降 低至 20%時銨離子濃度約為 40 mg/L，此時胚胎大部分為脊椎彎曲的畸形型態，
跟實驗室配製溶液暴露結果有相同的現象，且本研究在 4-1 死亡率的章節有測得 氯化銨的 LOEC 濃度為 0.41 mg NH3-N/L，主要出現的型態亦以脊椎彎曲為主。
此毒性暴露結果可證實胚胎在暴露低濃度的實場出流水雖然死亡率不高，但是會 抑制胚胎的孵化率，且會減緩胚胎的心跳速率進而影響生長體長，而主要誘發幼 魚發育異常的表現型態為脊椎彎曲，此現象亦代表低濃度的銨離子會對水體生物 產生發育的影響，因此如單以法規濃度去規範水體銨離子的濃度仍有可能有遺漏 的部分。
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