最後將化合物 5 之各種NMR圖譜列表(Table 2)如下︰
II- 4. 化合物 10a 之結構解析
化合物 10a:為白色細長針狀結晶，Rf值(正己烷:乙酸乙酯=1:1)為 0.29
，熔點 173.5-174.1 ℃。
質譜(EIMS) (圖 10a-1a)︰
由其分子離子峰 (m/z 419) 及元素分析結果得知此化合物之分 子式為 C23H21N3O5，且其分子離子峰等裂解之相對離子峰(圖 10a-1b) 與預期相符，而其他化合物(10b ﹣10f)裂解情況類同。
圖 10a-1a 化合物 10a 之質譜(EIMS) UV 光譜︰
在 344.0 nm ( log e = 4.66) 、 226.8 nm ( log e = 4.77)及 209.0 nm ( log e = 4.83)處有最大吸收。
IR 光譜(圖 10a-2)︰
O C H3
N N
O O
NH
O O
C H3 1
3 2 4
5
6 7
8 9 11 10
12 13 14
15 16
17 18
19 20
21 22 23 24
25 26
27 28
29
30 31
在 3314.6 cm-1有 amino group 的吸收帶，在 1757.5 cm-1有 carbonyl group 的吸收帶，在 1637.7 cm-1有 imino group 的吸收帶。
圖 10a-2 化合物 10a 之紅外線光譜(IR) NMR 圖譜︰
在 NMR 溶媒之選擇中，著者以 DMSO-d6作為化合物 10a 之 NMR 溶媒，並解析此圖譜。
1H-NMR 圖 譜 (圖 10a-3)︰
由其積分值顯示此化合物有 21 個質子訊號，此與分子式 為 C23H21N3O5相符合。而由其化學位移、偶合情形及配合1H-1H COSY 圖 譜 (圖 10a-4a, 10a-4b)與 NOESY 圖譜 (圖 10a-5a, 10a-5b)，將各個質子訊號歸屬如下︰首先，因受 methyl ester 拉電子的影響，致使質子訊號往較低磁場移動，而出現於高磁 場的δ3.66 (3H, s)，應歸屬於 methyl ester group H-31 之質子訊 號；而因受陰電性原子 O 的影響，致使質子訊號往低磁場移 動，而在較高磁場出現的δ3.87 (3H, s)，則歸屬於甲氧基 H-29 之質子訊號。
O C H3
N N
O O
NH
O O
C H3 1 3 2 4
5
6 7
8 9 11 10
12 13 14
15 16
17 18
19 20
21 22 23 24
25 26
27 28
29
30 31
圖 10a-3 化合物 10a 之1H-NMR 圖譜(DMSO-d6, 200 MHz) 其次，因分別受 amide 拉電子與陰電性原子 N 的影響，
而分別在較低磁場出現的δ4.03 (2H, d, J = 5.9 Hz)與δ5.70 (2H, s)，則分別歸屬於 H-18 與 benzyl group H-21 之質子訊號。
N N
O O
CH3
NH O
O CH3
O
(3.66)
(3.87)
(5.70)
31
21 29
圖 10a-4a 化合物 10a 之 1H-1H COSY 圖譜
而? 喃環上 H-4 與 H-3 之質子訊號，因受 amide 拉電子的 影響，致使質子訊號往較低磁場移動，分別出現於低磁場的δ 7.17 (1H, d, J = 3.6 Hz)與δ7.34 (1H, d, J = 3.6 Hz)。再者，於 δ7.19–7.32 (5H, m)則為苯環之質子訊號，其初步歸屬為 H-23, H-24, H-25, H-26 及 H-27 之質子訊號。此外，在 indazole 雜環 上之 H-15 及 H-13，因受 indazole 雜環上之甲氧基推電子的影 響，致使質子訊號往較高磁場移動，而分別出現於低磁場的δ 7.13 (1H, dd, J H-15,13 = 2.2 Hz, J H-15,16 = 9.1 Hz)及δ7.52 (1H, d, J H-15,13 = 2.2 Hz)之訊號；而δ7.70 (1H, d, J H-15,16 = 9.1 Hz)則歸 屬於 H-16 之質子訊號。最後，因受拉電子基 amide 之影響，
H-17 之質子訊號往低磁場移動，出現於最低磁場的δ8.83 (1H, t, J = 5.91 Hz)。
N N
O O
CH3
NH O
O CH3
(8.83) O (4.03)
17 18
圖 10a-4b 化合物 10a 之 1H-1H COSY 圖譜
圖 10a-5b 化合物 10a 之 NOESY 圖譜
13C-NMR 圖 譜 (圖 10a-6)︰
顯示有 20 個碳原子訊號，並配合分子式 C23H21N3O5 與 HMQC 圖譜之資訊，得知化合物 10a 一共有 23 個碳原子，且 知一個碳原子訊號δ40.7 埋藏於溶媒 DMSO-d6之碳原子訊號 中，故推測一共有 2 組碳原子訊號重疊。
O C H3
N N
O O
NH
O O
C H3 1 3 2 4
5
6 7
8 9 11 10 12 13 14
15 16
17 18
19 20
21 22 23 24
25 26
27 28
29
30 31
圖 10a-6 化合物 10a 之 13C-NMR 圖譜(DMSO-d6, 50 MHz) HMQC 圖譜 (圖 10a-7a, 10a-7b, 10a-7c)及 HMBC 圖譜 (圖 10a-8a, 10a-8b, 10a-8c)︰
依與氫譜之相關，著者首先將δ40.77, δ52.04, δ52.52 及δ55.86 之訊號，分別歸屬為 C-18, methyl ester group C-31, benzyl group H-21 及 methoxy group C-29 之碳原子訊號。
O C H3
N N
O O
NH
O O
C H3 1 3 2 4
5
6 7
8
9 11 10 12 13 14
15 16
17 18
19 20
21 22 23 24
25 26 27 28
29
30 31
圖 10a-7a 化合物 10a 之 HMQC 圖譜
(40.77) (52.04)
(52.52)
次之，在δ108.72 與δ116.14 之訊號，則依序歸屬於? 喃 環上三級碳 C-4 與 C-3 之碳原子訊號。再者，將δ100.81, δ 111.83 及δ119.16 之訊號，則依序歸屬於 indazole 雜環上三級 碳 C-13, C-16及 C-15之碳原子訊號。而另有δ127.44,δ127.44, δ127.86, δ128.86 及δ128.86 之訊號，則初步歸屬於苯環上 5 個三級碳之碳原子訊號。此外，由分子式 C23H21N3O5得知化 合物 10a 一共有 23 個碳原子，故推得一共有 9 個四級碳。
圖 10a-7c 化合物 10a 之 HMQC 圖譜
至於其他芳香環上的三級碳與四級碳碳原子訊號之歸 屬，則參照 HMBC 圖譜判斷如下︰首先，C-15 (δ119.16)與 H-13 (δ7.52)有3J correlation。而在δ121.18 因與 H-16 (δ7.70) 有 3J correlation，故初步臆測可能為 C-12 或 C-14 之碳原子訊 號，之後再經由圖譜上其他訊息來佐證為哪一個碳原子之訊 號。次之，在δ127.44 因與 H-21 (δ5.70)有 3J correlation，且 δ127.44 為一組重疊之碳原子訊號，故應歸屬為 C-23 及 C-27 之碳原子訊號，再配合先前之 HMQC 圖譜，得知δ7.19–7.25 (2H, m)應歸屬為 H-23 及 H-27 之質子訊號。再者，因δ127.86 與 H-23, 27 (δ7.19–7.25)有 3J correlation，因此歸屬於 C-25
N N
O O
CH3
NH O
O CH3
O (100.81)
(108.72)
(111.83)
(116.14)
(119.16)
3
4
13
15 16
之碳原子訊號，再配合 HMQC 圖譜，可知δ7.25–7.28 (1H, m)
而在δ136.55 因與 H-15 (δ7.13)及 H-13 (δ7.52)有 3J correlation，故歸屬於 C-11 之碳原子訊號。而δ137.39 因與 H-21 (δ 5.70)及 H-24, 26 (δ 7.28– 7.32)分 別 有 2J 及 3J correlation，所以歸屬於 C-22 之碳原子訊號。而在δ146.59 因 與 H-4 (δ7.17)及 H-3(δ7.34)分別有 2J 及 3J correlation，所以 歸屬於 C-5 之碳原子訊號。在δ150.32 因分別與 H-4 (δ7.17) 及 H-3 (δ7.34)有 3J 及 2J correlation，故應歸屬於 C-2 之碳原 子訊號。此外，在δ155.56 因與 H-29 (δ3.87)及 H-16 (δ7.70) 有 3J correlation，應歸屬於 C-14 之碳原子訊號；因此，δ121.18 應歸屬於 C-12 之碳原子訊號。而δ158.27 因與 H-18 (δ4.03) 及 H-17 (δ8.83)分別有 3J 及 2Jcorrelation，故應歸屬於 C-6 之 碳原子訊號。而δ170.54 因與 H-31 (δ3.66)及 H-18 (δ4.03) 分別有 3J及 2J correlation，故應歸屬於 C-19 之碳原子訊號。
而由分子式 C23H21N3O5 得知，最後一個碳原子訊號δ133.92 應歸屬於 C-8 之碳原子訊號。
圖 10a-8c 化合物 10a 之 HMBC 圖譜
N N
O
O CH3
NH O
O CH3
O
(133.92)
(136.55)
(137.39) (146.59)
(150.32)
(155.56)
(158.27)
(170.54)
19 31
18
17 6 3 2
4 5 13 8 14 29
15 16
11
21 22 24
26
最後將化合物 10a 之各種NMR圖譜列表(Table 4)如下︰
2.2, 9.1) H-16
16 CH 7.70 (d, 9.1) 111.83 H-15 C-16 17 NH 8.83 (t, 5.9)
18 CH2 4.03 (d, 5.9) 40.88 H-17 C-18
19 C 170.54 H-18 (2J), H-31 (3J)
20 O
21 CH2 5.70 (s) 52.52 C-21
22 C 137.39 H-21 (2J), H-24 (3J),
H-26 (3J) 23 CH 7.19 - 7.25
(m) 127.44 H-24 C-23 H-21 (3J), H-24 (2J) 24 CH 7.28 - 7.32
(m) 128.86 H-23 C-24 H-26 (3J) 25 CH 7.25 - 7.28
(m) 127.86 C-25
26 CH 7.28 - 7.32
(m) 128.86 H-27 C-26 H-24 (3J) 27 CH 7.19 - 7.25
(m) 127.44 H-26 C-27 H-21 (3J), H-26 (2J)
28 O
29 CH3 3.87 (s) 55.86 C-29
30 O
31 CH3 3.66 (s) 52.04 C-31
L : long range coupling
N
第二節 生物活性
I.抗血小板凝集活性試驗
著者所合成的 1-benzyl-3-(5-substituted-2-furyl)-5-methoxy-1H- indazole 衍生物(8a–8d， 9a–9h， 10a–10f)及化合物 1、4、5 與 6 之抗血小板活性篩選，目前委託台灣大學藥理所鄧哲明教授研究 團隊進行中。
II.抗血管增生之活性試驗
著者所合成的 1-benzyl-3-(5-substituted-2-furyl)-5-methoxy-1H- indazole 衍生物(8a–8d， 9a–9h， 10a–10f)及化合物 1、4、5 與 6 之抗血管增生活性篩選，目前委託中國醫藥學院基礎醫學研究所 吳介信副教授研究團隊進行中。
III.細胞致毒活性試驗
著者所合成的 1-benzyl-3-(5-substituted-2-furyl)-5-methoxy-1H- indazole 衍生物(8a–8d， 9a–9h， 10a–10f)及化合物 1、4、5 與 6 之細胞致毒活性篩選，目前委託中國醫藥學院藥物化學研究所徐 美華學姐進行中。
第三章 結論
1-Benzyl-3-(5'-hydroxymethyl-2'-furyl) indazole ( YC-1 )是具有 獨特作用機轉之新型抗血小板物質，其6-methoxy derivatives亦具類 似的活性，但YC-1之5-methoxy derivatives之合成與活性迄今尚未見 諸於學術期刊。於是本研究即以YC-1之5-methoxy derivatives作為標 的化合物，並順利的合成了methyl 5-(1-benzyl-5-methoxy-1H-indazol -3-yl)-2-furoate (4)、[5-(1-benzyl -5-methoxy-1H-indazol-3-yl)-2-furyl]
methanol (5) 、 5-(1-benzyl-5-methoxy-1H-indazol-3-yl)-2-furoic acid (6)、substituted 5-(1-benzyl-5-methoxy-1H-indazol-3-yl)-2-furoate (8a
﹣ 8d) 、 5-(1-benzyl-5-methoxy-1H-indazol-3-yl)-N-substituted-2- furamide (9a – 9h) 及 methyl-substituted-{[5-(1-benzyl-5-methoxy- 1H–indazol-3-yl) furoyl]amino} acetate (10a–10f)等數類新衍生物，
其抗血小板、抗血管增生及細胞致毒等生物活性正在測試中，期望 結果能發現比YC-1活性更加的新藥候補物質。