在分析頻率響應前，要先定義有效的數值分析方法；由於 QCM 在 空氣中穩定只需數分鐘而已，但在流體的應用上必須要達到動態上的 穩定才能進行我們的樣品量測。在 QCM 對時間軸作圖時，我們可以發 現大約可以分為四間階段：(I)前置期，(II)前穩定期，(III)樣品注 入期與(IV)後穩定期
Fig.4‐ 8 QCM 頻率響應圖
在前置期時中，由於系統中的緩衝液藉由針筒式幫浦的作用，迫 使緩衝液進入流體檢測儀中，此階段 QCM 的頻率響應呈現大幅度的震
盪。經過一段時間後，系統便會進入前穩定期，此時 QCM 頻率響應的 上下震盪範圍縮小，在本實驗中如 QCM 頻率響應維持在一分鐘內只有
±1Hz 的差異，我們便視為動態穩定。前穩定期的判斷會影響到之後 的數據分析，儀器偵測極限(Instrument detection limit ，IDL) 可以定義如下：待測物之最低量或最小濃度，足夠在儀器偵測時，產 生一可與空白訊號區別之訊號者。亦即該待測物之量或濃度在 99%之 可信度下，可產生大於平均雜訊之標準偏差 3 倍之訊號，也就是說當 前穩定期只有±1Hz 的差異，我們將有效訊號定義在大於±3Hz。
當我們判斷 QCM 狀態處於動態穩定時期後，便會將待測物經由 樣本注入口進入流體檢測儀中，也就是樣品注入期。此時期如果待測 樣本會與 QCM 表面修飾的特殊分子結合，QCM 頻率響應就會有明顯的 變化，有可能是上升或下降。經過分子間的反應後，QCM 的頻率響應 又會趨於動態穩定，進入後穩定期，實驗主要數據的判斷是依據此時 期的頻率響應與前穩定期的頻率響應，兩者間的差異作為 QCM 有效訊 號的辨讀。
4.2.1 不同尺寸之金奈米粒子的 QCM 頻率響應分析
Fig.4‐ 9 注入不同粒徑金奈米粒子的 QCM 頻率響應圖
Fig.4‐ 10 表面修飾不同粒徑金奈米粒子的 QCM 頻率響應圖
在之前的文獻中[18]得知抗體的 Fab 兩端具有彈性，因此可認取 的抗原應該有一定的範圍拘束，由 Fig.4-9 可以看到 IgG1 到 IgG4 的 四組樣本中，除了 IgG3 的反應不明顯外，其餘三組的曲線，半高寬 皆處於 4 到 7nm 之間。經由這組資料我們可以得知 Fab 兩端可以接 受的 Antigen 範圍應該在 4 到 7nm 這個區間內。相同的，我們將 QCM 晶片表面的修飾改為金奈米粒子的 Antigen，也獲得同樣的結果，經 由 Fig.4-10 上得曲線所示，四組樣本將 IgG3 剔除後，曲線的半高寬 依然介於 4 到 7nm 區間當中。
根據上面所示的結果，我們可以得知 Anti-5nm Antiserum 可以 認取 Antigen 也就是金奈米粒子的範圍在 4 到 7nm 間。
4.2.2 相同尺寸，不同材質之金、二氧化鈦、氧化鋅與四氧化三鐵奈
米粒子的 QCM 頻率響應分析
Fig.4‐ 11 不同材質、相同粒徑奈米粒子的 QCM 頻率響應圖
在上一個實驗中，我們使用相同材質的 Antigen 也就是金奈米粒 子，所得到的 QCM 頻率響應相當的明顯，那我們不禁懷疑 Antiserum 是對尺寸有特異性的反應，或是對材質上有特異性的反應。於是我們 使用了 Antiserum 對尺寸反應最強烈的尺寸，也就是選擇 5nm，挑選 的相同尺寸但式不同材質的奈米粒子；在 Fig.4-11 顯示出，除了含 有混合金奈米粒子的樣本之外，其他材質的 Antigen 所產生的 QCM 頻
率響應，都只有達到背景值的訊號。
根據這樣的 QCM 頻率響應，我們可以得到一個結論；在打入 5nm GNPs 所產生的抗體，只對奈米金材質且尺寸介於 4 到 7nm 間的粒子 有免疫上的反應。
Fig.4‐ 12 混合奈米粒子對單純金奈米粒子 % bound 圖
在 Fig.4-11 可以看出抗體只對含有金奈米粒子的樣本有 QCM 頻 率上的明顯差異，但如果我們將皆與金奈米粒子的樣本，把金奈米粒 子所產生的 QCM 頻率差當 100%下去做圖 Fig4-12，可以發現有一組數 據明顯高過單純金奈米粒子樣本，就是二氧化鈦與金奈米粒子混合這 組，但根據前面所得到的結論，抗體只對奈米金材質且尺寸介於 4 到
7nm 間的粒子有免疫上的反應；我們推論應該是混合的過程中二氧化 鈦與金奈米粒子產生吸附的作用，這組數據是對金奈米粒子與二氧化 鈦的 QCM 頻率響應，而不是對二氧化鈦的 QCM 頻率響應反應，由於 QCM 晶片本身對質量上的反應非常的靈敏，因此當二氧化鈦與金奈米 粒子產生吸附的作用相對的質量上產生增加，所以得到的 QCM 頻率響 應也會較單純金奈米粒子的 QCM 頻率響應高。