3.3.1 QCM 前處理
使用藥品:硫酸(Sulfuric acid) 、過氧化氫(Hydrogen Peroxide)、
去離子水(DD Water)。
使用儀器:燒杯 500ml、夾子、氮氣。
實驗步驟:
1.以硫酸:過氧化氫 = 3:1, v/v,配置 SPM 溶液於燒杯中。
2.將 QCM 放入 SPM 溶液中,10 分鐘;此步驟可將殘留在 QCM 表面之 微小粒子帶走。
3.將 SPM 溶液中的 QCM 取出,以去離子水清洗 3 次。
4.利用氮氣將 QCM 表面水漬吹乾。
5.完成 QCM 前處理。
3.3.2 QCM 表面修飾 Anti-5nm GNPs Antiserum
使用藥品:氯化氫(Hydrochloric acid )、氫氧化鈉(Sodium hydroxide)、乙醇(Ethanol)、去離子水(DD Water)、戊二醛
(Glutaraldehyde)、Anti-5nm GNPs Antiserum、小牛血清(Bovine serum albumin) 。
使用儀器:6 Wells Dish、夾子、微量吸管。
實驗步驟:
1.配置 1.2M NaOH 溶液備用。
2.配置 1.2M HCl 溶液備用。
3.配置 2.5 % 戊二醛溶液備用。
4.配置 1mg/ml 小牛血清溶液備用。
5.將前處理完畢之 QCM 放入 1.2M NaOH 溶液中,靜待 15 分鐘。
6.取出 QCM 以去離子水清洗 3 次。
7.再將 QCM 放入 1.2M HCl 溶液中,靜待 5 分鐘。
8.利用去離子水將 QCM 清洗 3 次。
9.將 QCM 放入 95%乙醇中,靜待 3 分鐘。
10.取出 QCM 放到室溫中自然乾燥。
11.使用微量吸管抽取 2.5 % 戊二醛溶液 20μl,小心滴至 QCM 表面 金電極正上方,此步驟需要避光,靜待 30 分鐘。
12.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的戊二醛溶液沖洗乾 淨。
13.使用微量吸管抽取 Anti-5nm GNPs Antiserum 20μl,小心滴至 QCM 表面金電極正上方,避光,靜待 40 分鐘。
14.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的 Anti-5nm GNPs Antiserum 沖洗乾淨。
15.把表面修飾完成的 QCM 放入 1mg/ml 小牛血清溶液中 Over night。
3.3.3 QCM 表面修飾奈米金粒子
使用藥品:氯化氫(Hydrochloric acid )、氫氧化鈉(Sodium hydroxide)、乙醇(Ethanol)、去離子水(DD Water)、烷基雙硫醇 (1,6-hexanedithiol)、不同尺寸之奈米金粒子、小牛血清(Bovine serum albumin) 。
使用儀器:6 Wells Dish、夾子、微量吸管。
實驗步驟:
1.配置 1.2M NaOH 溶液備用。
2.配置 1.2M HCl 溶液備用。
3.配置 0.5 % ( v/v) 烷基雙硫醇溶液備用。
4.配置不同尺寸之奈米金粒子溶液備用。
5.配置 1mg/ml 小牛血清溶液備用。
6.將前處理完畢之 QCM 放入 1.2M NaOH 溶液中,靜待 15 分鐘。
7.取出 QCM 以去離子水清洗 3 次。
8.再將 QCM 放入 1.2M HCl 溶液中,靜待 5 分鐘。
9.利用去離子水將 QCM 清洗 3 次。
10.將 QCM 放入 95%乙醇中,靜待 5 分鐘。
11.把 QCM 移至 0.5 % (v/v) 烷基雙硫醇溶液中,靜待 30 分鐘。
12.取出 QCM 以乙醇輕輕沖洗表面。
13.利用氮氣將 QCM 表面水漬吹乾。
14.使用微量吸管抽取不同尺寸之奈米金粒子溶液 20μl,小心滴至 QCM 表面金電極正上方,靜待 1 小時。
15.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的溶液沖洗乾淨。
16.把表面修飾完成的 QCM 放入 1mg/ml 小牛血清溶液中 Over night。
3.3.4 QCM 表面修飾 Anti-H5N1(Piptide)-17nm Antiserum
使用藥品:氯化氫(Hydrochloric acid )、氫氧化鈉(Sodium hydroxide)、 乙醇(Ethanol)、去離子水(DD Water)、戊二醛
(Glutaraldehyde)、Anti-H5N1(Piptide)-17nm Antiserum、小牛血 清(Bovine serum albumin) 。
使用儀器:6 Wells Dish、夾子、微量吸管。
實驗步驟:
1.配置 1.2M NaOH 溶液備用。
2.配置 1.2M HCl 溶液備用。
3.配置 2.5 % 戊二醛溶液備用。
4.配置 1mg/ml 小牛血清溶液備用。
5.將前處理完畢之 QCM 放入 1.2M NaOH 溶液中,靜待 15 分鐘。
6.取出 QCM 以去離子水清洗 3 次。
7.再將 QCM 放入 1.2M HCl 溶液中,靜待 5 分鐘。
8.利用去離子水將 QCM 清洗 3 次。
9.將 QCM 放入 95%乙醇中,靜待 3 分鐘。
10.取出 QCM 放到室溫中自然乾燥。
11.使用微量吸管抽取 2.5 % 戊二醛溶液 20μl,小心滴至 QCM 表面 金電極正上方,此步驟需要避光,靜待 30 分鐘。
12.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的戊二醛溶液沖洗乾 淨。
13.使用微量吸管抽取 Anti-H5N1(Piptide)-17nm Antiserum 20μl,
心滴至 QCM 表面金電極正上方,避光,靜待 40 分鐘。
14.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的 Anti H5N1(Piptide) -17nm Antiserum 沖洗乾淨。
15.把表面修飾完成的 QCM 放入 1mg/ml 小牛血清溶液中 Over night。
3.3.5 QCM 表面修飾 Anti-FMDV(Piptide)-17nm Antiserum
使用藥品:氯化氫(Hydrochloric acid )、氫氧化鈉(Sodium hydroxide)、乙醇(Ethanol)、去離子水(DD Water)、戊二醛
(Glutaraldehyde)、Anti-FMDV(Piptide)-17nm Antiserum、小牛血 清(Bovine serum albumin) 。
使用儀器:6 Wells Dish、夾子、微量吸管。
實驗步驟:
1.配置 1.2M NaOH 溶液備用。
2.配置 1.2M HCl 溶液備用。
3.配置 2.5 % 戊二醛溶液備用。
4.配置 1mg/ml 小牛血清溶液備用。
5.將前處理完畢之 QCM 放入 1.2M NaOH 溶液中,靜待 15 分鐘。
6.取出 QCM 以去離子水清洗 3 次。
7.再將 QCM 放入 1.2M HCl 溶液中,靜待 5 分鐘。
8.利用去離子水將 QCM 清洗 3 次。
9.將 QCM 放入 95%乙醇中,靜待 3 分鐘。
10.取出 QCM 放到室溫中自然乾燥。
11.使用微量吸管抽取 2.5 % 戊二醛溶液 20μl,小心滴至 QCM 表面 金電極正上方,此步驟需要避光,靜待 30 分鐘。
12.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的戊二醛溶液沖洗乾 淨。
13.使用微量吸管抽取 Anti-FMDV(Piptide)-17nm Antiserum 20μl,
小心滴至 QCM 表面金電極正上方,避光,靜待 40 分鐘。
14.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多 Anti-FMDV(Piptide)-17nm Antiserum 沖洗乾淨。
15.把表面修飾完成的 QCM 放入 1mg/ml 小牛血清溶液中 Over night。
3.3.6 QCM 表面修飾 H5N1 Antiserum
使用藥品:氯化氫(Hydrochloric acid )、氫氧化鈉(Sodium hydroxide)、 乙醇(Ethanol)、去離子水(DD Water)、戊二醛
(Glutaraldehyde)、H5N1 Antiserum、小牛血清(Bovine serum albumin) 。
使用儀器:6 Wells Dish、夾子、微量吸管。
實驗步驟:
1.配置 1.2M NaOH 溶液備用。
2.配置 1.2M HCl 溶液備用。
3.配置 2.5 % 戊二醛溶液備用。
4.配置 1mg/ml 小牛血清溶液備用。
5.將前處理完畢之 QCM 放入 1.2M NaOH 溶液中,靜待 15 分鐘。
6.取出 QCM 以去離子水清洗 3 次。
7.再將 QCM 放入 1.2M HCl 溶液中,靜待 5 分鐘。
8.利用去離子水將 QCM 清洗 3 次。
9.將 QCM 放入 95%乙醇中,靜待 3 分鐘。
10.取出 QCM 放到室溫中自然乾燥。
11.使用微量吸管抽取 2.5 % 戊二醛溶液 20μl,小心滴至 QCM 表面 金電極正上方,此步驟需要避光,靜待 30 分鐘。
12.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的戊二醛溶液沖洗乾 淨。
13.使用微量吸管抽取 H5N1 Antiserum 20μl,小心滴至 QCM 表面金 電極正上方,避光,靜待 40 分鐘。
14.利用去離子水小心清洗 QCM 表面,將多餘的 H5N1 Antiserum 沖洗
乾淨。
15.把表面修飾完成的 QCM 放入 1mg/ml 小牛血清溶液中 Over night。