台農66號與紫葉種甘藷葉萃取物之抗氧化活性分析 劉彥廷、
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摘 要
在植物性化學物質中，多酚類化合物廣泛存在於蔬菜、水果中，其具強烈的抗氧化能力，研究發現，此類化合物具有清除 體內自由基的能力，有助於保護體內組織對抗氧化壓力。本研究是針對TNG 66與紫葉種兩品種之新鮮甘藷葉及乾燥處理 過之甘藷葉，經水、40％乙醇、95％乙醇以熱迴流的方式萃取，得其粗萃液，再以減壓濃縮、冷凍乾燥等方式製備萃取物 粉末。並進行總酚類化合物、總類黃酮化合物含量、抗氧化活性測定及抑菌能力試驗，其中，抗氧化活性試驗包括：清除 α,α-dipheny1-β-picrylhydrazyl (DPPH)自由基能力、亞鐵離子螯合能力、清除ABTS陽離子自由基能力、三價鐵還原力試 驗等。實驗結果顯示，就TNG 66甘藷葉而言，新鮮組萃取率以水萃取時為最高，達2.55％；乾燥組亦以水萃取時為最高，
達5.80％。就紫葉種甘藷葉而言，新鮮組萃取率以水萃取時為最高，達3.23％；乾燥組亦以水萃取時為最高，達8.41％。就 總酚化合物含量測定，TNG 66甘藷葉萃取物之總酚化合物含量，新鮮組以40％乙醇萃取時為最高，達0.97 mg/g；乾燥組 亦以40％乙醇萃取時為最高，達3.52 mg/g。紫葉種甘藷葉萃取物之總酚化合物含量，新鮮組以水萃取時為最高，達2.59 mg/g；乾燥組以40％乙醇萃取時為最高，達5.26 mg/g。就總黃酮含量測定，TNG 66甘藷葉萃取物之總類黃酮含量，新鮮 組以水萃取時為最高，達0.63 mg/g；乾燥組以95％乙醇萃取時為最高，達1.91 mg/g；紫葉種甘藷葉萃取物之總類黃酮含 量，新鮮組以水萃取時為最高，達6.11 mg/g；乾燥組以40％乙醇萃取時為最高，達5.66 mg/g。於抗氧化活性方面，以紫 葉種甘藷葉乾燥組之95％乙醇萃取物表現最佳，當萃取物濃度為0.8 mg/mL時，清除DPPH自由基能力達到99.7％；當萃取 物濃度為4.0 mg/mL時，亞鐵離子螯合能力，達到最高99.3％；當濃度為0.8 mg/mL時，清除ABTS陽離子自由基能力達到 最高99.9％；當濃度為0.8 mg/mL時，還原能力達61.3％之相對還原能力。在抑菌試驗中則以紫葉種甘藷葉新鮮組40％乙醇 萃取物表現最佳，在低濃度0.05 mg/mL下仍有良好的抑菌效果，抑菌圈為11.0 mm。
關鍵詞 : 紫葉種甘藷、甘藷葉、總酚類化合物、總類黃酮化合物、抗氧化活性試驗 目錄
封面內頁 簽名頁 中文摘要 iii 英文摘要 v 誌謝 vii 目錄 viii 圖目錄 xi 表目錄 xiii 1. 緒論 1 2. 文獻回顧 2 2.1甘藷 2 2.1.1 台灣 甘藷生長情形 2 2.1.2 甘藷葉簡介 3 2.1.3 甘藷葉之研究 6 2.2抗氧化力之研究 7 2.2.1自由基定義 7 2.2.2氧化壓力與疾病 8 2.3 抗氧化劑 8 2.4多酚類化學結構之介紹 9 2.5多酚類的食物來源 13 2.6 多酚類的抗氧化能力 14 2.7 微生物 16 2.8 甘藷葉之成 分 16 3. 材料與方法 17 3.1實驗材料 17 3.2萃取物製備 17 3.3試驗藥品 18 3.4實驗設備 19 3.5實驗架構 20 3.6抗氧化成分含量 分析 20 3.6.1總酚含量測定 20 3.6.2總類黃酮含量測定 22 3.7抗氧化活性測定 23 3.7.1清除DPPH自由基能力試驗 23 3.7.2亞 鐵離子螯合能力試驗 23 3.7.3清除ABTS自由基能力試驗 24 3.7.4還原能力 24 3.8 HPLC成分分析 25 3.9 抑菌試驗 25 4. 結果 與討論 26 4.1甘藷葉之萃取率 26 4.2總酚化合物與總類黃酮含量測定 26 4.3抗氧化活性試驗 31 4.3.1清除DPPH自由基能力 31 4.3.2亞鐵離子螯合能力 36 4.3.3清除ABTS陽離子自由基能力 38 4.3.4還原力 43 4.3.5甘藷葉萃取物抗氧化試驗之半抑制濃 度 48 4.4 HPLC成分分析 53 4.5甘藷葉萃取物對微生物的抑菌圈試驗 53 4.5.1甘藷葉萃取物對金黃葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)的抗菌作用 55 4.5.2甘藷葉萃取物對大腸桿菌( Escherichia coli )的抗菌作用 55 5. 結論 64 參考文獻 65 附錄 71 圖 目錄 xi 圖2.1 台農66號 4 圖2.2主要多酚類之化學結構 10 圖2.3類黃酮之化學結構 11 圖3.1實驗架構 21 圖4.1新鮮TNG 66甘 藷葉萃取物清除DPPH自由基之能力 32 圖4.2 TNG 66甘藷葉乾燥組萃取物清除DPPH自由基之能力 33 圖4.3新鮮紫葉種甘 藷葉萃取物清除DPPH自由基之能力 34 圖4.4紫葉種甘藷葉乾燥組萃取物清除DPPH自由基之能力 35 圖4.5新鮮TNG 66甘 藷葉萃取物亞鐵離子螯合能力 37 圖4.6 TNG 66甘藷葉萃取物乾燥組亞鐵離子螯合能力 39 圖4.7新鮮紫葉種甘藷葉萃取物亞 鐵離子螯合能力 40 圖4.8紫葉種甘藷葉萃取物乾燥組亞鐵離子螯合能力 41 圖4.9新鮮TNG 66甘藷葉萃取物清除ABTS陽離 子自由基能力 42 圖4.10 TNG 66甘藷葉萃取物乾燥組清除ABTS陽離子自由基能力 44 圖4.11新鮮紫葉種甘藷葉萃取物清 除ABTS陽離子自由基能力 45 圖4.12紫葉種甘藷葉萃取物乾燥組清除ABTS陽離子自由基能力 46 圖4.13新鮮TNG 66甘藷葉 萃取物之相對還原力 47 圖4.14 TNG 66甘藷葉萃取物乾燥組之相對還原力 49 圖4.15新鮮紫葉種甘藷葉萃取物之相對還原力 50 圖4.16紫葉種甘藷葉萃取物乾燥組之相對還原力 51 圖4.17 TNG 66甘藷葉萃取物對金黃葡萄球菌的抑菌圈試驗結果 58 圖4. 18 TNG 66甘藷葉萃取物原液對金黃葡萄球菌的抑菌圈試驗結果放大圖 59 圖4.19紫葉種甘藷葉萃取物對金黃葡萄球菌 的抑菌圈試驗結果 60 圖4.20紫葉種甘藷葉萃取物原液對金黃葡萄球菌的抑菌圈試驗結果放大圖 61 圖4.21 TNG 66甘藷葉萃 取物對大腸桿菌的抑菌圈試驗結果 62 圖4.22紫葉種甘藷葉萃取物對大腸桿菌的抑菌圈試驗結果 63 表目錄 xiii 表2.1 數種蔬 菜水解液中黃酮醇及黃酮HPLC分析結果 5 表4.1甘藷葉不同品種之不同溶劑萃取率 28 表4.2不同溶劑萃取甘藷葉之總酚化 合物含量 29 表4.3不同溶劑萃取甘藷葉之總類黃酮含量 30 表4.4不同溶劑萃取甘藷葉之半抑制濃度( IC50 ) 52 表4.5 HPLC分
析甘藷葉不同溶劑萃取物槲皮素含量 54 表4.6甘藷葉萃取物不同稀釋濃度對金黃葡萄球菌之抑菌圈大小 56 參考文獻
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