3.1 靈芝水萃物對日本鵪鶉初代培養肝細胞在分子機制上的影響
圖 30 的結果顯示：日本鵪鶉的初代培養肝細胞在 3 ng/mL、30 ng/mL 以及 300 ng/mL 三種濃度的靈芝水萃物處理下，其參與脂質生成的相關酵素 FAS 的 mRNA 表現量顯著降低，說明日本鵪鶉的肝臟細胞在接觸靈芝水萃 物後，其脂肪酸生合成的分子機制受到調控，因而降低肝細胞的脂肪堆積。
另外，在此次結果中也可明白靈芝水萃物濃度為 3 ng/mL 時已達有效作用劑 量，並且在處理濃度達 300 ng/mL 時也未出現負面效應，所以在圖 30 中並 無法看見劑量反應曲線(dose response curve)。而如欲了解開始有效作用的門 檻劑量，則需要選擇低於 3 ng/mL 的濃度進行試驗，找出靈芝水萃物的劑量 反應曲線，才能更進一步地確認。
Figure 30. The FAS gene expression of Japanese quails’ primary hepatocytes in response to different concentration of water extract from G.lucidum. n=3. Mean ± S.D. *P<0.05 vs. control.
圖三十、不同濃度的靈芝水萃物對日本鵪鶉初代培養肝細胞中 FAS 基因表現量的影響。
3.2 靈芝酒萃物對日本鵪鶉初代培養肝細胞在分子機制上的影響
另一方面，日本鵪鶉初代培養肝細胞在靈芝酒精萃取物處理後，其與動 情素相關的基因如前文提及的 APOV1(圖 31 A)和另一延長酶 ELOVL5 (fatty acid elongase 5)(圖三十一 B)的基因表現量皆在濃度 1 μg/mL 處理下出現上升 趨勢，顯示特定濃度的靈芝酒萃物對日本鵪鶉肝細胞而言具有和動情素相似 的活性，因而促進 APOV1 及 ELOVL5 的基因表現量。相對地，靈芝酒萃物 濃度為 0.01 μg/mL 時，可能還未到達有效作用劑量，使得在此處理下的肝 細胞中相關基因表現量與控制組相比並未存在顯著差異；而酒精萃取物濃度 達 100 μg/mL 時，則可能因為投入過度劑量，而對細胞產生毒性或負面效 應，讓原先預期將升高的 APOV1 及 ELOVL5 基因表現量並未增加，和控制 組間並無明顯趨勢(圖三十一)。
A.
B.
圖三十一、不同濃度的靈芝酒萃物對日本鵪鶉初代培養肝細胞中動情素相關基因 表現量的影響。(A) APOV1。(B) ELOVL5
Figure 31. The estrogen-related gene expression of Japanese quails’ primary hepatocytes in response to different concentration of ethanol extract from G.lucidum.
(A) APOV1. (B) ELOVL5. n=3. Mean ± S.D.
3.3 小結
在細胞試驗的結果中，分別呈現靈芝的熱水萃取物及酒精萃取物在不同 濃度處理下，對日本鵪鶉初代培養肝細胞的生理影響，並從分子證據可以做 出以下兩點判斷：
一、靈芝水萃物中的有效成分在濃度至少為 3 ng/mL 的處理下，可降低日本 鵪鶉肝細胞內脂質生成相關基因 FAS 的表現量。
二、靈芝酒萃物在濃度 1 μg/mL 的處理下，會因其具有動情素相似的活性，
增加日本鵪鶉肝細胞內動情素相關基因 APOV1 及 ELOVL5 的表現量。
以上兩點結果顯示：靈芝中所存在的機能性成分，對日本鵪鶉的肝臟生 理而言，可能存在兩種相反效應，一種是能透過調控肝臟脂質生成作用，降 低肝臟中的脂肪堆積；另一種則是透過與動情素相似的特性，促進肝臟內的 脂質生成作用。總結而言，在此次的細胞試驗中，可以發現靈芝內性質不同 的有效成分，會對產蛋家禽的天然性脂肪肝模式產生不同影響，而機能性物 質間的有效劑量及交互作用，將共同影響動物試驗的生理表現。
肆、實驗討論
油酯因而漸漸蓄積於肝臟(Hermier et. al., 1996)，因此，在此次試驗中，40 週齡的日本鵪鶉天然脂肪肝模式可被視為治療模式，呈現日本鵪鶉在已患有也將具有改善效果；另一方面，在預防模式下，低濃度靈芝(0.5%及 1%)在
(polysaccharide)(Huang and ning, 2010)，其種類繁多且分子量涵蓋範圍極 廣，被相信具有降血脂、抗發炎與抗氧化的功效。而在此次細胞試驗 上皮黏膜形成黏蛋白(mucin) (Yang et. al., 2017)，藉此影響脂肪的吸收與 代謝，降低肥胖誘導的相關疾病。