吸煙者血中 8-hydroxydeoxyguanosine（8-OH-dG）和 8-nitroguanine
（8-NO2-G）的量比非吸煙者明顯有意義的增加，而且與吸煙程度有 劑量效應的關係。在本實驗也發現，暴露煙霧的大白鼠血液和肺組織 中，隨著香煙暴露量的增加，也和 8-OH-dG 和 8-NO2-G 的形成有正相 關。許多致突變物質，如腫瘤促進者(tumor promoter)及化學致癌物質 (chemical carcinogens)，都會產生氧自由基(oxygen radicals)，與 DNA 生成 8-OH-dG，造成哺乳類細胞 DNA 發生 GC-TA transversions( 56, 57 )。所以 8-OH-dG 被用來作為由氧自由基引起 DNA 傷害的指標，在 DNA 複製及 癌化過程具有致突變性( 58 )。因為 8-OH-dG 是氧自由基造 DNA 傷害 所產生的，而有許多致突變物質都可以產生氧自由基，所以由氧自由 基引起8-OH-dG 的生成為非特異性的 DNA 損害指標。在過去的研究認 為只有 NO 快速與 O2.反應所生成的 peroxynitrite 才有能力攻擊 DNA，生 成 8-NO2-G。所以我們認為 8-NO2-G 更可以作為由 NO 造成 DNA 氧化性 傷害的一個特異性的生物指標。
流行病學的研究顯示，吸煙會造成人類各種癌症。在基礎醫學、
臨床醫學研究也顯示，煙霧會產生一些致癌物質，如 carcinogenic nitrosamines、polycyclic aromatic hydrocarbons、aromatic amines 和 free radicals
（6, 59,60）。在吸煙的毒理作用 free radicals 扮演一個很重要的角色。
吸煙會促使 macrophage 衍生出 Superoxide（O2.）/ hydrogen peroxide（H2O2）
的 V79 cells 中，發現有明顯的 chromosomal aberrations, sister-chromatid exchanges 和 DNA single-strand breaks。除此之外，Isomura 等人也證實 在 in vivo ， 暴 露 NO2 的 大 白 鼠 肺 細 胞 的 初 代 培 養 ， 發 現 有 ouabain-resistant mutations 和 chromosomal aberrations 的誘導產生。為了 製備一個 genotoxic effects 根據 Yermilov 等人的研究，本實驗室將 NaNO2
和 H2O2反應生成黃色的peroxynitrite（ONOO.），在 in vitro 與 guanine 反 應，最後形成8-NO2-G 的產物，再以 HPLC-ESI mass 分析質量後確認。
最近本實驗室也發現 NO 在人類肺纖維細胞（MRC-5 cells）或 cell free systems 中有 8-NO2-G 的生成 ( 30 )。
香煙會造成人類各種癌症。然而，香煙氣相（gas-phase）部分成 份尚未完全證實，其致癌的分子機制仍不清楚。只知香煙煙霧中的氣 相成分，能夠造成 DNA 鹼基的 deamination 及 single-strand breaks ；在 人類呼吸道上皮細胞產生 xanthine 和 hypoxanthine。Spencer 等人指出，
RNS （reactive nitrogen species）可能與 DNA damage 有關（63）。
Brunnemann 等人報導，每支香煙至少含有 600 ppm 以上的 NO (64)。
在香煙中 nitrate 的量與主成分 NO 的濃度成線性關係。在本篇我們首 先證實吸煙者及煙霧中大白鼠其血中 8-NO2-G 的形成，會隨香煙暴露 量及nitrogen oxides（NOx）的濃度，有明顯的劑量效應。香煙中 NOx 的 濃度與 8-OH-dG 和 8-NO2-G 的形成有關，其反應機制還不清楚，先前 的研究指出，8-NO2-G 的形成是因為 peroxynitrite (28)，我們實驗是最近 發現氣體性 NOx也有能力攻擊DNA生成 (30). DNA的nitration 在 C-8
根據以上證據，我們提出香煙中 NOx 致肺病變之作用—8-NO2-G 的形成。我們認為更可以作為 NOx 造成 DNA 氧化性傷害的一個特異 性生物指標。
Summary：
？ ？
iNOS
NO
香煙煙霧中 NOx 致肺病變之可能機轉
NOx
( cigarette）