蛋白質的磷酸化作用，在真核細胞的生長、分化和其他反應的調 控，是一個很重要的成分（56）。這些 phosphotyrosine proteins 是訊息傳 遞路徑重要的關鍵，連結了來自細胞表面到細胞核的反應事件。
相關於 NOx 可能活化 iNOS 及促進增生之訊息傳遞背景：
1. MAKP kinase
MAP kinase（mitogen-activated protein kinase）是屬於 protein serine/
threonine kinase，最早是因其能磷酸化 microtubule-associated protein 而被 確認 ( 57)。許多研究報告證實 MAP kinase 可以受多種細胞外訊息活 化，包括growth factor、stress、inflammatory cytokinase 及 lipo- polysaccharide
（65）等刺激而活化 MAPK 的上游成員，包含了 MAPK kinase kinase
（MAPKKK），如 MEKK1 及 Raf 及一些基因（包括 c-jun、c-fos、c-myc、
iNOS）的表現，使得轉錄作用增加，造成增生、發炎和癌化（58-61）。
最近有研究指出，NO 可以活化 MAP kinase，如 ERK、P38 及 JNK 等（62）， 證實MAK kinase 的確參與 NO 的訊息傳遞路徑。
2. NF-κB
NF-κB 為轉錄因子，已被證實可以受到 reactive oxygen 及 Reactive nitrogen species，包括 NO 等因子活化，而去調節訊息傳遞過程（63）；
須的（67-70）。經由NF-κB 不當調控的轉錄作用，已證實與一些疾病，
包括急性發炎、病毒複製和癌症有關（71-73）。
3. ATF-2
ATF-2 轉 錄 因 子 在 誘 發 neoplastic transformation 及 參 與 細 胞 增 生、分化、發炎有關等基因扮演重要的角色，也被認為和調節 tumor
progression、metastasis 有關。
4.STAT-1
Signal transducter and activator of transcription (STATs) 為 cytoplasmic transcription factors，經 translocate 至細胞核去調節由 cytokine、growth factor 刺激所反應相關基因的表現，其 transcriptional activation 也可能受到 MAPK-like kinase 活化，STATs 訊息路徑包含了許多正常的生物反應，
包括細胞分化、增生、凋謝死亡。另外，許多的研究報告指出 STATs 也可受oncogenes 活化，並且在人類腫瘤及腫瘤細胞株常偵測到 STATs 的活化。最近的研究證據也建立 STATs 促進癌化的模式：持續活化 STATs 訊息路徑導致參與 maligant transformation 相關的基因表現，經由 誘發細胞增生、阻斷細胞分化、防止細胞凋謝死亡，使得 maligant transformation 及 turmorigenesis ( 75 )。有研究指出 STAT1 促進 RAW 264.7 巨噬細胞之 iNOS 的表現 ( 76 )。
的傳遞者。另外，Akt/PKB 的活化主要是促使細胞生存。最近研究發 現 tumor suppressor PTEN 會拮抗 PI-3-kinase 及 Akt/PKB 的活化，顯示了 Akt/PKB 可能是癌症發生的重要因子。至於 AKT 的下游，目前已知有 三個：Bad、GSK3、p70S6K。
Bad 是 Bcl-2 家族的一員，原本它扮演促進細胞死亡的因子：當 它在粒腺體，與 Bcl-2 和 Bcl-xL所組成的異質雙體結合著的時候，Bcl-2、
Bcl-xL這兩種存活因子會無法發揮作用；可是一但 Bad 被 Akt 磷酸化，
它會從粒腺體 translocate 到細胞質，而與 Bcl-2-Bcl-xL雙體解離，再與 14-3-3 蛋白結合，被釋出的 Bcl-2 和 Bcl-xL此時得以執行保護細胞或抑 制細胞凋亡的功能。尤其是 Bcl-xL，它可控制粒腺體的 cytochrome c，
不讓它從粒腺體釋出，因此更進一步抑制了下游caspases 導致細胞死 亡的能力，稱職地扮演 “存活因子”的角色，所以 AKT 藉由磷酸化 Bad，
使 Bad 與 Bcl-2-Bcl-xL分離，達到保護細胞不死的目的（77-80）。
6. p53
p53 ，為分子量 53Kda 的蛋白質，可以調控 DNA 的傷害及一些基 因毒物壓力所造成的反應，是維持基因穩定的重要因子。在一些癌症 發展的過程中，經常有 P53 的功能喪失或 P53 突變的情形。將 P53 殖 入已經變性 ( transformed )的細胞中，可以造成細胞的生長停滯 (cell growth arrest)及細胞的凋謝死亡。
在正常的情形下，P53 蛋白的表現量很低，但是當發生 DNA 傷害
P53 下游可以調控細胞走兩個路徑：細胞生長週期停滯（cell growth arrest）及細胞的凋謝死亡（apoptosis）。在 cell cycle arrest 方面，p53 可藉由調控p21WAF1、P16、cyclin D1、cdk4 及 Rb 來導致 cell cycle arrest。
在 apoptosis 方面，則是利用 Bax 及 IGF-BP3 來決定 p53 所調控細胞 死亡途徑（82, 83）。過度表現 Bcl-2 可以抑制 p53 導致的 apoptosis，
而 Bax 可以與 Bcl-2 結合而產生拮抗作用。1996 年 Wang 等發現 cytochrome c 從 mitochodria 釋放至 cytosol 可活化 CPP32，導致細胞 走向apoptosis。
7.細胞週期停止作用相關之蛋白
p16-cyclin D1-cdk4-Rb pathway 是調節細胞週期 G1-to S phase 的重 要途徑，cyclin D1 與 cdk4 complex 會使 Rb 磷酸化，活化轉錄因子 E2F，cdk2-cyclin-p21-PCNA complex 也活化 G1-to-S-phase，當 p21 增 加時，此二途徑都會被阻止，造成細胞週期停止於 G0/G1 phase。
為了證實吸煙會致肺病變其訊息傳遞的角色，我們設計了動物曝 露煙霧的系統 (如本論文第一部分 Fig. 6)，以便研究 MAPKs、NF- κB、iNOS 和 nuclear protooncogene 的分子機轉。