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貳、結果

在文檔中 二、實驗材料 (頁 39-43)

研究對象的特徵

Table 1 是描述 74 位研究對象 ( 53 位男性和 21 位女性 )之性別、

年齡(平均 56 歲以上)及症狀,並根據吸煙的程度,分為五組,分 別是:正常控制組( non-smoking health control ), n=12;輕度抽煙組( light smoker)每天 1 包,吸煙 5 年, n=15;中度吸煙組( middle-smoker) 每天 2 包,吸煙 5-10 年, n=21;重度吸煙組( heavy-smoker) 每天大於 2 包,

吸煙超過10 年, n=12; 重度吸煙的肺癌患者( heavy smoker with lung cancer), n=14。並顯示它們血中 8-OH-dG、8-NO2-G 的濃度。

吸煙對於血中白血球數目及 nitrite 濃度的影響

正常人的白血球數目平均介於 5,000-10,000 / ul,實驗發現中度、

重度吸煙及肺癌患者,其白血球數都介於 10,000-13,500/ ul 不等,如 Figure 1A 所示,顯示隨著吸煙程度的增加,發炎現象亦隨之增加。

然而,吸煙者血清中 nitrite 的濃度,如 Figure 1B 所示。在正常控 制組(C)、輕度抽煙組(L-S)、中度抽煙組(M-S)、重度抽煙組(H-S)

及重度抽煙的肺癌患者(Cancer H-S),其 nitrite 的平均濃度分別為 18.96、38.99、46.70、55.46 和 70.10μM,與正常控制組(C)比較分別 是增加 2.1、 2.5、 2.9 和 3.7 倍高 ( P<0.0001 )。

吸煙對於血清中抗氧化相關酵素活性的影響

Figure 3 係指吸煙與非吸煙者血清中抗氧化相關酵素:superoxide dimutase(SOD)與 glutathione peroxidase(GSH-Px)活性之影響。結果 顯示,隨著吸煙程度的增加,血清中 GSH Px 活性隨之降低,如Figure 3B 所示;另一抗氧化酵素 SOD 的活性則無顯著改變,如 Figure 3A。

吸煙者血中 8-OH-dG 和 8-NO2-G 之形成

在正常控制組(C)、輕度(L-S)、中度(M-S)、重度吸煙組(H-S)

和重度肺癌患者(Cancer H-S),其血中 8-OH-dG 分別為 0.11, 049, 1.03, 3.60, 13.98 ng/ ug DNA,如 Figure 4A 所示;而 8-NO2-G 則是 0.02, 0.90, 1.23, 1.43, 3.62 ng/ug DNA,在重度吸煙的肺癌患者增加特別明顯(P<0.001),

Figure 4B 所示。

Figure 5A-F 以 HPLC-ECD 偵測吸煙者血中 DNA 8-OH-dG 和 8-NO2-G 形成之圖譜。(A)分別為 8-OH-dG (PeakⅠ)和 8-NO2-G(Peak

Ⅱ)之標準品,滯留時間(retention time)分別為 6.29、8.49 min;(B)

為正常控制組;(C)為輕度吸煙組(L-S)(D)為中度吸煙組(M-S);

(E)為重度吸煙組(H-S)(F)為重度吸煙之肺癌患者(Cancer H-S)。

其圖(C~ F)組都有 8-OH-dG 和 8-NO2-G 的形成,特別是重度吸煙組

(H-S)、重度吸煙之肺癌患者(Cancer H-S)有明顯的劑量效應 ( P 值 分別為:P < 0.001 ; P < 0.0001) ; 為證明吸煙者血中確實偵測到 8-H-dG

大白鼠暴露煙霧及 NOx 濃度的偵測

分別以 5, 10, 15 cigarettes 點燃於 A 暴露槽,如Figure 6A 所示,以 機械幫浦將空氣(200 liter/min)混合輸送至 B 暴露箱中。

為了控制暴露的條件,期間 30 分鐘以 ambient monitor (APNA -360)

偵測暴露箱中 NOx(NO + NO2)濃度變化,如Figure 6B。在暴露 10 分 鐘時NOx 的濃度達最高,分別為 7.1、14.5 和 25.0 ppm,於 30 分鐘漸 回覆至正常,且顯示 cigarette 數目與 NOx 成正比。

煙霧中大白鼠血中白血球數目及 nitrite(NOx)濃度的影響 與正常控制組比較,暴露 5、10、15 支香煙,分別使大白鼠血中 白血球數目增加 1.2-, 1.3-, 1.5-倍,如 Figure 7A 所示,表示有發炎現象 產生;而nitrite 的濃度,隨著煙霧增加而增加,分別是 1.7-, 2.1-, 2.6-倍(P < 0.001),如 Figure 7B 所示。因此,曝露煙霧使 nitric oxide(NO)

濃度增加與香煙曝露量有關。

煙霧中大白鼠血及肺組織中 8-OH-dG 和 8-NO2-G 之形成

以 HPLC-ECD 分析血中白血球及肺組織中8-OH-dG 和8-NO2-G 的形 成,其滯留時間(retention time)分別為 6.29、8.49 min(data not show)。隨 著香煙暴露量的增加,與正常控制組比較,分別使大白鼠血中 8-OH-dG

組比較,分別使8-OH-dG 有 15.76±6.77, 22.82±5.02, 32.62±15.52 ng/ug DNA 的形成(P < 0.0001),如Figure 9A 所示;而 8-NO2-G 則是有 0.17±0.41, 1.65±3.15, 23.5±20.75 和 37.58±17.55 ng/ug DNA 的形成,僅重度吸煙 之肺癌患者(Cancer H-S)有明顯的增加(P < 0.0001),如 Figure 9B 所 示。

無論在血液或及肺組織中均顯示隨 cigarette 數目的增加,8-OH-dG 及 8-NO2-G 之形成均有劑量相關性(Fig. 8, 9);顯示曝露較多的 cigarette,血清中 NOx 濃度增加,也造成 8-OH-dG 及 8-NO2-G 增加。然 而正常控制組,8-OH-dG 和 8-NO2-G 幾乎沒有被偵測。

在文檔中 二、實驗材料 (頁 39-43)

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