第四章 實驗結果與討論
第五節 含有秋水仙素高分子薄膜光照實驗
秋水仙素是一種光敏感性物質，經由光照秋水仙素會發生秋水仙素之
光反應，形成立體結構與秋水仙素相異之產物包括有 β-lumicolchicine
（β-LC）、γ-lumicolchicine（γ-LC）和 α-lumicolchicine（α-LC），故進行光
照實驗主要是希望進一步了解高分子形成之薄膜是否對於秋水仙素有穩定 結構之功效。然而在文獻中（孫,2003； Nery et al., 2001）證實光產物中之 γ-LC 和 α-LC 的產量極少，主要是 β-LC，並且在光照定量秋水仙素水溶液
所得光產物β-LC 之質量佔所有秋水仙素的 0.93%∼1.05%。所以進行光照含 有秋水仙素高分子薄膜實驗中，以HPLC 同時偵測秋水仙素和 β-LC 的釋放 量。由 HPLC 層析之結果如圖 4-4 所示，β-LC 通過層析管柱的時間約為 11.717 min 左右，其吸收光譜如圖 4-5 所示，包含 222.5nm、266.3nm 和 337.8nm。
光照實驗的方式是將 PLA 與 PLGA 高分子混合秋水仙素形成之薄膜置 於距15 瓦日光燈管 20cm 處連續照光 24 小時，之後如同高分子薄膜控制釋 放秋水仙素之流程，依預定時間更換新鮮之PBS buffer，並由倒出之緩衝液 中取 20 μL 進行 HPLC 分析。
PLA/Col、PLGA50:50/Col、PLGA50:50(sigma)/Col 及 PLGA75:25/Col 薄膜光照後秋水仙素之累積釋放結果如圖4-17 所示。
光照高分子薄膜秋水仙素之累積釋放率（%）是依下列公式計算：
累積釋放率（%）＝[（Wcol＋Wβ-LC）/W0] ×100%
圖 4-17.經由 24 小時光照PLA/Col、PLGA50:50/Col、PLGA50:50(sigma)/Col、
PLGA75:25/Col 薄膜 28 天內秋水仙素的累積釋放率。
由圖 4-17 的結果可見，PLA/Col 薄膜經由光照反應的釋放在實驗初期 仍呈現大量 Burst，而三種 PLGA/Col 薄膜有較小 Burst。光照之後 28 天的 累積釋放率仍以PLA/Col 薄膜最多達 45.06%， PLGA50:50/Col 為 4.52%、
PLGA50:50(sigma)/Col 薄膜為 4.97%、而 PLGA75:25/Col 薄膜為 10.73%。
圖4-18 為含有秋水仙素高分子薄膜經光照與不照光之平均釋放速率。
（a）PLA/Col 薄膜（b）PLGA50:50/Col 薄膜
（c）PLGA50:50(sigma)/Col 薄膜（d）PLGA75:25/Col 薄膜。
由圖 4-18 所示，經由光照各種薄膜的秋水仙素平均釋放速率依然是以 實驗初期最快並隨時間遞減，除了 PLGA50:50/Col 薄膜照光的平均釋放速 率小於不照光之PLGA50:50/Col 薄膜外，PLA/Col、PLGA50:50(sigma)/Col、
PLGA75:25/Col 薄膜照光與不照光的平均釋放速率線型幾乎相同，表示光照
率未明顯增加外，三種PLGA/Col 薄膜的平均釋放速率都有上升的趨勢。
（a）PLA/Col 薄膜（b）PLGA50:50/Col 薄膜
（c）PLGA50:50(sigma)/Col 薄膜（d）PLGA75:25/Col 薄膜。
(a) (b)
(c) (d)
圖4-20 是含秋水仙素高分子薄膜照光後 28 天 β-LC 之累積釋放率。
例為 0.933%∼1.05%相比差異並不大；PLGA50:50/Col 薄膜光照後經過 28 天的釋放，由HPLC 測得之所有累積釋放之 β-LC 佔所有釋放總量的 9.1%，
是 PLA/Col 薄膜釋放比例的 10 倍，顯示 PLGA50:50 高分子對秋水仙素結 構之穩定不如PLA 高分子； PLGA50:50(sigma)/Col 薄膜光照後經過 28 天 的釋放，由HPLC 測得之所有累積釋放之 β-LC 佔所有釋放總量的 9.73%，
β-LC
釋放比例近似PLGA50:50/Col 薄膜；而 PLGA75:25/Col 薄膜光照後經過 28 天的釋放，由HPLC 測得之所有累積釋放之 β-LC 佔所有釋放總量的 6.15%，
其有低於光照PLGA50:50/Col 形成之 β-LC 產量，即乳酸比例愈高，光照所 得之β-LC 愈少。
文獻（Chapman et al., 1963）中利用 NMR 證實 β-LC 的結構中有分子
內氫鍵的產生，即原本秋水仙素上之 C 環經光照後進行環異構化反應，C
環上C=O 的 O 原子與 B 環上 N-H 的 H 原子形成分子內氫鍵，因而形成光 產物β-LC 的結構。由光照實驗結果顯示，相較於 PLGA 高分子，PLA 高分
子和秋水仙素的交互作用有助於穩定秋水仙素之結構，而當 PLGA 高分子
之乳酸比例愈高，薄膜內秋水仙素經光照產生光產物的比例愈低，也就愈 能穩定秋水仙素的結構，推測可能是PLA 分子上 C＝O 之 O 原子和秋水仙 素B 環 N-H 之 H 原子形成分子間氫鍵，故妨礙了秋水仙素在光照反應中 C 環行異構化反應產生分子內氫鍵，所以實驗所得之β-LC 的比例較少，然而，
PLGA 與秋水仙素之交互作用則不如 PLA，由於 PLGA 為 PLA 與 PGA 以
不定比例開環聚合而成，因而可能降低了 PLGA 與秋水仙素形成分子間氫
鍵之比例，遂使得秋水仙素在光照下有較高產生分子內氫鍵形成β-LC 的機 會，對於秋水仙素結構的穩定不如PLA。