（一）秋水仙素之迴歸分析
將秋水仙素溶於甲醇，配製成濃度分別為0.6、0.35 及 0.25μg/μL 等三 種標準溶液（Standard solution），在室溫下分別將三種標準溶液稀釋為 0.1∼0.0001μg/μL，如表 3-1 所示。每個樣本溶液取 20μL 注入 HPLC 偵測，
進行迴歸分析。
標準溶液 濃度（μg/μL） 樣本溶液 濃度（μg/μL） Amount（ng）
A 0.6 a 0.1 2000
b 0.05 1000
B 0.35 c 0.01 200
d 0.005 100
C 0.25 e 0.001 20
f 0.0001 2
表3-1.配製進行迴歸分析之 sample solutions。
（二）秋水仙素光反應之迴歸分析
將秋水仙素溶於水中配成濃度為0.1μg/μl 之標準溶液，分別進行 0、1、
2、3、4、6、8、10、12、24、36、48、60 小時之光照（以15W 之日光燈 距樣本20cm 處連續照光）。每個Sample solution 在照光後取 20μL 注入 HPLC
（梯度泵送系統：等位沖提（Isocratic elution）之沖提液：Acetonitrile 30%：
Water 70%；沖提速率：1.5 ml/min；解析度：1.2 nm；偵測範圍：210 nm ∼ 400 nm）偵測秋水仙素及其主要光產物β-LC 的量，進行迴歸分析。
（三）高分子薄膜之製備
先秤量直徑2.4 公分之圓形玻璃瓶空瓶質量，再秤取約 0.1 克的 PLA 高分子置於瓶中，加入1.5ml DCM 待其溶解，置於室溫下揮發一天後改放 入真空乾燥器，每日抽氣二次使溶劑揮發至質量不再改變，秤量玻璃瓶含 薄膜之質量。
製得之薄膜重＝玻璃瓶含薄膜之質量－玻璃瓶空瓶質量。
PLGA 50：50、PLGA 75：25 的高分子薄膜也依上述方式製備。
（四）含秋水仙素高分子薄膜之製備
先秤量直徑2.4 cm 的圓形玻璃瓶空瓶質量，再秤取約 11.1mg 的
Colchicine 和 0.1g 的 PLA 放入玻璃瓶內，加入 1.5ml 的 DCM，置於室溫避 光處待其溶解並揮發，一天後改放入真空乾燥器，每日抽氣兩次將溶劑揮 發至質量不再改變，秤量玻璃瓶含薄膜之質量。
製得之含秋水仙薄膜重＝玻璃瓶含薄膜之質量－玻璃瓶空瓶質量。
PLGA 50：50、PLGA 75：25 含秋水仙素高分子薄膜也依上述方式製備。
（五）高分子薄膜的降解
形成 PLA 高分子薄膜的玻璃瓶加入 PBS 緩衝液（pH=7.4）2ml 後，置 於室溫下，2 小時後倒掉 PBS 溶液，接著加入甲醇 10ml 沖洗玻璃瓶後倒棄，
約10 至 15 分鐘使甲醇揮發後秤重，測量薄膜之濕重。秤重完將玻璃瓶放 至真空乾燥器揮發三天，每天抽氣兩次，至質量不再改變後秤重，測量薄 膜之乾重。每次秤完乾重後加入新鮮的PBS 溶液 2ml。
依上述步驟分別測量浸泡PBS（pH=7.4）緩衝液 2 小時、 6 小時、12 小時、1、2、3、5、7、9、11、14、17、21、28 天的薄膜濕重與乾重。
PLGA 50：50、PLGA 75：25 的高分子薄膜降解也依上述步驟。
（六）秋水仙素體外控制釋放
形成PLA/Colchicine高分子薄膜的玻璃瓶加入PBS緩衝液（pH=7.4）2ml 靜置約10分鐘，倒出PBS溶液，取20μl注入HPLC測量Colchicine的釋放量（梯 度泵送系統：等位沖提之沖提液：Acetonitrile 30%：Water 70%；沖提速率：
2 ml/min；解析度：1.2 nm；偵測範圍：210 nm ∼ 400 nm）。接著在玻璃瓶 內加入10ml甲醇沖洗玻璃瓶後倒棄，約10至15分鐘待甲醇揮發後秤重，測 量薄膜之濕重。秤重完將玻璃瓶放至真空乾燥器揮發三天，每天抽氣兩次，
至質量不再改變後秤重，測量薄膜之乾重。每次秤完乾重後加入新鮮的PBS 緩衝液2ml。
依上述步驟分別測量2 小時、6 小時、12 小時、1、2、3、5、7、9、
11、14、17、21、28 天的 Colchicine 釋放量及薄膜質量變化。
PLGA 50：50/Colchicine、PLGA 75：25/Colchicine 高分子薄膜也依上 述方式測量體外釋放速率。
（七）光照高分子薄膜之控制釋放
先秤量直徑2.4 cm 的圓形玻璃瓶質量，再秤取約 11.1mg 的 Colchicine 和0.1g 的 PLA 放入玻璃瓶內，加入 1.5ml 的 DCM 待其溶解，並置於距離 15 瓦日光燈管 20 公分處照光 24 小時，之後改放入真空乾燥器，每日抽氣 兩次將溶劑揮發至質量不再改變，秤量玻璃瓶含薄膜之質量。
形成PLA/Colchicine 高分子薄膜的玻璃瓶加入 PBS 緩衝液（pH=7.4）
2ml 靜置約 10 分鐘，倒出 PBS 溶液，取 20μl 注入 HPLC 測量 Colchicine 的釋放量。接著在玻璃瓶內加入10ml 甲醇沖洗後倒棄，約 10 至 15 分鐘待 甲醇揮發後秤重，測量薄膜之濕重。秤重完將玻璃瓶放至真空乾燥器揮發 三天，每天抽氣兩次，至質量不再改變後秤重，測量薄膜之乾重。每次秤 完乾重後加入新鮮的PBS 緩衝液 2ml。
依上述步驟分別測量2 小時、6 小時、12 小時、1、2、3、5、7、9、
11、14、17、21、28 天的 Colchicine 釋放量及薄膜質量變化。
PLGA 50：50/Colchicine、PLGA 75：25/Colchicine 高分子薄膜也依上 述方式進行光照實驗。