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第六章 實驗結果

6.1 外植片體活性分析

6.1.1 以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 15、30 與 60 分鐘 後,在有無磁場冷凍處理下,對解凍後活性的影響

大鼠門齒整顆浸泡 5%或 10% DMSO 冷凍保護劑後再冷凍處理。

解凍後,其牙根端部位牙髓 (root) 在外植片體活性分析下與無磁場 冷凍處理組作比較,以 5%或 10% DMSO 浸泡 15、30 與 60 分鐘的 情況下,有磁場冷凍組的解凍後活性皆優於無磁場冷凍組 (p<0.05) (如圖二 (A) (B) (C))。

不論有無磁場以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 15、30 與 60 分鐘的情況下,牙冠端牙髓皆沒有觀察到解凍後的活性現象 (如 圖二 (A) (B) (C))。無磁場冷凍下,大鼠門齒中間片段牙髓皆沒有觀 察到解凍後的活性現象,但以 10% DMSO 浸泡 30 與 60 分鐘的情況 下,有磁場冷凍組的中間片段牙髓會有解凍後活性現象 (如圖二 (B) (C))。

以 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 60 分鐘後,其牙根端片段會有 牙髓組織解凍後活性降低現象 (如圖二 (C)),而以 5% DMSO 浸泡 30 分鐘組其解凍後活性最佳 (如圖二 (B))。但在磁場冷凍下,以 5%

或 10% DMSO 浸泡 15 與 30 分鐘,其解凍後活性沒有顯著差異(如圖 二 (A) (B))。以 5% DMSO 浸泡 15 分鐘在有磁場冷凍下其解凍後活

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性與 10% DMSO 浸泡 15 分鐘組無顯著差異,但在無磁場冷凍下 10%

DMSO 顯著優於 5% DMSO 浸泡 15 分鐘組 (p<0.05) (如圖二 (A))。

6.1.2 以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 15、30 與 60 分鐘 後,在有無磁場冷凍處理下,對牙根端片段活性的影響

有磁場冷凍下,大鼠整顆門齒解凍後,牙根端片段活性以 10%

DMSO 浸泡 60 分鐘組顯著低於 5% DMSO 浸泡 30 與 60 分鐘的組別 (p<0.05)。牙根端片段活性以 10% DMSO 浸泡 60 分鐘組也顯著低於 10% DMSO 浸泡 15 與 30 分鐘的組別 (p<0.05) (如圖三)。

無磁場冷凍下,以 10% DMSO 浸泡 60 分鐘組顯著的低於 5%

DMSO 浸泡 30 與 60 分鐘的組別 (p<0.05)。牙根端片段活性以 10%

DMSO 浸泡 60 分鐘組也顯著低於 10% DMSO 浸泡 15 與 30 分鐘的 組別 (p<0.05)。另一方面,在無磁場冷凍下,5% DMSO 浸泡 15 分 鐘組也顯著的低於 5% DMSO 浸泡 30 分鐘或 10% DMSO 浸泡 15 與 30 分鐘的組別 (p<0.05) (如圖四)。

不論是有無磁場冷凍下,以 10% DMSO 浸泡 60 分鐘會有牙根端 牙髓組織解凍後活性降低現象,而以 5% DMSO 浸泡 30 分鐘後其解 凍後活性最佳 (如圖三,圖四)。以 5% DMSO 浸泡 15 分鐘在有磁場 冷凍下其解凍後活性與 10% DMSO 浸泡 15 分鐘組無顯著差異 (如圖 三),但在無磁場冷凍下 10% DMSO 顯著地優於 5% DMSO 浸泡 15 分鐘組 (p<0.05) (如圖四)。

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6.1.3 以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 15、30 與 60 分鐘後,在有無磁場冷凍處理下,對解凍後活性的影響

大鼠門齒裸露牙髓以 5% 或 10% DMSO 浸泡 15、30 與 60 分鐘 後再以磁場冷凍處理,其牙冠部位牙髓 (coronal) 皆有活性反應。(以 5% DMSO 浸泡 15 分鐘並以無磁場冷凍處理的組別除外,此組別的 牙冠端片段沒有觀察到解凍後的活性現象) (如圖五 (A))。其他牙髓 冷凍組皆有觀察到中間片段與牙根端片段活性 (如圖五 (A) (B) (C))。

以 5%或 10% DMSO 浸泡 15、30 與 60 分鐘的情況下,大鼠門齒 牙髓的牙根片段以有磁場冷凍處理組優於無磁場冷凍處理組。大鼠 門齒牙髓中間與牙冠端片段以有磁場冷凍及 5% DMSO 冷凍保護劑 的組別有最佳冷凍效果 (如圖五 (A) (B) (C))。

以 5% DMSO 浸泡 30 與 60 分鐘的情況下,大鼠門齒牙髓的牙冠 端片段以有磁場冷凍降溫處理組皆優於無磁場冷凍處理組,但 5%

DMSO 與 10% DMSO 組之間無顯著差異 (如圖五(A)(B))。

以 5%與 10% DMSO 浸泡 15、30 與 60 分鐘的組別,在有磁場冷 凍處理下皆沒有顯著差異(如圖五(A)(B)(C)),但大鼠門齒牙髓牙根端 片段以 10% DMSO 浸泡 60 分鐘的組別,其解凍後活性顯著低於 5%

DMSO 組 (p<0.05) (如圖五(C))。

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6.1.4 以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 15、30 與 60 分鐘後,在有磁場冷凍處理下,對解凍後各片段活性的影響

大鼠裸露牙髓組在磁場冷凍解凍後之牙髓活性以牙根端為最佳,

中間與牙冠端次之 (如圖六 (A) (B) (C))。不論是牙冠片段,中間片 段或牙根片段牙髓組織,以 10% DMSO 浸泡 60 分鐘會有牙髓組織 解凍後活性降低現象(除了 5% DMSO 浸泡 15 分鐘組以外),而以 5%

DMSO 浸泡 30 分鐘組其解凍後活性最佳 (如圖六 (A) (B) (C))。裸 露牙髓組的牙冠、中間與牙根片段,以 5% DMSO 浸泡 15 或 30 分 鐘,在有磁場冷凍下其解凍後活性與 10% DMSO 浸泡 15 或 30 分鐘 組無顯著差異 (如圖六 (A) (B) (C))。 (牙冠端牙髓的 Odontoblast layer 較厚,且 Odontoblast 不易從組織爬離細胞)。

6.1.5 以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 15、30 與 60 分鐘後,在無磁場冷凍處理下,對解凍後各片段活性的影響

大鼠裸露牙髓組在無磁場冷凍解凍後之牙髓活性以牙根端為最 佳,中間與牙冠端次之 (如圖七 (A) (B) (C))。無磁場冷凍下,以 10%

DMSO 浸泡 60 分鐘組在牙根端片段其活性皆低於其他時間與濃度的 組別 (除了 5% DMSO 浸泡 15 分鐘組以外) (如圖七 (A) (B) (C))。無 磁場冷凍下,以 10% DMSO 浸泡 15 分鐘比 5% DMSO 浸泡 15 分鐘 組為佳 (如圖七 (A) (B) (C))。

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6.1.6 以 5%或 10% DMSO 添加 0.3 M trehalose 浸泡大鼠整顆門 齒 15、30 與 60 分鐘後,在有無磁場冷凍處理下,對解凍後 活性的影響

使用海藻醣作為冷凍保護劑添加劑時,以「10% DMSO + 0.3 M 海藻醣」浸泡大鼠整顆門齒 30 與 60 分鐘後,大鼠門齒牙髓中間與 牙冠端片段,並沒有觀察到活性現象 (如圖八 (A) (B) (C))。

除了「10% DMSO + 0.3 M」海藻醣浸泡 60 分鐘組沒有顯著差異 外,使用海藻醣作為冷凍保護劑添加劑時,大鼠門齒牙根端活性以 有磁場冷凍處理優於無磁場冷凍處理 (如圖八 (A) (B) (C))。

「5% DMSO + 0.3 M」海藻醣在有磁場冷凍處理下不論浸泡時間 多長其牙根端片段活性皆顯著優於無磁場冷凍 (p<0.05) (如圖八 (A) (B) (C))。有磁場冷凍下,以「5% DMSO + 0.3 M」海藻醣浸泡 30 分 鐘會顯著優於以「10% DMSO + 0.3 M 海藻醣」浸泡 30 分鐘 (如圖 八 (B))

6.1.7 有無使用海藻醣添加劑浸泡大鼠整顆門齒,在磁性冷凍處 理下,對整顆大鼠門齒解凍後活性的影響

添加 0.3 M 海藻醣在 5%或 10% DMSO 冷凍保護劑並浸泡大鼠整 顆門齒 30 與 60 分鐘後,在有磁場冷凍處理下,大鼠牙髓中間與牙 冠端片段,並沒有觀察到活性現象 (如圖九 (B) (C))。但以沒有添加 0.3 M 海藻醣的 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 30 與 60 分鐘的情況

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下,有磁場冷凍組的牙髓中間片段會有牙髓活性現象 (如圖九(B) (C))。

整 顆 牙 齒 冷 凍 下 , 牙 根 端 片 段 以 沒 有 添 加 海 藻 醣 的 10%

DMSO,浸泡 15 與 30 分鐘的情況下皆優於有添加海藻醣的 10%

DMSO 組別 (如圖九 (A) (B))。沒有添加海藻醣的 5% DMSO 浸泡 30 與 60 分鐘的情況下優於有添加海藻醣的 5% DMSO 之解凍後大鼠 門齒牙根端活性結果 (如圖九 (B) (C))。

在浸泡 60 分鐘的組別中,使用 5% DMSO 顯著優於相同浸泡時間 下的其他冷凍保護劑組別 (p<0.05) (如圖九 (C))。

6.1.8 有無使用海藻醣添加劑,在無磁場冷凍處理下,對整顆大 鼠門齒解凍後活性的影響

無磁場冷凍下,添加 0.3 M 海藻醣在 5% 或 10% DMSO 冷凍保護 劑中並將大鼠整顆門齒浸泡 30 與 60 分鐘後,大鼠牙髓中間與牙冠 端片段,並沒有觀察到活性現象 (如圖十 (B) (C))。

整顆牙齒在無磁場冷凍下,以 10% DMSO 添加 0.3 M 海藻醣其解 凍後牙根端活性皆劣於其他冷凍保護劑組別 (如圖十 (A) (B) (C))。

而 5% DMSO 添加 0.3 M 海藻醣其解凍後牙根端活性也與 5%或 10%

DMSO 浸泡 15 與 30 分鐘的組別無顯著差異 (如圖十 (A) (B) (C))。

5% DMSO 浸泡 60 分鐘組解凍後大鼠門齒牙根端活性顯著優於相 同浸泡時間下的其他冷凍保護劑組別 (p<0.05) (如圖十 (C))。

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