圖一: 外植片體活性分析法實驗流程圖
48
Explant Viability (%)
*
* *
Coronal Middle Root
No outgrowth No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
B
Explant Viability (%)
* * *
*
*
*
Coronal Middle Root
No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
49
Explant Viability (%)
*
Coronal Middle Root
No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖二: 以 5% 或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 (A) 15 分鐘、(B)
50
15 min 30 min 60 min
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups 0
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%)
* 用達到顯著水準,再以 one-way ANOVA and Scheffe Post Hoc 檢定進 行各種條件下單純主要效果考驗,以 p<0.05 表示有顯著性差異)。(N
=3)
51
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
ExplantViability (%)
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖四: 以 5% 與 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 15、30 與 60 分鐘 後,在無磁場冷凍下對解凍後牙根端牙髓活性的影響。
無磁場冷凍下,以 5% DMSO 浸泡 15 分鐘與 10% DMSO 浸泡 60 分鐘會有牙根端牙髓組織解凍後活性降低現象。(先以 two-way ANOVA 判定時間與濃度的交互作用達到顯著水準,再以 one-way ANOVA and Scheffe Post Hoc 檢定進行各種條件下單純主要效果考 驗,以 p<0.05 表示有顯著性差異) 。(N=3)
52
Explant Viability (%)
*
Coronal Middle Root
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
B
Explant Viability (%)
* * *
* * *
* *
Coronal Middle Root
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
53
Explant Viability (%)
* * * *
Coronal Middle Root
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖五: 以 5% 或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 (A) 15 分鐘、
54
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%)
15 min 30 min 60 min
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
B
15 min 30 min 60 min
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups 0
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%)
*
55
C
15 min 30 min 60 min
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups 0
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%)
* Scheffe Post Hoc 檢定進行各種條件下單純主要效果考驗,以 p<0.05 表示有顯著性差異)。(N=3)
56
A
15 min 30 min 60 min
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups 0
20 40 60 80 100
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%)
B
0 20 40 60 80 100
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%)
15 min 30 min 60 min
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
57
5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO 5%DMSO 10%DMSO
Explant Viability (%) *
*
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖七: 以 5% 或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 15、30 與 60 Scheffe Post Hoc 檢定進行各種條件下單純主要效果考驗,以 p<0.05 表示有顯著性差異)。(N=3)
58
Explant Viability (%)
* * *
Coronal Middle Root
No outgrowth No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
B
Explant Viability (%)
* * *
*
Coronal Middle Root
No outgrowth No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
59
Explant Viability (%)
* *
Coronal Middle Root
No outgrowth No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖八:以 5% 或 10% DMSO (D) 及添加 0.3 M 海藻醣 (T) 冷凍保護 one-way ANOVA and Scheffe Post Hoc 檢定)。(N=3)
60
5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T 5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T 5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T
Explant Viability (%)
*
Coronal Middle Root
No outgrowth No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
B
5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T 5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T 5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T
Explant Viability (%)
*
Coronal Middle Root
No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
61
5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T 5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T 5%DMSO 5%D+T 10%DMSO 10%D+T
Explant Viability (%)
*
Coronal Middle Root
No outgrowth
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖九:以 5% 或 10% DMSO (D) 及有無添加 0.3 M 海藻醣 (T) 冷凍 one-way ANOVA and Scheffe Post Hoc 檢定)。(N=3)
62
5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO 5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO 5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO
Explant Viability (%)
*
Coronal Middle Root
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
B
5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO 5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO 5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO
Explant Viability (%)
* *
Coronal Middle Root
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
63
C
0 20 40 60 80 100
5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO 5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO 5%D+T 5%DMSO 10%D+T 10%DMSO
Explant Viability (%) * *
*
Coronal Middle Root
*: the note indicates statistically significant (p<0.05) among the groups
圖十:以 5% 或 10% DMSO (D) 及有無添加 0.3 M 海藻醣 (T) 冷 凍保護劑浸泡大鼠整顆門齒 (A) 15 分鐘、(B) 30 分鐘與 (C) 60 分鐘 後,在無磁場冷凍處理下對解凍後活性的影響。
整顆牙齒冷凍組在無磁場冷凍下,以「10% DMSO 添加 0.3 M 海 藻醣」其解凍後牙根端活性皆劣於其他冷凍保護劑組別。而「5%
DMSO 添加 0.3 M 海藻醣」其解凍後牙根端活性也與 5%或 10%
DMSO 浸泡 15 與 30 分鐘的組別無顯著差異(p<0.05, one-way ANOVA and Scheffe Post Hoc 檢定)。(N=3)
64
圖十一 組織切片處理方法流程圖
65
圖十二: 大鼠門齒在有磁場 (+ MF) 與無磁場 (-MF) 冷凍情況下 之組織切片圖 (H & E staining)。
箭頭標示處表示組織有裂解現象。(Bar = 100μm)
66
圖十三 大鼠門齒整顆浸泡 15 分鐘冷凍保護劑後再冷凍之切片圖 (A):以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 15 分鐘後,在有無磁場
(magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀察表 (H & E staining)。
(B):以 5%或 10% DMSO 及 0.3 M 海藻醣 (Trehalose) 冷凍保護劑浸 泡大鼠整顆門齒 15 分鐘後,在有無磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀察 表 (H & E staining)。
67
牙根端組織沒有觀察到組織裂解增加現象但牙冠端有組織裂解 增加現象。組織裂解現象以添加海藻醣和沒有磁場冷凍組可觀察到 較多裂解現象。(箭頭標示處表示組織有裂解現象) (Bar = 100μm) (N
=2)
68
圖十四 大鼠門齒整顆浸泡 30 分鐘冷凍保護劑後再冷凍之切片圖 (A):以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 30 分鐘後,在有無磁場
(magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀察表 (H & E staining)。
(B):以 5%或 10% DMSO 及 0.3 M 海藻醣 (Trehalose) 冷凍保護劑浸 泡大鼠整顆門齒 30 分鐘後,在有無磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀察 表 (H & E staining)。
69
牙根端組織沒有觀察到組織裂解增加現象但牙冠端有組織裂解 增加現象。組織裂解現象以添加海藻醣和沒有磁場冷凍組可觀察到 裂解增加現象。(箭頭標示處表示組織有裂解現象) (Bar = 100μm) (N
=2)
70
圖十五 大鼠門齒整顆浸泡 60 分鐘冷凍保護劑後再冷凍之切片圖 (A):以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠整顆門齒 60 分鐘後,在有無磁場
(magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀察表 (H & E staining)。
(B):以 5%或 10% DMSO 及 0.3 M 海藻醣 (Trehalose) 冷凍保護劑浸 泡大鼠整顆門齒 60 分鐘後,在有無磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀察 表 (H & E staining)。
71
牙根端組織沒有觀察到組織裂解增加現象但牙冠端有組織裂解 增加現象。組織裂解現象以添加海藻醣和沒有磁場冷凍組可觀察到 裂解增加現象。(箭頭標示處表示組織有裂解現象) (Bar = 100μm) (N
=2)
72
圖十六 大鼠門齒牙髓浸泡 15 分鐘冷凍保護劑後再冷凍之切片圖 (A):以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 15 分鐘後,在有無
磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙 冠端 (Coronal) 組織形態觀察表 (H & E staining)。
(B):以 5%或 10% DMSO 及 0.3 M 海藻醣 (Trehalose) 冷凍保護劑浸 泡大鼠門齒裸露牙髓 15 分鐘後,在有無磁場(magnetic freezing, MF)冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態觀 察表 (H & E staining)。
73
牙根端組織沒有觀察到明顯組織裂解增加現象,但牙冠端以添加 海藻醣且沒有磁場冷凍組可觀察到裂解增加現象。 (箭頭標示處表示 組織有裂解現象) (Bar = 100μm) (N=2)
74
圖十七 大鼠門齒牙髓浸泡 30 分鐘冷凍保護劑後再冷凍之切片圖 (A):以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 30 分鐘後,在有無
磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙 冠端 (Coronal) 組織形態觀察表 (H & E staining)。
(B):以 5%或 10% DMSO 及 0.3 M 海藻醣 (Trehalose) 冷凍保護劑浸 泡大鼠門齒裸露牙髓 30 分鐘後,在有無磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態 觀察表 (H & E staining)。
75
牙根端組織沒有觀察到明顯組織裂解增加現象,但牙冠端以添加 海藻醣且沒有磁場冷凍組可觀察到裂解增加現象。 (箭頭標示處表示 組織有裂解現象) (Bar = 100μm) (N=2)
76
圖十八 大鼠門齒牙髓浸泡 60 分鐘冷凍保護劑後再冷凍之切片圖 (A):以 5%或 10% DMSO 浸泡大鼠門齒裸露牙髓 60 分鐘後,在有無
磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙 冠端 (Coronal) 組織形態觀察表 (H & E staining)。
(B):以 5%或 10% DMSO 及 0.3 M 海藻醣 (Trehalose) 冷凍保護劑浸 泡大鼠門齒裸露牙髓 60 分鐘後,在有無磁場 (magnetic freezing, MF) 冷凍處理下,牙根端 (Root) 與牙冠端 (Coronal) 組織形態 觀察表 (H & E staining)。
77
牙根端組織沒有觀察到明顯組織裂解增加現象,但牙冠端以添加 海藻醣且沒有磁場冷凍組可觀察到裂解增加現象。 (箭頭標示處表示 組織有裂解現象) (Bar = 100μm) (N=2)
78
Coronal Middle Root Coronal Middle Root 5%
79
Coronal Middle Root Coronal Middle Root
15’ 5% DMSO 磁冷凍 一 一 + 一 一 +
80
第十一章 附錄
附錄一: 臺北醫學大學動物實驗管理小組審查同意書