3-1 實驗藥品
藥品名 廠牌
Hexadecyltrimethylammoniumbromide, CTAB Alfa Aesar Tetrachlorocuric acid, HAuCl4 ACROS Sodium borohydride, NaBH4 ACROS
Sodium oleate, NaOL TCI
Silver nitrare, AgNO3 ACROS
Hydrochloric acid, HCl MERCK
L-Ascorbic acid, AA Fisher
N,N-Dimethylformamide, DMF Fisher Sodium hydroxide, NaOH Fisher Polyvinylpyrrolidon, PVP SIGMA N,N-Dicyclohexylcarbodiimide, DCC Alfa Aesar N-Hydroxysuccinimide, NHS SIGMA N,N-Diisopropylethylamine, DIPEA Acros
Biotin SIGMA
16-Mercaptohexadecanoic acid, 16-MHA SIGMA
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11-Mercapto-1-undecanol, 11-MUD SIGMA Succinic anhydride, 99% Alfa Aesar IRDye 800CW Streptavidin LI-COR
8arm PEG Amine(tripentaerythritol), HCl Salt, MW10000 Jenkem Technology
Ethanol Fisher
Polysine slide Thermo
Phosphate buffered saline, PBS Biomate Cetyltrimethylammonium chloride, CTAC Fisher Hydroxylamine hydrochloride, H3NO·HCl Fisher
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3-2 實驗器材及儀器介紹
3-2-1 往復式振盪恆溫水槽(B601D)
提供 1.2KW 的加熱功率,溫度範圍為 RT+5°C~100°C。往復速率為 20~200rpm。
圖3-1 往復式振盪恆溫水槽
3-2-2 恆溫循環水槽(FIRSTEK B401H)
恆溫水槽結構為金屬長方形,採用冷軋鋼板精心製作外殼,不銹鋼內膽,數 顯溫控儀,電源,水泵均裝在控制盒內,恆溫槽有一個核心的部件-微機智能控制 系統,用來控制溫度的變化,最終達到一個恆溫的作用。
圖3-2 恆溫循環水槽
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3-2-3 玻片迷你微量離心機
此玻片離心機最高轉速/離心力:4800rpm/1750xg,可快速離心乾燥兩片玻 片。
圖3-3 玻片迷你微量離心機
3-2-4 24 孔盤(ProPlate® Multi-Well Chambers)
可容納玻片大小為79mm×25.4mm,每隔大小為 6.8mm x 5.4mm x 7.6mm(深
度),可容納液體體積為 250μL~300μL。因每片有 24 格,所以在相同一片條件下 可測試多種螢光染劑濃度。
圖3-4 24 孔盤
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3-2-5 迴轉式震盪器(OS-701)
此儀器轉速範圍為10-250rpm,可均勻搖晃混合溶液。
圖3-5 迴轉式震盪器
3-2-6 紫外光-可見光吸收光譜儀(UV-Visible spectrophotometer)
實驗使用之型號為Hewlett-Packard Agilent 8453 紫外光-可見光吸收光譜儀,
燈源為氘燈及汞燈,測量吸收波長範圍為 190~1100nm,用於測量金屬奈米之吸 收。
圖3-6 紫外光-可見光吸收光譜儀
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3-2-7 掃描式電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope,SEM)
實驗使用之型號為 Hitachi S4800 掃描電子顯微鏡,電子束激發原子發射的 二次電子(secondary electron),可以檢測二次電子的數量。通過掃描樣品並使用 特殊檢測器收集被發射的二次電子,創建了顯示表面的形貌的圖像。它還可能產 生樣品表面的高解析度圖像,且圖像呈三維,鑑定樣品的表面結構。
圖3-7 掃描式電子顯微鏡
3-2-8 穿透式電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)
實驗使用之型號為Hitachi H-7100 穿透式電子顯微鏡,將經加速和聚集的電 子束投射到樣品上,電子與樣品中的原子碰撞而改變方向,從而產生立體角散射。
散射角的大小與樣品的密度、厚度相關,因此可以形成明暗不同的影像,影像將 在放大、聚焦後在CCD 上顯示出來。
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圖3-8 穿透式電子顯微鏡
3-2-9 離心機(Centrifuge)
實驗使用之型號為 HERMLE Z326K
離心機
,其最高轉速為18000rpm,可 透過高速轉動,加快液體入面顆粒沉降,從而將物質分離。圖3-9 離心機
3-2-10 微陣列螢光掃描儀(Microarray Fluorescence Scanning Device)
主要掃描固態螢光物質,含有兩中不同的雷射波長,分別為647nm 及 785nm。
用於特定大小之玻片,可於玻片上點入不同濃度或不同之螢光物質,用此儀器來 測量微陣列之螢光。
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圖3-10 微陣列螢光掃描儀
3-2-11 分子膜製備機(Langmuir-Blodgett Film)
實驗所使用之型號為,LB 膜可包含一個或多個有機材料單層,通過將固體 基質浸入到液體中而從液體表面沉積到固體上。在每次浸入步驟中均勻地吸附單 層,因此可以形成具有非常精確厚度的膜。
圖3-11 分子膜製備機
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3-2-12 紫外光-可見光-近紅外光分光光譜儀(UV-vis-NIR)
此廠牌為 Aglient,型號為 Cary5000,可量測液態樣品、固態樣品(粉末、片 狀或薄膜),波長範圍為 200 - 3300 nm。可測反射及穿透光譜。
圖3-12 紫外光-可見光-近紅外光分光光譜儀
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2. Growth Solution
① 將CTAB 與 NaOL (8mM) 溶於去離子水中,並恆溫 30°C。
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33 EtOH ⁄ CHCl3 = 2.5 ⁄ 1 之混合溶液中。
2. 將樣品滴加到清潔乾淨之 Langmiur — Blodgett 槽的水面上。待溶劑揮發完 畢之後,以0.2 mm⁄min 速率壓縮,待達到所需壓力值後再以 0.2 mm⁄min 速 率拉起薄膜。
3-3-7 金屬薄膜之螢光測試
1.
將以Langmiur — Blodgett 置備好之薄膜沉積於金島狀金屬薄膜或 Succinic 玻璃片上。2.
將上述置備好之玻璃片泡16-MHA 硫醇 16 小時,轉乾收起待用。3.
將接上硫醇之玻璃片泡入含有 DCC、NHS、DMF 溶液 20 分鐘,再加入 8arm-PEG、DMF 反應 2 小時,轉乾收起待用。4.
將上述之玻璃片加入含有 DCC、NHS、DMF、Biotin 溶液反應 16 小時轉 乾收起待用。5.
將薄膜玻片泡PBS 緩衝溶液 1 小時,以去離子沖洗,轉乾。6.
點入不同濃度之Streptavidin-IR800/ Streptavidin-CY5 反應 1 小時,以 PBST 沖洗,轉乾收起待測螢光。34