在進行實驗之前，先向受詴者講解實驗目的、實驗流程、以及簽署 同意書。接著進行實驗檢測，包括身體組成、健康問卷的調查、老年人身體 活動量表及抽血。
二、 老年人身體活動量表
此量表是吳佳儀（2002）修改自 Washburn 等 (1993) 所發展之老 年人身體活動量表（PASE），根據國內老年人實際身體活動情形加以修改而 成中文版 PASE，其問卷共有 32 個項目，內容包含職能、家務與休閒活動 等。5 個項目評估休閒活動、6 個項目評估家務性及 1 個項目評估職能性，
以是與否來回答，受詴者也可以自填上自己額外從事的活動，來調查老人 過去一週身體活動情形，以推估每日身體活動量。
計分方式是以 12 項活動個別加權後再予以加總，總分介於 0 - 360 分，
分數越高代表身體活動量越大，加權指數是以身體活動主要成分因素計分
（Physical activity principal comp onent score），再對照 PASE 換算得分所得 到的，見表 3-7-2-1，量表格式內容見附錄五。
表 3-7-1 PASE 計分及加權指數對照表
三、 身體組成之測量
以手握型體脂機測量受詴者之身體組成，包括體重、基礎代謝與肌 BMI。所得數據立刻以記錄表進行記錄，以便進行身體組成之相關分 析。
四、 血液處理及分析
（一） 血液樣本的採集
由合格醫護人員採集血液樣本，採坐姿抽取橈骨靜脈血5ml。所 抽之血5ml至於含有抗凝血劑詴管（heparin）。
（二） 白血球數目分析
抗凝血劑詴管中的血液，以全自動血液分析儀（SYSMEX，
KX-21N）為分析工具，算出血液中白血球數目後，再依嗜中性球、
淋巴球和單核細胞球所佔的比例，而換算出其細胞總數（cell/ml） 。
（三） 白血球細胞表面抗原分析
１. 使用含EDTA的真空抽血管收集靜脈血，混搖均勻。
２. 預先置備1×FACS lysing（349202）溶液與PBS with 1﹪
paraformaldehtde，並取出1×FACS Lysing溶液在室溫下回溫。
３. 決定適當之詴管數目，每一全血樣品要染Leucogate、
Isotype Control各一管，加上其他所要測定項目之抗體詴劑。抗 體詴劑分別為：CD3/CD4（SIMULTEST, 340043）、CD3/CD8 （SIMULTEST,340044）、CD3/CD19（SIMULTEST, 349211）、
CD3/CD16＋56（SIMULTEST,340042）、UH CD45RA
（PHARMINGEN,555490）、UH CD45RO
（PHARMINGEN,555494）。
４. 標記並使用5ml Tube（Falcon,352052），先加入15ul Simulest單
株抗體詴劑，再加入100ul之全血，輕微地振盪混和後，置室溫 下遮光環境中作用15分鐘。
５. 15分鐘後，加入2ml 1× FACS Lysing 溶液，立即輕微地振盪混合，
並讓它們在室溫下遮光環境中作用5-10分鐘。低速離心1500rpm
（300 g）5分鐘，去除上清液。
６. 先均勻地打散細胞，再以3 ml PBS with sodium azide洗滌細胞，
輕微地振盪混合，低速離心1500 rpm（300g）5分鐘並去除上清 液。
７. 均勻地打散細胞，加入0.5 ml PBS with 1% paraformaldehyde，輕 微地振盪混合以均勻打散細胞即可上機。
（四） 流式細胞儀分析淋巴細胞及亞群
血液經紅血球溶裂處理後，所存活白血球用前方散射光（forward scatter, FSC；代表細胞大小）及側方散射光（side scatter, SSC；代表 細胞顆粒性）之雙參數散射圖譜進行血球數目之分析，散射圖譜中可 區分出三群不同的細胞群，R1分為淋巴細胞群、單核球群及顆粒球群，
其中R2為淋巴細胞群，如圖3-7-1所示。在收集血球數目時，收集10000 個細胞。以雙染分式，在血液中加入螢光染劑FITC標記CD3，PE標記 CD4、FITC標記CD3，PE標記CD8、FITC標記CD3，PE標記CD19、
FITC標記CD3，PE標記CD16＋56，收集10000個細胞。以第一和第二 螢光檢測器分別接收螢光訊號（FL1 和FL2），在四維象限圖可區分 出群CD3＋、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3－CD19＋及CD3－CD16＋CD56
＋所佔的比例，如圖3-7-2所示。
圖 3-7-1 圖 3-7-2
接著以参染的分式，在血液中加入螢光染劑FITC標記CD3，PE標 記CD4、PE標記CD45RA，FITC標記CD3，PE標記CD8、PE標記 CD45RO收集10000個細胞。以第一和第二螢光檢測器分別接收螢光訊 號（FL1 和FL2），在四維象限圖可標記CD3+CD4+或CD3+CD8+ 為R3，如圖3-7-3所示。再以第二和第三螢光檢測器分別接收螢光訊 號（FL2 和FL3），則在另一四維象限圖可區分出群CD3+CD4+CD45RA
＋、CD3+CD8+CD45RA＋、CD3+CD4+CD45RO＋及CD3+CD8+CD45RO＋ 所佔的比例，圖3-7-4所示所示。
圖 3-7-3 圖 3-7-4
100 101 102 103 104
FL1-H CD45RATEST.002