第一節 Salvianolic acid B 和 Magnolol 對血凊刺激下平滑肌細胞 DNA 合成的影響
平滑肌細胞在經過 30 小時同步化後，在 15％血清的刺激下給 予 salvianolic acid B 和 magnolol 作用 24 小時，並在收細胞前 4 小時 加入 BrdU。結果如圖 6 所示，salvianolic acid B 對 DNA 合成的抑制 沒有影響；而 0.01 mg/ml magnolol 有些許抑制作用（P<0.05），0.05 mg/ml magnolol 則是十分顯著地對平滑肌細胞 DNA 合成有抑制作用
（P<0.01）。
第二節 Salvianolic acid B 和 Magnolol 對血凊刺激下平滑肌細胞 PCNA 表達的影響
平滑肌細胞在經過 27 小時同步化後，在 15％血清的刺激下給予 salvianolic acid B 和 magnolol 作用 24 小時，從我們 western blot 的結 果看來，如圖 7 所示，只有 0.05 mg/ml magnolol （P<0.01）能抑制 PCNA 的表達，salvianolic acid B完全沒有影響，這一點和圖 6 的結 果類似。
第三節 Salvianolic acid B 和 Magnolol 對血凊刺激下平滑肌細胞 RIP 表達的影響
平滑肌細胞在經過 27 小時同步化後，在 15％血清的刺激下給予 salvianolic acid B 和 magnolol 作用 24 小時，從我們 western blot 的結 果看來，如圖 8 所示，salvianolic acid B 和 magnolol 能引起 RIP 的 表達，而且均呈劑量依附關係，不過仍以 magnolol 中 0.01 mg/ml
（P<0.05）及 0.05 mg/ml （P<0.01）這兩種劑量最明顯 。
第四節 Salvianolic acid B 和 Magnolol 對血凊刺激下平滑肌細胞 Caspase-3 表達的影響
平滑肌細胞在經過 27 小時同步化後，在 15％血清的刺激下給予 salvianolic acid B 和 magnolol 作用 24 小時，從我們 western blot 的結 果看來，如圖 9 所示，0.01mg/ml salvianolic acid B （P<0.05）和 magnolol 的三種劑量都能引起 Caspase-3 的表達，不過仍以 magnolol 中 0.01 mg/ml（P<0.05）及 0.05 mg/ml （P<0.01）這兩種劑量最明顯 。
第五節 Salvianolic acid B對轉殖至血凊刺激下平滑肌細胞的 NF-κ B promoter 的活性影響
以 liposome 的方式將 NF-κB promoter-Luciferase Construct轉殖 至平滑肌細胞中，在 15％血清的刺激下給予 salvianolic acid B 作用 24 小時後萃取蛋白質，測定 luciferase 表現量。結果如圖 10 所示，以 0.01mg/ml salvianolic acid B（P<0.01）對 NF-?B promoter 活性具明顯
的抑制作用。
第六節 Salvianolic acid B 和 Magnolol 在大鼠血清中的抗氧化能 力
在從血液中分離出的大鼠血清中加入 2mM CuSO4及 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B 或 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.05mg/ml Magnolol，作用 4 小時後再加入 TBA 和 TCA 產生 MDA。
從酵素免疫分析測讀儀測出 0.01mg/ml salvianolic acid B（P<0.01）及 0.05mg/ml magnolol（P<0.01）均能顯著的減少大鼠血清中 MDA 的產 生，而且有劑量依附關係，不過以 0.01mg/ml salvianolic acid B 效果 最好。
圖 1.
圖 2.
圖 3.
圖4. Model for mechanical stress initiated-signal transductions in VSMCs.
圖 5.
圖 6. Salvianolic acid B 和 Magnolol 對血凊引起平滑肌細胞 DNA 合 成的影響。所有平滑肌細胞都培養在含 15％血清的 DMEM 中，給藥 組 加 入 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B 及 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.05mg/ml Magnolol，藥物作用時間 30 小時。
與 15% 血清 control group 比較起來只有 0.05mg/ml Magnolol對 BrdU incorporation 有明顯的抑制作用。
＊＊ P < 0.01, ＊＊＊ P < 0.001 versus control group
Sal. B 0.001 mg/ml Sal. B 0.01 mg/ml Sal. B0.1 mg/ml
Magnolol 0.001mg/ml Magnolol 0.01mg/ml Magnolol 0.05mg/ml
＊
＊
＊
＊
＊
圖 7. Salvianolic acid B 及 Magnolol 對平滑肌細胞 PCNA 表達程度的 影響。所有平滑肌細胞都培養在含 15％血清的 DMEM 中，給藥組加 入 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B 及 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.05mg/ml Magnolol，藥物作用時間 24 小時。與 15% 血 清 control group 比較起來只有 0.05mg/ml Magnolol 有降低 PCNA 表 達的趨勢。＊＊ P < 0.01 versus control group
ß36kD
0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40
Control
Sal. B 0.001mg/ml Sal. B 0.01mg/ml Sal. B 0.1mg/ml
Magnolol 0.001mg/ml Magnolol 0.01mg/mlMagnolol 0.05mg/ml
sum of intensity
＊
＊
圖 8. Salvianolic acid B 及 Magnolol 對平滑肌細胞 RIP 表達程度的影 響。所有平滑肌細胞都培養在含 15％血清的 DMEM 中，給藥組加入 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B 及 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.05mg/ml Magnolol，藥物作用時間 24 小時。Salvianolic acid B及 Magnolol 與 15% serum control 比較起來 RIP 的表達均有增 加，不過以 0.05mg/ml Magnolol 增加最多。
＊ P < 0.05, ＊＊ P < 0.01 versus control group
0 10000 20000 30000 40000 50000 60000
Control
Sal. B 0.001mg/ml Sal. B 0.01mg/ml Sal. B 0.1mg/ml
Magnolol 0.001mg/mlMagnolol 0.01mg/mlMagnolol 0.05mg/ml
sum of intensity
ß74kD
＊
＊
＊
＊
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圖 9. Salvianolic acid B 及 Magnolol對平滑肌細胞 Caspase-3 表達程度 的影響。所有平滑肌細胞都培養在含 15％血清的 DMEM 中，給藥組 加 入 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B 及 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.05mg/ml Magnolol，藥物作用時間 24 小時。
Salvianolic acid B 及 Magnolol 與 15% serum control 比 較 起 來 Caspase-3 的表達均有增加，不過以 0.05mg/ml Magnolol 增加最多。
＊ P < 0.05, ＊＊ P < 0.01 versus control group
圖 10. Salvianolic acid B 對 NF-?B promoter 活性的影響。在平滑肌細 胞中加入 NF-?B promoter-Luciferase Construct 和 liposome 結合物作 transcient transfection 後，經培養24小時再加入 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B，藥物作用時間 24 小時後萃取蛋白質。將 30ug 蛋白質和 luciferase substrate 混合後測定 luciferase 表現量。結果 以 0.1mg/ml Salvianolic acid B 對 NF-?B promoter 活性具明顯的抑制 作用。
＊＊ P < 0.01 versus control group
0 500000 1000000 1500000 2000000 2500000 3000000
control Sal B 0.001mg/ml
Sal B 0.01mg/ml
Sal B 0.1mg/ml
Total RLU
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圖 11. Salvianolic acid B 及 Magnolol 在大鼠血清中之抗氧化能力。在 大鼠血清中加入 2mM CuSO4 及 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.1mg/ml Salvianolic acid B 或 0.001mg/ml, 0.01mg/ml, 0.05mg/ml Magnolol，作 用 4 小時後再加入 TBA 和 TCA 產生 MDA。 Salvianolic acid B 及