第三章 材料與方法
4.3 神經導管接合術實驗
4.3.2 導管降解情形與電生理檢測結果分析
坐骨神經接合術後滿八週時，將大鼠麻醉剃毛，於右下肢外側縱向 切開皮膚，並暴露出先前植入的神經導管。結果發現導管周圍均被一層 結締組織所包覆(如圖 4.8)，且所有導管結構仍相當完整，無肉眼可見的 降解現象出現。另外，由於導管並不是透明的，所以神經再生成功與否 無法由外觀上直接判定。
圖4.8 神經導管接合術後八週取出神經導管前的外觀圖
電生理檢測結果主要包含波幅(amplitude)、波期(duration)、面積(area)
表4.3 續
Control Collagen Collagen +
Bilobalide
Control Collagen Collagen + Bilobalide
Area (mVms)
Control Collagen Collagen + Bilobalide
NCV (m/s)
Control Collagen Collagen + Bilobalide
圖4.9 電生理檢測數據圖示
4.3.3 神經再生情形與術側腓腸肌萎縮程度的評估
將導管自固定液取出後，平均切為三段，取中段由兩側觀察導管中 是否被褐色且緻密的實心索狀物充滿，並以此為標準判斷神經是否再生 成功。結果發現所有導管中都出現再生的神經，各組的神經再生成功率 均達 100%。此外，組織與導管內壁有相當程度的沾黏，剝離時偶而會 有少量組織殘留於管壁上，但取下的神經標本大致上仍呈圓柱形。最 後，再進一步將取下的神經標本切片與染色，置於顯微鏡下觀察(如圖 4.10~4.12)。
圖 4.10 再生神經切片(A 組，比例尺為 0.2 mm)
圖 4.11 再生神經切片(B 組，比例尺為 0.2 mm)
圖4.12 再生神經切片(C 組，比例尺為 0.2 mm)
組織學定量分析主要包括再生神經的全部面積(total area)、單一軸突 的平均面積(mean axon area)、再生軸突的數目(axon number)、神經內膜 面積(endoneural area)、再生軸突密度(axon density)、軸突面積佔神經內 膜面積的百分比(percentage of total axon area in endoneural area)等。統計 結果發現各組間均未達顯著差異，各組的數據與結果記錄於表 4.4 與圖
Axon density (#/mm2)
Perecentage of total axon area in
endoneural Area (%)
表4.4 續
B1 0.31 5.10 2645 0.09 30947.68 15.78 B2 0.25 4.93 2308 0.05 42091.20 20.76 B3 0.25 5.26 1949 0.08 24204.31 12.73 B4 0.19 4.31 3336 0.12 27794.29 11.99 B5 0.58 5.47 3607 0.11 32803.73 17.96 B6 0.19 5.18 922 0.03 33939.35 17.59 B7 0.20 5.43 1835 0.05 33567.40 18.22 B8 0.14 4.85 1012 0.03 36982.84 17.95 B9 0.47 4.27 3528 0.11 32286.02 13.79 B10 0.23 4.04 2987 0.10 31129.31 12.58 mean 0.28 4.89 2413 0.08 32574.61 15.94
SD 0.14 0.51 980 0.03 4837.71 3.00 C1 0.49 3.35 6057 0.19 31824.22 10.66 C2 0.42 5.65 1791 0.10 18635.52 10.53 C3 0.18 5.31 920 0.03 29094.59 15.45 C4 0.31 5.43 1987 0.10 19482.77 10.58 C5 0.35 4.30 6605 0.19 35606.91 15.31 C6 0.28 5.71 2510 0.12 21332.50 12.18 C7 0.14 4.91 829 0.03 27315.38 13.42 C8 0.36 4.14 3291 0.11 30307.01 12.54 C9 0.32 4.12 2410 0.11 21500.25 8.87 C10 0.18 6.60 1587 0.04 38517.86 25.44 mean 0.30 4.95 2799 0.10 27361.70 13.50
SD 0.11 0.97 2004 0.06 6935.97 4.70
Total area (mm2)
control collagen collagen + bilobalide
control collagen collagen +
bilobalide
Axon number (#)
0
control collagen collagen +
bilobalide
Endoneural area (mm2)
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20
control collagen collagen +
bilobalide
control collagen collagen +
bilobalide
Perecentage of total axon area in endoneural Area (%)
0 5 10 15 20
control collagen collagen +
bilobalide
圖4.13 再生神經組織學定量數據圖示
腓 腸 肌 標 本 的 切 片 在 顯 微 鏡 下 可 見 到 橫 紋 肌 萎 縮 的 現 象(如圖 4.14)；且各組標本瀝乾後的重量經統計後，發現各組間均未達顯著差 異。數據與分析結果記錄於表4.5 與圖 4.15。
圖4.14 大鼠術側的腓腸肌標本(比例尺為 0.1 mm)
表4.5 腓腸肌標本重量數據分析
Control 腓腸肌重量
(g) Collagen 腓腸肌重量
(g) Collagen + Bilobalide
腓腸肌重量 (g) A1 0.537 B1 0.774 C1 0.517 A2 0.671 B2 0.645 C2 0.508 A3 0.541 B3 0.621 C3 0.778 A4 0.436 B4 0.512 C4 0.614 A5 0.626 B5 0.675 C5 0.866 A6 0.669 B6 0.600 C6 0.551 A7 0.584 B7 0.703 C7 0.667 A8 0.602 B8 0.532 C8 0.595 A9 0.669 B9 0.776 C9 0.645
A10 0.626 B10 0.668 C10 0.505 mean 0.596 mean 0.650 mean 0.625
SD 0.075 SD 0.089 SD 0.120
腓腸肌重量 (g)
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8
control collagen collagen + bilobalide
圖4.15 腓腸肌標本重量數據圖示
第五章討論
神經導管接合術是將遭截斷的神經兩端，分別固定於一管狀構造的 兩側，藉以支持並促進周圍神經的再生。大鼠是相關文獻的實驗設計中 常被選用的動物模型，不同實驗中所設計的神經缺損間隙亦不相同。根 據Lundborg 等 [130] 在 1982 年所發表的文章指出，隨著大鼠的神經缺損 間隙增加，神經再生成功的比率隨之遞減，但降低的程度並不是與間隙 長度成正比。若以間隙長度為橫軸，再生成功率為縱軸，可以畫出一個 反S 形的曲線。在斜率的絕對值最大的地方，再生成功率的降低最為顯 著，該處相對應的神經間隙長度稱為臨界神經間隙長度(critical gap length)。大鼠與小鼠的臨界神經間隙長度分別約為 10 mm 與 5 mm，這 個看法也由Yannas 等 [131] 在 2005 年再度證實。根據所繪出的圖形，在 9.7±1.8 mm 左右，神經再生成功率恰好為 50%。本實驗所設定的大鼠坐 骨神經間隙為10 mm，神經再生成功率卻達到 100%，顯示出 PLA 製成 的神經導管配合因編織法而產生的孔洞結構，對神經再生的成功率有相 當的幫助。然而，為什麼在各組間無法看到顯著的差異呢？