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巴細胞的毒性研究

摘要

第一章緒論 (Introduction )

電且峙,恥ζJ「。一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一

第二章材特與方法( Material and Methods )一一翩翩一一一一一一一一一切 2- 1.試驗材料

2- 1.1.試藥 2岫 1.2. )包製方法

2-1.3. Medium

一翩翩一一一一一一一一一-55

一一呵呵巴巴巴一-一呵呵一一一55

一一一一一一一--55

一一呵呵呵且一一呵呵呵一一 56

2-1.4. MMA (methyl methacrylic acid) 也呵呵呵自由呵呵呵呵一一--56

2-1.5. Hoechst 33258 一---一--56

2儡 1.6. Fixation solution 呵呵呻-且也自呵呵呵扭扭曲目 57

3-2. 血清有無對加藥後染色體異常之試驗 (chromosomal

aberration test with or without serum ) 目申咱一一---冒個喃喃扭扭62

3-3.姊妹染色分體交換試驗( Sister chromatid exchange test )---62

第四章結果

4帽1.染色體結構異常試驗( Chroomosoome aberration test )一--65 4-2. 血清有無對加藥後染色體異常之試驗 (chromosomal

aberration test with or without serum ) 扭曲間喃喃間65

4岫3. 姊妹染色分體交換試驗( Sister chromatid exchange test )…的 第五章 討論 一一一呵呵呵呵一一一 ---66

第六章 屬表 呵呵呵一--呵呵呵一一呵呵呵--自呵呵呵 --71

表一淋巴細胞在不同濃度品位做作用後染色禮兵會之數目 -71

表二淋巴細胞在合與不含血清和不同濃度孔位也A作用後,染

色體異常之數目 一一自由呵呵呵間由自由呵呵-一一呵呵呵一一 72

表三淋巴細胞在不同濃度~位作為後姊妹染色分體交換

之數目 ……一一一一扭扭扭曲喃喃闖一一個扭曲……73

圈一淋巴細胞染色體其常一由自由呵呵呵呵呵一血呵呵呵呵呵且也呵呵呵-且 74

圈二淋巴細胞姊妹染色分體交換一……一一圓圓圓圓圓曲"四"一個一75

第七章 參考文獻 一一呵呵呵呵呵呵呵呵呵一一一一呵呵呵呵由自由自由 77

搞要

由第一部份的試驗得知 Methyl methacrylic acid (MMA)

對 V79 細胞具有拘傳毒性.目比在體外(扭 vitro ),我們利用人類

淋巴細胞為材科會直接和其位置A 接觸作用.觀察其細脆的染色體

變化.結果得封當的濃度大於 0.932 mM 時會染色體悶隙 9 染色

分體斷裂和姊妹染色分體交換的數詩都呈明顯增加 (p<o.o的﹒我

們推論 MMA 對於人類的淋巴細胞可能具有致突變性

(mutagenicity).

第一章緒論

整形外科手術所使用的生物相容性材科壓克力樹脂 9 其主

要的成份為 Polymethyl methacrylic( 簡稱 PMMA~ CAS NO.9011-4咱 7),這種材料使用於整形外科手術 p 至今已有 30年以上 (1) 在牙科義當

床製造和樹脂填補材料中,亦有使用封這種單體 (monomer) ,其成份

為 methyl methacrylic acid 簡稱 MMA. 在眼科治療中 9 軟形鏡片

(soft in甘aocular lenses) 的成份也是屬於這種單體 (2) 單體的成份,除 醫療方面的使用外 9 於自常生活中使用的食物包裝材料費建築用的油

漆等費也都含有 MMA 的成份 (3) ﹒

早期在牙科使用義齒沫的材質屬於自動聚合的材料費它與光聚

合的材科比較會發現在聚合後,自動聚合的材質會有少許的單體殘存

的.有更多的報告指出,單體會使牙科技工和牙醫師產生過敏性反應.

Stevenson(5) 和 Moody(6) 提出單體會造成牙醫師的手過敏會濕疹和接

觸性皮膚炎. Stoy (7) 的報告別指出牙科技工接觸到草種後會會產生局

部的皮膚炎. Hollander 和 Kenedy研究牙醫師手部的皮膚,以 Patch

test檢測手部殘存的自動聚合樹脂,發現,有強烈的陽性反應 (8). Pegum

和 Medhurt指出會整形外科醫師的乎有皮膚炎,乃是由於單體會穿通

所戴之手套之故,他將之稱為 "rubber-glove四dermatitis,,(9)

在體外細胞的試驗發現會 h且在A 會造成中國倉鼠卵巢細胞

(Chinese hamster ovary cell 簡稱CHO)<lO)與中國倉鼠肺臟纖維母細胞

( Chinese lung fibroblasr cell 簡稱 V79 )<11) 的染色體異常和姊妹染 色分體交換的頻率增加. Morre 等研究L5 178Y老鼠(mice) 的淋巴瘤細

胞與 Acrylic, methyl acrylate, e由yl acrylate, methyl methacrylate

和 ethyl methylacrylate 的基自毒性會發現細胞的突變率會隨濃度的

增加而增加 (doserelated)(12). Do甘e 等的研究中會發現 MMA會造成

L5 178Y細胞株產生小核 (microneuclear)和染色體異常( 1 3 )試管培養 細胞株和 MMA 作用,在含或是不含 S9(rat的肝代謝梅)的培養下會發

現染色體異常和姊妹染色分體交換的頻率都主明顯的增加 (3)﹒

只於呼吸系統上皮發現封發炎,退化和增生的現象 (14) Tensy 等研究

發現實在 116 ppm (47560pg/ml) 的蒸氣會每自?小時,每過 5 日 9 連 續 6個月讓雄性大鼠 (rat)吸入,結果發現氣管上皮的纖毛發生制落實 上皮微絨毛數目減少(1 5) 而 Merez 等發現展克力工廠工作 p 接觸

h您在A 的 L 人,其染色分鐘互換的頻率有明顯的增加 (3)

水中加入弘俱佳A給予老鼠 (mice)飲用的研究會 Borelleca 等指出 9

2000ppmMMA 濃度給老鼠飲用 2年, 結果並沒有發現由引起的器官

組織傷害出現 (16) 在皮膚塗抹試驗中會 Oppenheimer 等指出在老鼠

的皮膚每過 3 日會連續個 4 月塗抹b部位會結果發現在塗抹區並沒有局

部腫瘤的出現(1 7) 經過聚合的樹脂,經皮下植入後,發現在老鼠命的

和 mice)植入監部位有局部的纖維瘤出現。 8 , 19)

本篇的研究動機乃基於會牙醫師與技工在工作上會甚至病人會

常會接觸到 MMA 材料,為過去的研究報告對於 MMA 和正常人類

淋巴細胞的直接作用結果則很少.國此想了解 b岱且與正常的人類淋

巴細胞作用後,細胞的染色體異常情形 以了解 MMA對於人類的淋巴

細胞是否為一致突變對 (mutagen).

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