5. 討論
5.9. 形態學評估
為在此實驗前三日需對大鼠禁食,為了增加大鼠行走的動機,但在經 過飢餓三日後,大鼠的體力皆相對的變差,是否如此而影響了大鼠的 步態。7. 其他研究者進行此項實驗是採用禁水 2 日的方式,但在預 實驗的過程中發現大鼠自殘率偏高,因而改採用禁食,可能也會影響 步態的形態。
5.9.2. 大鼠足印(footprint)分析
最先由De Medinaceli 所提出[32],並且經由其他研究者採用[33], 此實驗用來評估大鼠的運動神經恢復程度,測量左右兩腳的間距與角 度,在本實驗中,大鼠的左腳本為健側,在實驗的結果中,左腳間距 相差不大,右腳為神經截斷側,在統計上也沒有明顯的差異,而在角 度與間距的評估中,差異性也不大,但以數據上看來,雖然皆沒有達 到統計上的差異,不代表此項實驗方式無效,我們討論其中可能原因 為:1. 實驗的個體數太少,每隻大鼠我們只取三步來進行測量,差 異性大,因而導致標準差較大。2. 大鼠個別差異太大,影響形態學 的表現,未能觀察出明顯的差異性存在。3. 發現有些大鼠在行走上 使用皺縮的足趾與足跟在站立,因此在標準差上會有些偏高[35]。4. 在 本實驗中,每組只有一隻大鼠自殘,導致右足嚴重缺損,而其大鼠的 右足攣縮與關節僵硬,是否也影響著足印的分析。
5. 在實驗過程中,不同的動機所影響的步態亦不一樣,我們發 現受到驚嚇時的步伐與一般步態的步伐上有所不同,因此是否在進行 此項實驗時,對於大鼠的刺激,驅使大鼠行走的動機也是一種干擾因 子。
5.9.3. 感覺神經實驗
感覺神經傳導的測試,本實驗採用Withdraw reflex,最早是由 De Koning et al.於 1986 年提出,這是一種可重複性,非侵入性的測 試,而且對於大鼠沒有禁忌[78]。以及不會損害大鼠在神經受損後的神 經再生[79],而 Jeroen et al.[59]認為利用微小電流刺激足掌以產生 withdrawal reflex來評估感覺神經恢復的功能是一個不錯並且可以重 複的實驗。因此我們用此種方式來測試感覺神經的恢復情況,通常在 結合與平均後發現,在一小時組左右兩腳感覺測試(withdraw reflex)
中,右腳所需的電流比左腳所需的電流量大,兩腳平均電流差相差最
利用攝影錄製過程後,再以Power direct2.5 觀看過程,並以一個個畫 面的分析來記錄所需時間。在數據上,發現一小時組的攀爬時間最
短,而三小時組的攀爬所需時間最長,在統計上,發現一小時與四十
5.9.5. 坐骨神經功能指數(Sciatic function index)
(SFI)
本實驗採用SFI ,最早是由De Medinaceli et al.於 1982 年提出
[32],經由其他人的發展與修飾[33, 81, 82],SFI不只代表神經纖維中的軸 突密度與神經生長狀況有關,並直接與神經再生的形態學有相當程度 的關係[83],並且經由其他學者證實為一種非直接性的量測大鼠的運動 功能,也可測量全面性的坐骨神經功能[35]。
本實驗的結果發現,一小時組與四十八小時組有顯著的差異,
而SFI的功能定義見前述 2.5 與 3.11,由此可知,一小時組的神經功能 恢復情況較三小時組與四十八小時組差,而三小時組與四十八小時組 兩者相差不多,而以四十八小時的SFI指數大,但整體來說,SFI值還 是偏小,對於離完全功能恢復還有一大節,我們討論結果可能為:1.
由於我們所採用的是神經截斷傷與其他研究者所使用的壓砸傷不 同,因此在8 週的恢復期內,無法有大幅度的進步[35]。2. 實驗的時 間太短,無法使神經再生完全,使其支配下肢肌肉,因而影響步態,
在其他研究者認為大鼠的足掌內側肌肉在21 週時尚未完全受到神經 支配[84],可能因為如此使得SFI偏小。3. 因為SFI的測量與足掌的重 心點有關,與足掌與地面接觸的面積相關,Dellon et al發現大鼠在受 傷後的腿部會形成一種代償性的步伐[84],而我們發現有些大鼠在行走 上使用皺縮的足趾與足跟在站立,在測量上產生了些許困難,因此在 標準差上會有些偏高[35]。在本實驗中,每組各有一隻大鼠自殘,導致 右足的殘缺,因而無法測量SFI值,每組的樣本數降為九隻。
6. 結論
本研究以明膠為基材、綠梔子素為交聯劑製造出長度15 mm、
重量0.05+10%、內徑 1.96 mm、固定指數分別為 23±7%、36±2%、
51±7%之降解性神經導管。SD大鼠皮下包埋一週、四週、八週之生 物相容性評估顯示八週時有第二次之異物發炎反應發生;三組的材料 降解度則未達顯著差異。神經導管接合術適用性評估顯示36±2%的 神經導管在SD大鼠體內,神經再生情形優於其他兩組,引導 10 mm 間距的神經再生成功率達100%,而固定指數 23±7%組的神經導管產 生旺盛血管新生作用;三組在神經再生生長遲滯及再生神經成熟度偏 低的現象,在運動評估方面,與綠梔子交聯三小時的神經導管(36±
2%)雖然與交聯四十八小時的神經導管(51±2%)相似,而在交聯 四十八小時的神經導管之標準差較大,反觀組織學上之發展,交聯三 小時的神經導管(36±2%)的神經內膜面積較為一致,而交聯四十八 小時的神經導管(51±2%)仍有三隻大鼠無法量測,但在坐骨功能指 數(SFI)、感覺功能評估上發展皆比交聯一小時之綠梔子素明膠管 好,而在攀爬的實驗中發現。36±2 %組與 48±7 %組的大鼠比 23±7
%組的大鼠需花較多的時間。因此我們認為36±2 %的神經導管在生 醫材料上的應用比固定指數為23±7%與 51±7%的神經導管較為合 適。
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