3.1 研究對象
本研究的對象是年齡介於20歲至40歲之健康男性或女性。受試者經 詳細說明研究目的和整個試驗過程後同意接受試驗，並簽署同意書。他 們都經由病史、理學檢查沒有顯示手背及前臂部位有皮膚疾患如接觸性 皮膚炎、糜爛、潰瘍、細菌感染或瘢痕等，亦無罹患糖尿病、高血壓、
肝硬化、自體免疫疾病、週邊血管疾病等重大內科疾病。同時研究對象 亦排除懷孕或哺乳中婦女。試驗前至少24小時不可喝茶、咖啡、或含有 咖啡因或酒精性的飲料或食品。
3.2 皮膚血流之測量
皮膚血流是以Laser Doppler flowmetry（Moor instruments limited DRT4 blood flow monitor）搭配直角皮膚探頭（DP1T-V2，直徑3 mm，
深度1 mm）測量（圖3.1），可以得到即時性的laser Doppler flux signal，
並將所得資料存入個人電腦分析。
測量時受試者採放鬆姿勢坐在椅子上，將左手和右手放置於桌面高 度與心臟平行，為方便偵測及獲取穩定的皮膚血流，同時確定該測量處 與外關穴同屬於手少陽三焦經皮部和橈骨神經及第七頸神經根的支配 區，我們將Laser Doppler flowmetry的探頭放置於左手外關穴與中指連線 手背的中央部位做為本研究皮膚血流之測量點。
圖3.1 本研究所使用的 Laser Doppler flowmetry（Moor instruments limited DRT4 blood flow monitor）。
3.3 降鈣素基因相關胜肽（CGRP）的測量
用CGRP EIA kit（SpiBio, France）放入不同濃度的CGRP作為標準 品 （standard），之後用colorimetric method（optical density），以 Spectrophotometer plate reader ( 414 nm filter)判讀（呈黃色)來決定CGRP 的濃度。
3.4 針刺穴位及劑量
本研究的穴位和定位方法如下：
外關（SJ5）：在前臂背側，當陽池與肘尖的連線上，腕背橫紋上2 寸，尺骨與橈骨之間。
施行針刺時，施針者將不銹鋼的針（長度7.5 cm，30 gauge，宇光）
插入外關穴，用手捻針得氣（受試者有酸或麻或重或脹等的感覺，或施 針者有如魚在鉤的感覺）後繼續用大拇指和食指前後捻針10次，並留針 20分鐘。
本研究所謂的假針刺，即用不銹鋼的針（長度7.5 cm，30 gauge，宇 坐10分鐘，之後將laser Doppler flowmetry血流測定儀之探頭放置於左手 外關穴與中指連線手背的中央部位，連續紀錄皮膚血流20分鐘。後續經
紀錄完畢後立即從右手肘部靜脈抽血5 ㏄，血液經離心後取上清液貯存 於-70 ℃冰箱中以備CGRP濃度之測量。之後休息10分鐘。
（二）針刺期：將不銹鋼的針（長度7.5 cm，30 gauge，宇光）從左手 外關穴刺入並捻針得氣（受試者有酸或麻或重或脹等的感覺，或施針者 有如魚在鉤的感覺）後再前後捻針10次，如同上述紀錄皮膚血流20分鐘
，後續經擷取得氣5分鐘後之紀錄分析（即後15分鐘，以防止針刺之干 擾所造成artifact）可得血球平均速率，即為針刺期皮膚血流。紀錄完成 後立即將不銹鋼針取出，並如同上述從右手肘部靜脈抽血5 ㏄，血液經 離心後取上清液貯存於-70 ℃冰箱中以備測量CGRP濃度。
（三）針刺後期：取針後10分鐘如同上述記錄皮膚血流20分鐘，後續 經擷取拔針5分鐘後之紀錄分析（即後15分鐘，以防止拔針之干擾所造 成artifact）可得血球平均速率，即為針刺後期皮膚血流。
3.5.2 針刺右外關穴：右外關組
（一）針刺前期：受試者先於室溫24±1 ℃和溼度45-60 ％之房間下靜 坐10分鐘，之後將laser Doppler flowmetry血流測定儀之探頭放置於左手 外關穴與中指連線手背的中央部位，連續紀錄皮膚血流20分鐘，後續經 擷取此20分鐘之紀錄分析可得血球平均速率，即為針刺前期皮膚血流。
之後休息10分鐘。
（二）針刺期：將不銹鋼的針（長度7.5 cm，30 gauge，宇光）從右手 外關穴刺入並捻針得氣（受試者有酸或麻或重或脹等的感覺，或施針者 有如魚在鉤的感覺）後再前後捻針10次，如同上述紀錄皮膚血流20分鐘
，紀錄完成後立即將不銹鋼針取出，後續經擷取得氣5分鐘後（即後15 分鐘）之紀錄分析可得血球平均速率，即為針刺期皮膚血流。
（三）針刺後期：取針後10分鐘如同上述記錄皮膚血流20分鐘，後續 經擷取拔針5分鐘後（即後15分鐘）之紀錄分析可得血球平均速率，即 為針刺後期皮膚血流。
3.5.3 假針刺：假針刺組
（一）針刺前期：受試者先於室溫24±1 ℃和溼度45-60 ％之房間下靜 坐10分鐘，之後將laser Doppler flowmetry血流測定儀之探頭放置於左手 外關穴與中指連線手背的中央部位，連續紀錄皮膚血流20分鐘，後續經 擷取此20分鐘之紀錄分析可得血球平均速率，即為針刺前期皮膚血流。
之後休息10分鐘。
（二）針刺期：將不銹鋼的針（長度7.5 cm，30 gauge，宇光）從左手 外關穴皮下刺入不捻針不得氣，如同上述紀錄皮膚血流20分鐘，紀錄完 間各期之差異使用重複測量變異數分析（repeated measures ANOVA），
以檢定各組間各期的皮膚血流是否有顯著的差異，並評估組內不同時段 的變化是否達到統計之顯著水準，並用scheffe`s 檢定作為事後檢定的方 法。針刺左外關穴前後降鈣素基因相關胜肽濃度之差異使用paired-t 檢 定。本研究認為p < 0.05為有意義差。