真菌對藥用石斛培育的影響

自然界中幾乎所有的蘭科植物均與真菌共生，真菌能侵入根的表 皮或皮層細胞內形成菌絲結(peloton)，它們可以被蘭根細胞消化、分 解後提供營養給寄主植物。

石斛種子和其他蘭科種子一樣，種皮由單層細胞組成，胚位 於種皮內中間部位，種子成熟時為原胚階段，不具萌 發所需營養儲存組織，從種子萌發到抽出綠葉所需營 養全部由菌根真菌提供。

1990年，郭順星等⁽¹²⁵⁾自野生蘭科藥用植物細葉石斛 D. hancockii ROLFE及見血清 Liparis nervosa(T^HUNB.)LINDLEY種子萌發的原球莖中 分離出7種真菌，其中2種菌株(G3、G4)對石斛屬的3種石斛(細葉石斛

D. hancockii R

OLFE，羅河石斛 D. lohohense T^ANG et WANG，鐵皮石斛

D. candidum W

ALLICH ex LINDLEY)種子萌發有顯著促進作用。同時測定 了這幾種真菌的最適生長溫度(G3：25℃、G4：25∼28℃)。經鑑定 G3 菌 株 為 微 囊 菌 屬 (Microascus ZUKAL) ， G4 菌 株 為 毛 殼 菌 屬 (Chaetomium KUNZE et SCHMIDT)。

1990年，郭順星等⁽¹²⁶⁾從蘭科植物原球莖中的幾種真菌，對細葉 石斛 D. hancockii ROLFE種子萌發有顯著促進作用，種子拌菌播種發 芽率達20﹪以上，而無菌播種無一粒種子萌發；這些真菌培養物的 醇、水提取液培養種子，發芽率達40∼70﹪(提取液播種發芽率高於 菌絲伴播種)，但不利原球莖的繼續發育，反而是菌絲伴播種子方法 有利原球莖的繼續發育。

1990年，郭順星等⁽¹²⁷⁾利用超薄切片技術和電子顯微鏡，對細葉 石斛 D. hancockii R^OLFE種子萌發過程中細胞超微結構變化過程中進 行了研究。真菌(G3)自胚柄處侵入種胚細胞，在胚細胞中稀疏分布，

受真菌侵入的刺激胚細胞質膜內陷、產生許多囊狀體包圍消化入侵的 菌絲，這是細葉石斛種子同化真菌獲得營養的主要方式。為染菌前，

胚細胞具正常內含物，真菌入侵後，胚細胞質及細胞器有消失現象。

1990年，郭順星等⁽¹²⁸⁾採用種子拌菌(G3、G4、Mycena osmundicola) 播種方法，羅河石斛 D. lohohense T^ANG et W^ANG種子發芽率達20﹪，

鐵皮石斛 D. candidum W^ALLICH ex L^INDLEY種子發芽率達64﹪，而無菌 播種無一粒種子萌發。對 鐵皮石斛種子接菌萌發中細胞超微結構變化

進行觀察，菌絲自胚柄處侵入種胚，染菌的胚細胞器消失，菌絲被胚 細胞質包圍並加厚，菌絲逐漸被分解作為胚萌發的營養物質，鄰近染 菌細胞的未染菌胚細胞代謝功能旺盛。

1996年 ，郭順星等⁽¹²⁹⁾以原球莖為材料，建立了鐵皮石斛 D.

candidum W

ALLICH ex LINDLEY人工種子的初步製作流程。以改良1 2MS 培養基各種成分附加蔗糖為人工胚乳的人工種子存活率、發芽 率、成苗最好，其發芽率可達80％以上。

2000年，陳曉梅等⁽¹³⁰⁾用甲醇提取、分離石斛小菇 Mycena

dendrobii F

^AN et G^UO的化學成分，從石斛小菇菌絲體的甲醇提取物中 分離得到了2種固醇類化合物，鑑定 ergosterol oxide 類化合物，為6 ,9 -epoxy ergosta–7 ,22–dien-3-ol 及 ß- sitosterol。

(石斛小菇 Mycena dendrobii 是從野生鐵皮石斛中分離得到的菌根真 菌)

2000年，郭順星等⁽¹³¹⁾又從石斛小菇 Mycena dendrobii F^AN et G^UO 中分離出7個化合物：D-mannitol(Ⅰ)，uracil(Ⅱ)，xanthine(Ⅲ)，

5-hydroxymethyl furfuraldehyde (Ⅳ)，2-furancarboxaldehyde，

5 ,5’-[ oxybis (methylene) ] bis-(Ⅴ)，hentriacontane (Ⅵ)及urea (Ⅶ)。

2000年，郭順星等⁽¹³²⁾對雲南、四川等地採集的野生鐵皮石斛 D.

candidum W

^ALLICH ex L^INDLEY和金釵石斛 D. nobile L^INDLEY根中的 內生真菌進行分離(平板分離法)並測定其生物活性。結果：分離獲得 內生真菌25種,主要屬於擔子菌 Basidiomycotina 和半知菌

Deuteromy-cotina；生物活性測定結果表明：其中5種真菌可促進鐵皮石斛種子萌

發；7種真菌可與鐵皮石斛和金釵石斛幼苗形成共生關系，但僅有3 種真菌對幼菌有促生作用。作者結論為分離和篩選促進石斛生長發育 的適宜菌根真菌，是菌根技術應用於石斛生產的關鍵。

2000年，宋經元等⁽¹³³⁾研究離體培養時瘤菌根菌屬(Epulorhizasp.) 真菌 AR-18對鐵皮石斛 D. candidum W^ALLICH ex L^INDLEY和金釵石斛

D. nobile L

^INDLEY生長的影響。

2000年，高微微等⁽¹³⁴⁾研究開唇蘭小菇 Mycena anoectochila、石斛 小菇 M. dendrobii 和蘭小菇 M. orchidicola 3種小菇屬內生真菌菌絲體 及代謝物對蘭科藥用植物鐵皮石斛 D. candidum W^ALLICH ex LINDLEY

及生長的促進作用。方法：在植物試管苗培養基中分別加入20%(V/V) 真菌菌絲及10mg/L 發酵液的乙酸乙酯提取物，觀察對細胞增殖及苗

生長的影響。結果3種菌的菌絲體及蘭小菇的乙酸乙酯提取物均能顯 著提高鐵皮石斛原球莖的增殖率。作者結論為3種內生真菌對鐵皮石 斛的促生長作用與菌絲內及分泌到菌絲外的代謝產物有關。

2002年，高微微等⁽¹³⁵⁾研究開唇蘭小菇 Mycena anoectochila、石斛 小菇 M. dendrobii 和蘭小菇 M. orchidicola 3種小菇屬內生真菌菌絲體 及代謝物對蘭科藥用植物鐵皮石斛 D. candidum W^ALLICH ex LINDLEY

及生長的促進作用。方法：採用植物無菌原球莖及試管苗與真菌進行 雙重培養，觀測原球莖增殖及苗的生長情況。結果：接種3種內生真 菌後，鐵皮石斛苗的生長量高於對照 3∼5倍，石斛小菇、蘭小菇對 鐵皮石斛原球莖增殖也有明顯促進作用 (P<0 .0 5 )。作者結論為3種 小菇屬內生真菌能夠促進鐵皮石斛幼苗生長，對鐵皮石斛的成功栽培 具有實際應用價值。

小結

分離和篩選促進石斛生長發育的適宜菌根真菌，是生產石斛的關 鍵之一，以鐵皮石斛 D. candidum W^ALLICH ex LINDLEY為例，開唇蘭小 菇 Mycena anoectochila 、 石 斛 小 菇 M. dendrobii 和 蘭 小 菇 M.

orchidicola 3種小菇對其生長有促進作用。

在文檔中 三星石斛之化學成分研究; Studies on the Chemical Constituents of Dendrobium sanseiense HAYATA (頁 30-33)