第一章 緒論
第五節 石斛之多醣考察
石斛類藥材富含的多醣類是具有免疫增強作用和抗腫瘤作用的 活性成分。傳統上評斷品質優劣標準是以“ 質重，嚼之黏牙，口甜，
無渣者為優 ”。
1990年 ，李滿飛等(106)以比色法測定了25種石斛 36個樣品的含 量，結果表明，傳統認為質重、嚼之黏牙、味甘、無渣者為優的樣品 其多醣含量亦高。處理方法：樣品加石油醚脫脂，接著用乙醇提取除 去單醣、低聚醣等干擾性成分，再用水提取多醣類。多醣類採用苯酚 -硫酸比色法定量，使其在硫酸作用下先水解成單醣分子，並迅速脫 水成醣醛衍生物與苯酚縮合成有色化合物，以比色法測定其含量。
1994年，黃民權等(107)從鐵皮石斛D. candidum WALLICH ex LINDLEY
中提取製備一種水溶性多醣物質，具有顯著增強免疫功能的效應。其 單醣組分為D－木糖(15.9﹪)、L－阿拉伯糖(19.4﹪)和D－葡萄糖(64.7
﹪)，多醣含量達22.7﹪。同時測定其他2種石斛屬植物的水溶性多醣 含量分別為：美花石斛D. loddigesii ROLFE 12.9﹪，兜唇石斛D.
aphyllum (R
OXB.) C. E. C. F
ISHER 19.2﹪。提取製備方法更精進，又加 上以Sevay法脫蛋白，濾液用CTAB絡合精製。1994年，王世林等(108)從鐵皮石斛(黑節草) D. candidum WALLICH
ex LINDLEY
中得到3種多醣確定它們為 O-乙醯葡萄甘露聚糖，分子量
分? 是1,000,000、500,000、120,000。由幾個 ß-(1→3) -甘露型? 喃糖 基和一個 ß- (1→4) –D-? 喃糖基重複構成主鏈。
1994年，趙永靈等(108)從兜唇石斛 D. aphyllumD. aphyllum (ROXB
.)
C. E. C. FISHER 的莖中分離得到3種多醣，它們的分子量分? 為 86,300、61,500、43,100。它們是以 ß-(1→4)連接，含 O-乙醯基的?喃型的直鏈 D-葡萄甘露聚糖。
1996年，陳穎等(109)通過對不同提取時間石斛多醣提取率的測定 來探討工藝的最佳提取時間。發現迴流時間越長多醣的提取率越高。
1996年，黃民權等(110)由小鼠實驗證實，鐵皮石斛 D. candidum
WALLICH ex LINDLEY多醣能夠抵消實驗條件下免疫抑制劑的加入所引
起的外周圍白細胞數的劇烈下降，還能促進免疫系統淋巴細胞產生移 動抑制因子。
1997年，黃民權等(111)比較6種石斛屬植物水溶性多醣的單醣組 成，包括：鉤? 石斛 D. aduncum WALLICH ex LINDLEY，束花石斛 D.
chrysanthum W
ALLICH ex LINDLEY ，美花石斛 D. loddigesii ROLFE ，鐵 皮石斛 D. candidum WALLICH ex LINDLEY，紫斑金釵 D. clavatum WALLICH ex LINDLEY和流蘇石斛 D. fimbriatum HOOKER 。結果表明：它們均含有 D－木糖和 D－葡萄糖。
1997年 ， 馬雪梅 等(112)研 究雲南石仙桃 Pholidota yunnanensis ROLFE(石斛代用品)(17.65﹪)、金釵石斛(21.75﹪)、鐵皮石斛(17.90﹪) 之間多醣含量的差異。
1999年，顧慧芬等(113)對鐵皮石斛 D. candidum WALLICH ex LINDLEY 試管苗進行快速生長與栽培研究，並將鐵皮石斛試管苗(37.08﹪)與原 藥材(39.48﹪)進行多醣含量比較。
2000年，羅慧玲等(114)做石斛多醣增強臍帶血和腫瘤病人外周血 LAK 細胞体外殺傷作用的研究 ，發現石斛多醣(Dendrobium candidum polysaccharide，DCP)(200 mg/L)與 rIL-2(500 u/ml)聯合培養 96 h，顯 著增強 PB-LAK 殺傷活性，DCP 可作為生物反應調節劑用於 LAK/
rIL- 2免疫治療。
2000年，鄭紅等(115)認為現今以石斛鮮品或乾品與其它藥物入水 同煎服用，或以石斛加工品楓斗泡茶代飲的用法難以使有效成分溶 出。考證諸本草：古人或用酒浸泡後服，或以酒浸潤蒸透後服，或以 水久煎或熬膏服用。並以組織構造解釋：石斛外表被有厚的角質層，
通過酒浸? 脂處理，便於? 部有效成分的溶出，多醣一般難溶於水，
需在熱水中慢慢煎熬才能溶出，藥材研成細粉可增加與水的接觸面，
有利於多醣及其他成分的析出。
2000年，倪立堅等(116)用正交試驗L9(34)對水煎煮提取金釵石斛D.
nobile L
INDLEY中石斛多醣的方法進行比較。結果表明提取次數影響最 大，加水量和煎煮時間差異無顯著性，採用短時多次提取方法省時合 理。最佳提取條件為10倍量的水煎煮3次，每次1小時。2001年，陳雲龍等(117)分析細莖石斛D. moniliforme (LINNE) SWARTZ
的上、中、下部及根部中的多醣含量，以莖上部最高，其次是莖下段、
莖中段，根部最低。採用自然曬乾處理的細莖石斛，其多醣總量較殺 青烘乾處理的每100g約下降1.1g，且不同部位中的多醣含量呈現平均 分布趨勢。作者結論：石斛乾燥加工以高溫殺青後60℃烘乾為宜。
2001年，徐紅等(118)實驗結果表明鼓槌石斛D. chrysotoxum LINDLEY 組培苗的多醣含量(7. 254﹪) 高於原植物(2. 833﹪) 。
2001年，陳仕江等(119)用 GA3(赤霉素)、6-BA(細胞分裂素)兩種 植物生長調節劑浸根處理金釵石斛 D. nobile LINDLEY。結果表明兩種 植物生長調節劑在一定濃度下可使石斛可溶性總糖含量增加 。 2002年，陳照榮等(120)探討不同炮製方法對金釵石斛 D. nobile
LINDLEY 多醣溶出率的影響。比較石斛乾品、清炒石斛、酒炙石斛3
種炮製品的有效成分溶出率。結果：酒炙法炮製的石斛的多醣含量明 顯高於其它方法。
2002年，李亞芳等(121)對研究最多的兩個石斛品種金釵石斛 D.
nobile L
INDLEY、鐵皮石斛 D. candidum WALLICH ex LINDLEY以苯酚-硫 酸比色法測定兩者的多醣含量。2003年，陳雲龍等(122)由細莖石斛 D. moniliforme (LINNE) SWARTZ
中提取分離水溶性多醣。實驗流程上先做石斛多醣提取條件的正交試 驗 L9(34)(苯酚-硫酸比色法)，發現對提取效果的影響大小順序：溶劑 用量>提取次數>提取溫度>提取時間，進一步確定較佳提取方法：用 20倍重量的水，在 50℃水浴中加熱提取3次，每次1小時。以此條件進 行細莖石斛的多醣萃取，進一步分離出得到 DMP1a-1，DMP1a-2，
DMP2a-1， DMP3a-1， DMP4a-1， DMP5a-1， DMP6a-1和 DMP7a-1 等 8種均一多醣，其中 DMP1a-1的含量最多(佔 3/4 )，再進一步以 DMP1a-1進行單醣組成分析，得到 DMP1a-1是由葡萄糖、甘露糖1：
4 .798組成，分子量為28000，Periodate oxidation analysis 指出 DMP1a-1 其 molar ratio 為8.75：23.59：1，紅外光譜顯示該多醣為β-D-pyranyl glucomannan。
2003年，陳雲龍等(123)對細葉石斛 D. hancockii ROLFE 莖上、中、
下部和根的多醣含量進行了分析，結果發現，細葉石斛中總多醣含量 較高，與細莖石斛 D. moniliforme (LINNE) SWARTZ 及鐵皮石斛 D.
officinale K
IMURA et MIQO相比，其水溶性多醣的含量較低，而且不同 部位中的含量存在差異。2003 年，陳雲龍等(124)觀察細莖石斛 D. moniliforme (LINNE)
SWARTZ多糖對小鼠血糖水平的影響，石斛多糖能顯著降低腎上腺素、
四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠的血糖水平(p<0.01)，提高四氧嘧啶性糖 尿病小鼠的葡萄糖耐量(p<0.01)，但對正常小鼠的血糖水平無影響。
小結
1. 多醣類定量採用苯酚-硫酸比色法：
使多醣類在硫酸作用下先水解成單醣分子，並迅速脫水成醣 醛衍生物與苯酚縮合成有色化合物，以比色法測定其含量。
2. 石斛多醣目前已分析出來的為：
鐵皮石斛(黑節草) D. candidum WALLICH ex LINDLEY
中得到3
種醣 O-乙醯葡萄甘露聚糖，分子量分? 是1,000,000、 500,000、120,000，由幾個 ß-(1→3) -甘露型? 喃糖基和一個 ß- (1→4) –D-?
喃糖基重複構成主鏈。
兜唇石斛 D. aphyllumD. aphyllum (ROXB
.) C. E. C. F
ISHER的莖 中分離得到3種多醣，分子量分? 為86,300、61,500、43,100，是以 ß-(1→4)連接，含 O-乙醯基的? 喃型的直鏈 D-葡萄甘露聚糖。細莖石斛 D. moniliforme (LINNE) SWARTZ中得到以分子量28000 為主的β-D-pyranyl glucomannan，是由葡萄糖、甘露糖1：4 .798 組成。
3. 多醣類的單醣組分目前已分析出來的為：
D－木糖、D－葡萄糖、L－阿拉伯糖、甘露糖，其中 D－木 糖、D－葡萄糖普遍存在於所分析的石斛種類中。
4. 多醣類的藥理作用：
(1)抵消實驗條件下免疫抑制劑的加入所引起的外周圍白細胞 數的劇烈下降，還能促進免疫系統淋巴細胞產生移動抑制因子。
(2)增強臍帶血和腫瘤病人外周血 LAK 細胞体外殺傷作用，可 作為生物反應調節劑用於 LAK/ ?IL- 2免疫治療。
(3) 石斛多醣能顯著降低腎上腺素、四氧嘧啶引起的糖尿病小 鼠的血糖水平 (p<0.01)，提高四氧嘧啶性糖尿病小鼠的葡萄糖耐量 (p<0.01)，但對正常小鼠的血糖水平無影響。
5. 石斛炮製方法：
石斛乾燥加工以高溫殺青後60℃烘乾為宜；使用酒精為提取溶 媒提取率高於水。
提取效果的影響大小順序：溶劑用量>提取次數>提取溫度>提
取時間。
6. 石斛組培苗的多醣含量高於原植物，並發現植物生長調節劑在一 定濃度下可使石斛可溶性總糖含量增加 。