3-1 實驗儀器
3-1.1 毛細管電泳儀器
本實驗使用自組的毛細管電泳紫外光吸收儀器,如圖3-1所示,紫外光/
可見光吸收儀為Jasco 廠製的CE-971 UV,電泳時的吸收波長調整為280 nm。高壓電源供應器為Gamma 廠製的Mode RR30-2R,可依實驗需要調整電 壓,範圍為±0~30 kV。電泳時使用的毛細管為內徑50 μm的石英熔矽毛細管 柱,毛細管外壁塗有一層用來增加強度的聚醯亞胺,偵測時毛細管上要除 去一小段聚醯亞胺保護層,形成一個偵測小窗,電泳時毛細管有效長度及 全長分別為65~67 cm、78~80 cm,當毛細管內填充緩衝溶液後,將進樣端 通高壓電,偵測端接地,即開始進行電泳層析。為了考量實驗時的安全,
整個通高壓電的部份,全部都置於透明壓克力製的絕緣箱中。
樣品的進樣方式是利用虹吸注入法,將進樣端抬高,與偵測端相差40 cm,樣品注入的速度為 1.818 cm/min.。電流的測量是在偵測端串聯一個 1 MΩ 的電阻,然後並聯伏特計來測量其電壓,利用歐姆定律換算,當伏特 計量得 1 V 時,相當於串聯毛細管的電流大小為 1 μA。
圖 3-1 毛細管電泳紫外光吸收儀器
A/D converter ADC – 9724 ±10 V
PC 586 /
Advantech VisiDAQ 3.1
3-1.2 訊號放大器
為了增強譜峰的強度,並有效去除雜訊,在紫外光吸收儀器偵測 到訊號之後,將光譜訊號送入自組的運算放大器中( operational
amplifier,OPA )可以增強訊號強度,提昇實驗的偵測靈敏度。訊號放大 的倍率約為1000 倍。
當光譜訊號放大後,再通過類比數位轉換器 ( A/D )將訊號轉換後,
傳入個人電腦,並利用Advantech VisiDAQ 3.1 軟體進行實驗操作與資料 記錄。
資料處理系統 VisiDAQ 3.1 Advantech VisiDAQ 3.1
5-Methoxy-
其 它 試
Acetonitrile (ACN) CH3CN Acros
N
藥 Ethanol (99.8%) C2H5OH
Acros OH
3-2.2 分析物的性質介紹 (1)α-Methyltryptamine (AMT)
為色胺類家族的合成藥物之一,1960 年代俄國用於抗抑鬱劑藥品,
商業名稱為“Indopan",製成 5mg 及 10mg 兩種藥丸;當達一定用量以 上時,就是一種長效性的迷幻藥物,為興奮劑,但也可能造成嘔心、嘔 吐等現象,但據報導,因大量使用曾造成死亡案例。美國於2003 年 4 月 將AMT 與 5-MeO-DiPT 列為 CSA(Controlled Substances Act of 1970)的 Schedule I 中的管制藥品。
(2) N,N-Dibutyltryptamine (DBT)
為色胺類家族的合成藥物之一,屬於迷幻藥物,其有效劑量高達 100mg/kg,比較 DET 或 DMT 的有效劑量為 1mg/kg,藥性較弱,常被 以研究用化學品銷售。
(3)N,N-Diethyltryptamine (DET)
為色胺類家族的合成藥物之一,與 DMT 同樣列於我國藥品管制的第 二級毒品物質,少量劑量即可造成精神錯亂的迷幻藥物效果。
(4)N,N-Diisopropyltryptamine (DiPT)
為色胺類家族的衍生藥物之一,具迷幻藥物的效果,但是幾乎都在 聽覺扭曲方面,與其它迷幻藥物的效果幾乎都在視覺方面差異頗大,因 此被建議為研究神經病理學的藥物,對於使用者會造成長期耳鳴現象。
(5)N,N-Dimethyltryptamine (DMT)
存在天然植物中的強力迷幻藥物,人體內亦會少量存在但其作 用不明,在南美洲已使用數千年之久,1931 年首度被合成,少量劑量
(6)N,N-Dipropyltryptamine (DPT)
為色胺類家族的合成藥物之一,雖然化性類似DMT,但其作用與 DMT 卻明顯不同,其症狀為強烈音樂聲響、強烈色彩顯現、身體顫動感 覺、溫暖愉快的知覺、完全失去時空感、幻影等。
(7)5-Methoxy-α-methyltryptamine (5-MeO-AMT)
為色胺類家族的強力迷幻藥物之一,在美國CSA(Controlled
Substances Act of 1970)的 Schedule I 中的管制藥品。由於結構類似安非他 命,所以又可視為色胺類家族的安非他命,其症狀為頭痛、長時間疲勞 感、腹瀉、失眠、焦慮等。
(8)5-Methoxy-N,N-diisopropyltryptamine (5-MeO-DiPT)
為色胺類家族的合成強力迷幻藥物之一,屬於新一代的迷幻藥物,
俗稱“Foxy",無醫藥用途,使用後症狀為感覺身體嗡嗡聲、搖晃、胃 脹、聽覺扭曲、失眠、精神緊繃、性無能等;德國、希臘、丹麥、瑞典、
日本、新加坡分別於1999 年、2003 年、2004 年、2004 年、2005 年、2006 年將其列入毒品管制藥物。
(9)5-Methoxy-N,N-dimethyltryptamine (5-MeO-DMT)
為色胺類家族的合成強力迷幻藥物之一,普遍存在植物中,在南美 洲已使用數千年之久,1936 年首度被合成製造,無醫藥用途,使用後症 狀為瀕臨死亡感覺、嘔心、暈眩等。
3-3 分析物的取得與配製及緩衝溶液的配製
3-3.1 分析物的取得
色胺類物質的衍生物,往往是經過毒品製造者,在毒品化學結構上 加以改變,使成為作用與毒性更強的化合物,以達成其賺取暴利目的。
本實驗採用的研究樣品,由3-2.2 分析物的介紹,可知九種色胺類分析物 的化學結構類似,因此將彼此性質相近而不易分離的化合物,進行分離 技術的探討;更由於色胺類物質及其衍生物,因法令限制無法取得進行 分析,感謝憲兵司令部柳中校提供樣品,使本實驗得以順利進行,樣品 數量雖然有限,但以毛細管電泳方法的優勢,各樣品進樣量少、溶劑使 用量少及理論板數高等優點,且經過多年發展後,其分析的精密度及準 確度已獲得相當肯定。
3-3.2 分析物及緩衝溶液的配製
首先以甲醇將九種色胺類樣品分別配成 1000 ppm 溶液,置入冷藏庫中 保存,再以200 mMNaH2PO4(經 H3PO4調整pH 值至 2.1)稀釋成含有 50 mM NaH2PO4 的各種樣品濃度,以備進行各項條件分析。
緩衝溶液則分別以 200 mMNaH2PO4(經 H3PO4調整pH 值至 2.1) 、400 mM SDS 起始,並以 H2O:MeOH:ACN = 65:30:5 體積比稀釋成 50 mM NaH2PO4、75mM SDS(再以 H3PO4調整pH 值至 2.1)的溶液。