• 沒有找到結果。

第一節 描述性統計分析

實驗組總共收集了205 位眼翳開刀後病患的檢體,其中包含 136 位男性及 69 位女性,平均年齡 74.2 歲(年齡分布從 52 到 85 歲);對照組收集了 206 位沒 有罹患眼翳或者眼裂斑(pinguecula)患者的血液檢體當做對照組,包括 126 位男性

及80 位女性,平均年齡 62.0 歲(年齡分布從 55 到 75 歲),實驗組及對照組不論 在性別或者年齡上,都沒有統計上顯著的差異(表一)

3.1.1 CYP1A1 基因多型性表現

3.1.1.1 CYP1A1 的 PCR 產物

CYP1A1 T6235C(rs4646903)以參考文獻設計出來的專一性引子進行 PCR 放

大標的片段後,經膠體電泳分析確認有專一長度的產物片段並符合預期的340bp 長,此PCR 產物長度由 NCBI 網站上引子查詢及參考其他文獻記載得知[58, 64, 75],PCR 產物片段長為 340 bp。總共 205 個眼翳檢體及 206 個對照組血液檢體 皆可獲得專一長度的PCR 產物片段,並符合預期的 340bp 長(圖三)

3.1.1.2 CYP1A1 MspI PCR-RFLP 多型性的判讀與結果

CYP1A1基因上T6235C的多型性,使得以 MspI 限制酶處理後產生長短不同

的基因片段,MspI 限制酶辨識的序列為CCGG,遇到這樣的序列會從CC間將 DNA序列切斷,所以如果基因型為同型合子野生型T/T型,其序列為CTGG,不 會被限制酶切斷,呈現的產物是 PCR產物的原片段長即340個bp;如果基因型是 同型合子變異型C/C型,其序列為CCGG,會被限制酶切成2段,呈現的產物有兩 種片段長度,即206 bp及134 bp 2種片段長度;若為異型合子變異型T/C型,則340 bp,206bp及134 bp 3種片段長度都有(圖四)。

分析實驗組205個眼翳檢體及對照組206個周邊血液檢體,結果發現眼翳組共 有68個檢體(33.2%)是T/T型的同型合子野生型(homozygous wild type),有29個檢 體(14.1%)是C/C型的同型合子變異型(homozygous mutant type),有108個檢體 (52.7%)是T/C型的異型合子變異型(heterozygous mutant type);對照組則有89個檢 體(43.2%)是T/T型的同型合子野生型,有14個檢體(6.8%)是C/C型的同型合子變 異,有103個檢體(50.0%)是T/C型的異型合子變異型。兩組的分布有統計上顯著 的差異(p值=0.017)(表二)。

3.1.2 GST M1 的 PCR 產物及多型性表現判讀

GST Mu1 gene是一個約11kb長的 gene,所設計出來的專一性引子是用來放 大 GST M1序列內一段165 bp長的片段,所以 PCR產物有2種結果,一是檢體 DNA序列沒有缺失性變異,可以放大出標的片段165bp,此即為 present 基因型;

另一種是檢體 GST M1 DNA序缺失性變異,無引子可辨識序列,沒有 PCR產

物,此即為GST M1不表現型基因型(圖五)。

分析實驗組205 個眼翳檢體及對照組 206 個周邊血液檢體,結果發現眼翳組 共有83 個檢體(40.5%)是不表現型基因型,有 122 個檢體(59.5%)是 present genotype;對照組則有 84 個檢體(40.8%)是不表現型基因型,有 122 個檢體(59.2%) 是 present genotype。翳狀贅肉與對照組兩組的分布並沒有統計上顯著的差異(p 值=0.952)(表三)。

第二節 推論性統計分析

3.2.1 CYP1A1 MspI的基因多型性是眼翳的危險因子

知道 CYP1A1 MspI位置基因多型性的分布在眼翳組及對照組之間有顯著統

計上的意義,為了進一步確切了解是各個基因型與發生眼翳危險性的關係,使用 Chi-square test計算各 CYP1A1 MspI多型性基因型相對於 CYP1A1 MspI T/T同型 合子野生型基因型獲得眼翳的勝算比(Odds ratio),結果發現,CYP1A1 MspI T/C 異型合子基因型的 odds ratio是1.372 (95%信賴區間 confidence interval

=0.906-2.079, p=0.135);CYP1A1 MspI C/C同型合子基因型的 odds ratio是2.711 (95% confidence interval = 1.331- 5.524, p=0.005) (表四)。

3.2.2 GST M1的基因多型性不是眼翳的顯著危險因子

使用 Chi-square test計算 GST M1不表現型基因型相對於 GST M1 present type野生型基因型獲得眼翳的勝算比(Odds ratio),結果發現,GST M1不表現型基 因型的 odds ratio是1.012 (95% confidence interval =0.683 – 1.500, p = 0.950),沒有 統計上顯著的差異。

進一步利用 multiple logistic regression分析調整去除 GST M1多型性對

CYP1A1 MspI成為眼翳危險因子的影響,發現調整後變異型基因型(包括

homozygous mutant type C/C型及 heterozygous mutant type T/C型)是野生基因型 T/T型的1.533倍(95%信賴區間: 1.027-2.29, p=0.037) (表五)

相關文件