一、建立蓬萊虎灰蝶基礎生物學資料
（一）野外觀察：在研究期間，每個月到惠蓀林場觀察記錄蓬萊虎灰 蝶的生態習性，包括活動月份、棲息環境、寄主植物、雌蝶產卵、幼 蟲化蛹位置，以及與螞蟻的互動情形。
（二）生活史：由各個實驗收集數據，分別統計蓬萊虎灰蝶在不同環 境下的生活周期。
（三）喜蟻器官的形態及發育情形：飼養過程中，觀察記錄蓬萊虎灰 蝶生活史各階段的外部形態，收集卵、各齡期幼蟲，依體型大小用沸 水煮數分鐘，接著用酒精進行序列脫水，每個濃度間隔十五分鐘，再 經過臨界點乾燥（Critical point drying, CPD）與鍍金（Gold coating）
處理，利用掃描式電子顯微鏡（Scanning Electron Microscope, SEM）
（JEOL, JSM-5600）觀察並拍下卵與各齡期幼蟲的形態與喜蟻器官。
二、實驗設計
（一）雌蝶的產卵專一性
由野外採得之雌蝶，在室溫（25℃）下將單一雌蝶與羅氏鹽膚木 放入透明塑膠盒（18.6 × 10.6 × 4.7 cm3）中，以60 瓦燈泡提供全日光 照（圖版一A），隨機給予五隻勤勉舉尾蟻、建築舉尾蟻、阿美舉尾 蟻及不放螞蟻四種處理。處理持續一天後，移出雌蝶以蜜水餵食，再
移入塑膠盒24 小時即結束實驗，視 48 小時中螞蟻的有無及不同蟻種 是否會影響雌蝶的產卵意願，最後以卡方檢定（Chi-square test）分析 各處理間雌蝶產卵率之差異。
（二）不同蟻種面對幼蟲產生的行為與對其存活之影響
幼蟲孵化後單獨移入透明塑膠盒（8.0 × 5.6 × 3.2 cm3），飼養於光 週期12L：12D、溫度 25℃的梯溫培養箱中，餵以羅氏鹽膚木並隨機 分為三組，分別給予幼蟲五隻建築舉尾蟻、阿美舉尾蟻或勤勉舉尾 蟻，試驗幼蟲是否也能與虎灰蝶及三斑虎灰蝶的共生蟻共生。實驗期 間，盒內若有螞蟻死亡，便補足至五隻；此外，由於實驗初期無法採 得大量阿美舉尾蟻，數量不足時暫時用甲仙舉尾蟻取代。
實驗中觀察螞蟻的行為，用卡方分析檢測幼蟲與三種同屬蟻種共 存時的個體存活率是否有顯著差異。
（三）勤勉舉尾蟻對蓬萊虎灰蝶生長表現的影響
幼蟲孵化後單獨移入透明塑膠盒（8.0 × 5.6 × 3.2 cm3），塑膠盒身 側邊挖洞（2.6 × 1.25 cm2），用網目大小可讓螞蟻通過的網子覆蓋（圖 版一D）。實驗個體隨機分為兩組，一組塑膠盒置於不含蟻后的螞蟻 飼養盒中，讓螞蟻自由進出接觸幼蟲（圖版一B），另一組則放在環 境相同但沒有螞蟻的石膏容器內（圖版一C），實驗容器置於室外。
飼養過程中記錄幼蟲期、蛹期、蛹重與成蝶前翅長，並於幼蟲化
蛹一天後用電子天秤（信安儀器有限公司，FZ-200i）秤量蛹重，八
天後再測量一次，計算蛹重減少的比率，並計算以上數據的平均值與 標準差（mean ± SE）。接著，將前述資料作為應變數（response variables, also Y variables），螞蟻之有無與性別作為預測變數（predictor variables, also X variables），以線性迴歸（Linear regression）探討共生蟻、性別 與蓬萊虎灰蝶生長表現的關係。
（四）幼蟲的食性
此實驗的飼養容器、環境及方法與實驗（二）相同，但不給予螞
蟻處理。孵化後的一齡幼蟲隨機平均分配至羅氏鹽膚木、野桐、番石 榴、家山藥及惠蓀林場青龍谷植被豐富的朴樹科（Celtidaceae）山黃
麻（Trema orientalis）五種處理。
實驗中記錄各處理的幼蟲化蛹率，以卡方檢定分析。生長表現方 面，計算幼蟲期、蛹期、蛹重及前翅長資料（mean ± SE），由於以上
數據經角度轉換後，仍有部分資料不符合常態分布，因此以
Kruskal-Wallis H-test 進行分析，再用 Dunn（1964）提出的事後檢定 公式比較那些處理間有顯著差異，公式如下：
ni：第i 組獨立樣本之樣本數 nj：第j 組獨立樣本之樣本數 g：排序同等級之組數
ti：同等級觀測值個數
若第 i 組與第 j 組獨立樣本在全部樣本中排序的平均值差之絕對 值小於SE，表示兩組樣本之中位數經事後檢定後無顯著差異；若第 i 組與第 j 組獨立樣本在全部樣本中排序的平均值差之絕對值大於 SE，代表兩組樣本之中位數具有顯著差異。