3. 西方轉漬法檢測不同光質的設定對 COP23 含量概日韻律的影響
3.1 紅光黑暗建立 COP23 概日韻律
當聚球藻RF-1 培養在 12R/12D 的條件下,COP23 蛋白質在紅光 光照期量少,黑暗期量多,且有週期性的現象(Fig. 8),與 SDS-PAGE 的結果相符。從紅光光照期第 5 小時 COP23 蛋白質量開始減少,而 黑暗期的第5 小時 COP23 蛋白質量開始增加,韻律的週期大約是 24 小時。
若將聚球藻 RF-1 以 12R/12D 馴化三天後,改置入連續紅光
(RDRR)中,COP23 蛋白質的表現仍維持週期大約 24 小時的規律 性變化,在原設定光照期的 COP23 蛋白質量較少,大約在原設定紅 光光照期第 5 小時(即進入連續光照第 29 小時)明顯減少,而進入 原設定黑暗期第 1 小時(即進入連續光照第 37 小時)則大量增加,
維持這樣的含量到下一個原設定紅光光照期的第1 小時(即進入連續 光照第 49 小時),COP23 的蛋白質含量又開始顯著減少,這樣的週 期性變化可以維持至少 2 個循環。由西方轉漬法證明 12R/12D 的週 期可以建立 COP23 蛋白質表現的概日韻律,且在連續的紅光環境中 仍可維持數個週期。
當聚球藻RF-1 在 12R/12D 馴化過程中,在紅光光照期中的第 4、
6、8、10、12 小時加入遠紅光的處理,以打斷紅光光照期的連續性,
如此處理 3 天後,將其改置入連續紅光下(RFrDRR),COP23 蛋白 質的表現量仍然保持週期性的變化(Fig. 8),韻律的週期大約是 24 小時,大約在原設定紅光光照期第 5 小時(即進入連續光照第 29 小 時)明顯減少,而進入原設定黑暗期第 1 小時(即進入連續光照第 37 小時)則大量增加,維持這樣的含量到下一個原設定紅光光照期 的第 1 小時(即進入連續光照第 49 小時),COP23 的蛋白質含量又 開始顯著減少,這樣的週期性變化可以維持至少3 個循環。
3.2 藍光黑暗建立的 COP23 概日韻律
當聚球藻RF-1 培養在 12B/12D 的條件下,COP23 蛋白質有韻律 性的表現,週期大約是 24 小時。如同 12L/12D 的情形一樣,COP23 在藍光光照期量多,而黑暗期量少(Fig. 9)。
若將聚球藻 RF-1 以 12B/12D 馴化三天後,改置入連續藍光
(BDBB)中,COP23 蛋白質的表現量仍維持週期大約 24 小時的規 律性變化(Fig. 9),在原設定光照期 COP23 蛋白質量較少,大約在 原設定藍光光照期第5 小時(即進入連續光照第 29 小時)明顯減少,
而進入原設定黑暗期第5 小時(即進入連續光照第 41 小時)則增加,
維持這樣的含量到下一個原設定藍光光照期的第1 小時(即進入連續 光照第 49 小時),COP23 的蛋白質含量又開始顯著減少,這樣的週 期性變化可以維持至少3 個循環。
當聚球藻RF-1 在 12B/12D 的馴化過程中,在藍光光照期中的第 4、6、8、10、12 小時加入遠紅光的處理,以打斷藍光光照期的連續
性,如此處理 3 天後,將其改置入連續藍光下(BFrDBB), COP23 的表現仍然保持週期性的變化(Fig. 9),韻律的週期大約是 24 小時,
大約在原設定藍光光照期第 5 小時(即進入連續光照第 29 小時)明 顯減少,而進入原設定黑暗期第 5 小時(即進入連續光照第 41 小時)
則大量增加,維持這樣的含量到下一個原設定藍光光照期的第1 小時
(即進入連續光照第 49 小時),COP23 的蛋白質含量又開始顯著減 少,這樣的週期性變化可以維持至少3 個循環。
4.聚球藻 RF-1 之基因轉殖