著者鑑於部份化合物具有抑制血管增生之活性，因此進一步探
討化合物是否會具有抗癌的活性。將合成之化合物 6、22、N2-benzyl isomer (8、10、12、14、17、19 - 21)及 N1-benzyl isomer (7、9、11、
13、15、16、18)委託本研究所林怡倩同學測試其對白血病癌細胞 (HL-60 cells)之細胞致毒活性。結果如 Table 5、6 所示。
由 Table 5 及 Table 6 可發現 N2-benzyl isomer (8、10、12、14、
17、19，除了化合物 21)之 IC50值皆在 33-45 µM 之間。而 N1-benzyl isomer 之中，除了化合物 13 及 18 之 IC50值分別為 5 µM 及 2.1 µM 之 外，其它化合物之 IC50值皆大於 50 µM。另外，化合物 22 也顯示出 明顯的細胞致毒的活性，其 IC50值為 20.6 µM。
由 上 可 知 ， N2-benzyl isomer 之 細 胞 致 毒 活 性 比 大 部 份 的
N
1-benzyl isomer 還要強一點，這代表著 N2-benzyl isomer 比大部份的N
1-benzyl isomer 有較強的抗癌作用。而從化合物 11 氧化過程中意外 得到的化合物 22，其 IC50值也提升至 20.6 µM，表示可能在細胞致毒 活性之構效關係中，N1-acyl 之官能基扮演著微妙的角色，這點值得 提供今後 SAR 研究之參考。HL-60 cells (1×105/ml) were treated with tested sample for 24 hrs. Data was presented as mean ± SD from three separate experiments. ＊：P<0.05, ＊＊：P<0.01, ＊＊＊：P<0.001，compared with control.
Table 5. Cytotoxic effect of compounds (6、8、10、12、14、17、19 - 21).
HL-60 cells (1×105/ml) were treated with tested sample for 24 hrs. Data was presented as mean ± SD from three separate experiments. ＊：P<0.05, ＊＊：P<0.01, ＊＊＊：P<0.001，compared with control.
Table 6. Cytotoxic effect of compounds (7、9、11、13、15、16、18、
22).
第三章 結論
著者以 3-(4-methylphenyl)-1H-indazole (化合物 6)為主要中間 體，採行有別於以往合成 YD-3 之方法，從事其衍生物的合成。得 到化合物 7 - 21，經由一維圖譜及二維圖譜確認，可分為兩類，一為
N
1取代的化合物~ 1-(substituted benzyl)-3-(4-methylphenyl)-1H- indazoles (7、9、11、13、15、16、18)；另一為 N2取代的化合物~2-(substituted benzyl) -3-(4-methylphenyl)-2H-indazoles (8、10、12、
14、17、19 - 21)。並將這兩類化合物測試其抗血小板凝集活性、抑 制血管增生活性及細胞致毒活性。
在抗血小板凝集活性試驗中，兩類化合物(7 - 21)都不像 YD-3 對 thrombin 引發的血小板凝集有選擇性的抑制作用。大部份 N2取代 的化合物(8、10、12、14、17、20、21)對 AA 及 collagen 所引發的 血小板凝集之抑制活性比 N1取代的化合物(9、11、13、15、16)強。
另外，化合物 10 (IC50 = 4.61 µM)及 21 (IC50 =1.69 µM)對 AA 所引發 的血小板凝集之抑制活性相當顯著，更勝於化合物 6 (IC50 = 19.67 µM)。
在抑制血管增生活性試驗中，N2取代的化合物(8、14 及 19)抑 制效果比化合物 6 及 YD-3 還要顯著。而 N1取代的化合物之抑制血
管增生活性之試驗正在進行中。另外，在細胞致毒活性中，N2取代
的化合物(8、10、12、14、17、19、20)其活性比化合物 6 及大部分
N
1取代的化合物(7、9、11、15、16)強。因為 N2取代的化合物不像 YD-3 對 thrombin 引發的血小板凝集 有選擇性的抑制作用，也因此未深入測試對 thrombin 引發的血管增 生是否具有抑制活性(YD-3 對 thrombin 引發的新生血管具有顯著的 抑制作用)，但從其明顯的抑制血管增生活性，著者認為其作用機轉 值得再深入探討。
由抑制血管增生與細胞致毒兩者藥理活性結果比較中發現，化 合物 8、14 及 19 雖然在細胞致毒活性中 IC50值在於 36 - 43 µM 間，
但其活性比大部分 N1取代的化合物(7、9、11、15、16，IC50 > 50 µM)
強，而在抑制血管增生活性中，化合物 8、14 及 19 之抑制效果相當 顯著。這些兼具抑制血管增生及細胞致毒活性的特性，在抗血管增 生的化合物是相當罕見的。