一、白英種子播種於腐植土後 2 週可發苗，小苗於第 4 週可移栽於田間。溫室內 生長情形比田間生長快速，溫室內植株葉片較寬大，數目多於田間栽培植 株，植株生長較為健壯。溫室內栽培施肥與未施肥(台農一號有機氮肥)比 較，植株生長情形無顯著差異，移栽 3 個月後施肥植株近莖基部的葉，葉片 較容易脫落。白英種子播種後 3.5 個月後開花、5 個月後結果，達採收標準。
採收後乾燥秤重新鮮品含水量約為 77.5%，結果如圖 四。
二、田間採收之白英其組織學鑑定結果如圖 三 所示。
外 觀 性 狀 :
莖粗大者直徑約 0.5~1.2 cm 表面呈灰褐色，曲折彎曲，表皮具光澤性 之縱皺紋，偶有皮層剝落而露出木部及韌皮纖維。莖節上具瘤狀突起或莖 痕。細莖呈黃綠色與葉及葉柄均同樣密生軟毛，莖同樣不易折斷。莖破折面 呈纖維性，導管與位於中心部之髓部裂隙；莖細者斷面中空。氣香味稍苦甘。
組 織 構 造 :
莖橫切面顯微鏡下鏡檢發現，表皮密生腺毛，最外層為角質層(cu)，
下方為一層表皮細胞(ep)所構成，再下方由 3~6 層呈等徑性之橢圓~長方形 之柔細胞(p)而成，呈切線方向排列。順次移向內方為包圍其外篩部(le)之內 鞘纖維束(fb)一層，此內鞘纖維束由 1~5 列之韌皮纖維所構成。外篩部發達 而明顯，形成層(c)不明顯。木部由導管(有緣孔紋導管，螺旋紋導管，偶有 環紋導管)，假導管(孔紋)，木纖維，髓線所構成，導管圓大，其徑可達 180 µ 內外，多為有緣孔紋導管(vp)，在髓冠部出現之導管多為螺旋紋導管(vs)。
髓線(mr)乃由 1~2 列具孔斑之髓線細胞而成，並呈放射狀排列。木部內側 與髓部外側交接處有顯著而發達之內篩(le)存在，由木部延長之螺旋紋導管 (vs)於內篩部出現。內篩與髓之交接處附近有 1-3 列之纖維散在。內篩內側 即為具有孔斑之髓細胞所構成之髓部(m)，髓部的中心為廣大之空腔(cav)。
三、利用流式細胞計數儀評估不同濃度( control、50 µg/mL、100 µg/mL、200 µg/mL、300 µg/mL、400 µg/mL )之白英 50%乙醇粗抽物( SLE )對人類大腸癌 細胞株 Colo 205 處理 6 小時、12 小時、24 小時、48 小時、72 小時後觀察細 胞存活率、細胞週期及 sub-G1的變化。結果如表 二、圖 五、圖 六 顯示，
SLE 有明顯的抑制細胞增生作用且有劑量及時間依賴效應。細胞週期的變化，
結果如圖 七、圖 八 顯示，SLE 處理 12 小時、24 小時後細胞週期停止於 S-phase，處理 48 小時後停止於 G2/M phase。在 sub-G1的變化方面，結果如表 三、圖 九、圖 十、圖 十一 顯示，SLE 在濃度為 300 µg/mL、400 µg/mL 給 藥 48 小時後開始有 sub-G1 peak 出現，持續給藥 72 小時後誘導 sub-G1比率呈 現劑量依賴效應。
四、利用倒立式位像差顯微鏡下觀察不同濃度( control、100 µg/mL、200 µg/mL、
250 µg/mL、300 µg/mL、400 µg/mL )之白英 50%乙醇粗抽物( SLE )對人類大 腸癌細胞株 Colo 205 處理 6 小時、12 小時、24 小時後形態學方面的改變。結 果如圖 十二 顯示，SLE 處理 6 小時後高濃度( 300 µg/mL、400 µg/mL )時細 胞已有明顯變化，細胞膜呈現模糊不清，細胞質空泡化，部分細胞變淡死亡；
處理 24 小時後於低濃度( 200 µg/mL、250 µg/mL )細胞膜呈現模糊不清，細胞 質空泡化，部分細胞變淡死亡。
五、利用流式細胞計數儀評估不同濃度( control、50 µg/mL、100 µg/mL、200 µg/mL、300 µg/mL、400 µg/mL )之白英 50 %乙醇粗抽物( SLE )對人類大腸癌 細胞株 Colo 205 處理 6 小時、12 小時、24 小時、48 小時、72 小時後觀察存 活細胞數的變化。結果如圖 十三 顯示 100 µg/mL、200 µg/mL 的 SLE 抑制細 胞增生作用，SLE 濃度為 300 µg/mL、400 µg/mL SLE 對人類大腸癌細胞株 Colo 205 具有細胞毒殺作用。
六、利用 trypan blue 染色細胞計數器評估不同濃度( control、50 µg/mL、100 µg/mL、200 µg/mL、300 µg/mL、400 µg/mL )之白英 50%乙醇粗抽物( SLE ) 對人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 12 小時、24 小時、48 小時、72 小時、96 小時後觀察存活細胞數的變化。結果如圖 十四 顯示 100 µg/mL、200 µg/mL 的 SLE 抑制細胞增生作用，SLE 濃度為 300 µg/mL、400 µg/mL 時對人類大 腸癌細胞株 Colo 205 具有細胞毒殺作用。正對照組 100 µg/mL 的 5-FU 於 24 小時、48 小時細胞存活數介於 200-300 µg/mL SLE 之間、結果和使用流式細 胞計數儀計數存活細胞結果相符合。
七、利用流式細胞計數儀評估不同溶媒分層粗抽及總生物鹼不同酸鹼度分層粗抽 物對人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 48 小時後細胞存活率、細胞週期及 sub-G1的變化。結果如圖 十五 顯示，不同溶媒分層粗抽物及總生物鹼不同酸 鹼度粗抽物於濃度 50 µg/mL 處理 48 小時後存活率沒有明顯減少。細胞週期的 變化，結果如圖 十六 顯示，白英 n-butanol 層粗抽物及 n-hexanol 層粗抽物 給藥 48 小時後細胞週期停止於 S-phase，正對照組 300 µg/mL SLE 處理 48 小 時後停止於 G2/M phase。在 sub-G1的變化方面，結果如圖 十六、圖 十七 顯 示，n-butanol 層粗抽物在濃度為 50 µg/mL 給藥 48 小時後開始有 sub-G1 peak 出現，和正對照組 300 µg/mL SLE 誘導凋亡比率相當。
八、利用流式細胞計數儀評估不同濃度( control、20 µg/mL、40 µg/mL、60 µg/mL、
80 µg/mL、100 µg/mL )之白英 n-butanol 粗抽物及 250 µg/mL 乙醇粗抽物 ( SLE 250 )、80 µg/mL 5-FU 對人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 24 小時、48 小時、
72 小時後觀察細胞存活率的變化。結果如表 四、圖 十八 顯示，白英 n-butanol 粗抽物有明顯的抑制細胞增生作用且有劑量及時間依賴效應。細胞週期的改 變，結果如圖 十九 A 顯示，白英 n-butanol 粗抽物、SLE 250 給藥 24 小時後 對於細胞週期影響不大，但是 80 µg/mL 5-FU G1 phase 細胞增加。如圖 十九 B
顯示，48 小時後白英 n-butanol 粗抽物、250 µg/mL 乙醇粗抽物、80 µg/mL 5-FU 細胞週期均停滯於 G1 phase。 在 sub-G1 peak 方面，結果如圖 二十、圖 二十 一 顯示，高濃度時白英 n-butanol 粗抽物於 24 小時出現 sub-G1 peak，比 80 µg/mL 5-FU 更早出現，給藥 72 小時後 80 µg/mL 之白英 n-butanol 粗抽物大部 份細胞均產生凋亡，誘導凋亡的比率大於 80 µg/mL 的 5-FU。
九、利用流式細胞計數儀評估不同濃度( control、10 µg/mL、20 µg/mL、40 µg/mL、
80 µg/mL )之 5-FU 對人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 6 小時、12 小時、24 小 時、48 小時、72 小時後觀察細胞存活率、細胞週期及 sub-G1的變化，且利用 白英 300 µg/mL 乙醇粗抽物( SLE 300 )為正對照組做比較。結果如圖 二十二 A 顯示，5-FU 各濃度對 Colo 205 cell 具有抑制增殖作用，但各濃度間無明顯 差異，正對照組 SLE 300 µg/mL 抑制細胞增生作用和 80 µg/mL 的 5-FU 相當。
細胞週期的改變，結果如圖 二十三 顯示，不同濃度之 5-FU 對細胞週期影響 於給藥 12 小時後 G1 phase 上升，24 小時後 S phase 上升，72 小時後 G1 phase、
G2/M 上升、S phase 下降。SLE 300 µg/mL 於 12、48 小時細胞週期停滯於 G2/M 期。 sub-G1 peak 方面，結果如表 六、圖 二十四、圖 二十五 顯示，
高濃度 80 µg/mL 時 5-FU 於 48 小時出現 sub-G1 peak，SLE 300 µg/mL 於 48 小時出現 sub-G1 peak，給藥 72 小時 SLE 300 µg/mL 誘導凋亡的比率大於 80 µg/mL 的 5-FU。
十、利用流式細胞計數儀評估不同濃度( control、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL、5 mg/mL )之白英熱水粗抽物對人類 大腸癌細胞株 Colo 205 處理 24 小時、48 小時後觀察細胞存活率的變化。結果 如圖 二十六 顯示，白英熱水粗抽物，藥物處理 24 小時及 48 小時後，對於 Colo 205 細胞有抑制增殖作用，且有劑量依賴性。
十一、利用 DNA fragementation electrophoresis assay 評估不同濃度( control、50 µg/mL、100 µg/mL、200 µg/mL、300 µg/mL、400 µg/mL )之白英乙醇粗抽物 SLE 對人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 48 小時後觀察 DNA ladder 的變化。
結果如圖 二十七、二十八 顯示，300 µg/mL、400 µg/mL 的 SLE 處理 48 小 時後，可見到明顯的 DNA ladder partern 並且 genomic DNA 大部份被切除。
300 µg/mL SLE 處理 12 小時、24 小時後，具有明顯的 DNA ladder partern。比 較不同濃度的 300 µg/mL SLE、80 µg/mL n-butanol 粗抽物、80 µg/mL 5-FU 於 藥物處理 24 小時、48 小時後，結果如圖 二十九 顯示，300 µg/mL SLE、80 µg/mL n-butanol 粗抽物處理具有明顯的 DNA ladder partern，80 µg/mL 5-FU 處理的 DNA ladder partern 不明顯。
十二、利用 RT-PCR 方法觀察不同濃度( control、100 µg/mL、200 µg/mL、300 µg/mL、400 µg/mL )之白英 50%乙醇粗抽物( SLE )對人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 24 小時後檢測基因表現的影響。
細胞週期相關基因表現的影響，結果如圖 三十 顯示，對於基因具有上調表現 ( up-regulation )為 Cdk1、p27；對於基因具有下調表現( down-regulation )為 Chk1、Chk2、MDM2；對 Colo 205 細胞基因有表現但對藥物作用沒有影響 的基因為 P21、p53、Cdc25b、Cdc25c、Wee1、cyclinB1。
細胞凋亡相關基因表現的影響，結果如圖 三十一 顯示，對於基因具有下調表 現為 Bcl-2、Apaf-1；對 Colo 205 細胞基因有表現但對藥物作用沒有影響的 基因為 BAX、Caspase-3、Caspase-6、Caspase-8、Caspase-9、Smad 4 及 MAPK。
對 Death Recepter 相關基因表現的影響，結果如圖 三十二 顯示，基因具有下 調表現為 TRAIL-2、DcR-2，Colo205 細胞基因有表現但對藥物作用沒有影 響的基因為 TNF60、TRAIL。
對 NF-?B 相關基因表現的影響，結果如圖 三十三 顯示，白英 50%乙醇粗抽物 於低濃度時上調表現，高濃度時具有下調表現，I-?B 有表現但對藥物作用沒
有影響。
Topoisomerase 相關基因表現的影響，結果如圖 三十四 顯示，基因具有下調表 現為 topoisomerase Ⅱa，對 topoisomerase Ⅰ基因上調，基因有表現但對藥物 作用沒有影響的基因為 topoisomerase Ⅱ
β
。十三、利用 Western Blot 方法觀察濃度為 300 µg/mL 之白英乙醇粗抽物( SLE )對 人類大腸癌細胞株 Colo 205 處理 4、8、12、24 小時後檢測相關蛋白表現的影 響。結果如圖 三十五、圖 三十六、圖 三十七顯示，增加蛋白表現的為，p27、
caspase-3、casepase-9，減少蛋白表現的為 Cdk1、cyclin B1、NF-? B(p50)、
NF-? B(p65)，無影響的為 p53、cyclin E、caspase-8。