1. 從新鮮牛肝中，藉由加入介面活性劑 Triton X-100 穩定氧化鯊烯 環化酵素，再經過超高速離心、Q-Sepharose 陰離子交換樹脂、
Hydroxyapatite 及 HiTrap Heparin 管柱層析等純化流程，可以順 利得到氧化鯊烯環化酵素至均質狀態；並將純化所得的環化酵素 經SDS-PAGE 電泳分析後，以 commassie blue 染色，顯示出分 子量約為 80 kDa 的單一蛋白質帶。
2. 在合成 Ro4-NA1、Ro4-NA2、Ro4-BP3 和 Ro4-BP4 的實驗部分，
發現利用管柱層析法純化分離這些產物的時候，產物有分成兩個 相近的部分被收集的現象。經由EI-MASS、1H NMR spectrometry 和 13C NMR spectrometry(DEPT)的分析，發現這兩個被收集的部 分，為同一結構。推論可能是在三極胺與六個碳的長碳鏈的結構 部分有不同的位向所產生的結果；而在第二個部分收集到的產 物，根據光譜以及比對抑制分析實驗結果所作的推測，為三極胺 與六個碳的長碳鏈向後摺的結構，造成較大的立體空間障礙，所 以皆無抑制氧化鯊烯環化酵素的能力。
3. 經由成功合成出的螢光標定抑制物透過活性測試的實驗發現，還 是只有單純沒有修飾過的抑制劑(Ro48-8071)對於牛肝中氧化鯊 烯環化酵素具有較顯著的抑制效果，其 IC50 可達到僅為 11 nM
果推測較不影響酵素受質通道的結構，所以其在 100μM 的濃度 時也有很明顯的抑制效果；另外，Ro4-BP3 雖然 BP3 的結構也較 DPA 的小，但是其延伸的角度造成其對於酵素來說有較 Ro4-BP4 稍大的的立體空間障礙，所以造成其產生稍差的抑制效果，但一 下有明顯的紅移(red shift)現象【圖 3-10】，依此特性推論其可能 在極性較小的環境下，如氧化鯊烯環化酵素的活性區中相較於在 Asp455 的距離卻離很遠，不易產生氫鍵；而 Ro4-DPA 由於螢光
基團的立體障礙影響，其入塢作用實驗所得的結果都顯示其並不 容易與氧化鯊烯環化酵素進行作用。由此根據入塢作用的理論計 算結果推論，以Suzuki coupling 的方式將螢光探針對 Ro48-8071 進行修飾的分法，會由於所修飾的芳香環結構所造成的立體效應 影響，而使得抑制氧化鯊烯環化酵素活性的能力降低。並且由之 前氧化鯊烯環化酵素的抑制實驗結果相互驗證，合成的螢光抑制 劑的確對於氧化鯊烯環化酵素的抑制能力沒有尚未以螢光探針 修飾的 Ro48-8071 來的好。並根據入塢作用的結果推測，若將 Ro4-NA2 與 Ro4-BP3 的長碳鏈結構的碳鏈長度縮短，使其上的 氮原子與胺基酸 Asp455 的距離得以縮短，進而更易於進行氫鍵 作用，應可增加螢光抑制劑的抑制效果。
6. Akio Ojida 等人在 2005 年發表的研究成果發現，可以將水相的 Suzuki 合成法利用在蛋白質的修飾上80，所以現階段實驗的另一 個方向，是需要先取得足量的氧化鯊烯環化酵素，與抑制劑 (Ro48-8071)進行反應後，利用親和力標記(Photoaffinity labeling) 的方法而使得兩者能夠以共價鍵產生連結(Cross-link)，再利用水 相的 Suzuki 合成法，希望能夠成功的將螢光探針與 Ro48-8071 進行偶合，以改善由於立體障礙的原因而影響經由螢光探針修飾 後的Ro48-8071 與氧化鯊烯環化酵素結合的能力，再利用胰蛋白 酶(trypsin)或溴化氰(cyanogens bromide, CNBr)等方法將蛋白質切 成片段，經由HPLC 的分析，取得具有螢光的片段進行胺基酸序
望能夠利用所接上的螢光基團之特性，偵測螢光物質有無與酵素 作用其各向異性(anistropy)的改變來進一步確認是否有與酵素產 生交互作用。