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第五章 實驗結果

第六節 肺部細菌培養結果

盲腸手術後 20 小時,測量慢性糖尿病及非糖尿病老鼠之肺部細 菌菌落數量,觀察在高血糖狀況下所誘發敗血症模式,其對肺部清除 細菌功能之影響。將所誘發敗血症的老鼠於 20 小時犧牲,接著左肺 進行均質,取均質液進行十倍連續稀釋,並各取 100

µ

l 均質液塗抹 於培養基,於 20 小時後計算細菌菌量。實驗結果顯示在 sham 組 DM 老鼠的肺部細菌量為 2.12±0.85 cfu/g,而在控制組老鼠的肺部細菌 量為 2.12±0.85 cfu/g,兩者經雙尾 paired student-t test 檢定值 為 P =0.65,n=5 是無統計上差異。sepsis 組 DM 老鼠肺部細菌量為 6.08±0.41 cfu/g,而在控制組老鼠肺部細菌量為 3.81±0.67 cfu/g,

兩者經雙尾 paired student-t test 檢定值為 P =0.012,n=6 統計

上有明顯差異。將 sham 組及 sepsis 組的 DM 老鼠,其的肺部細菌量 以 Independent student-t test 檢定值為 P =0.0016,統計上有明 顯差異。將 sham 組及 sepsis 組的控制組老鼠,其肺部細菌量以 Independent student-t test 檢定值為 P =0.035,統計上有明顯差 異(圖六)。此結果表示,在未誘發 sepsis 情形下的 DM 及控制組老鼠,

其肺部細菌量是相當的,如予以誘導 sepsis 後,控制組老鼠肺部細 菌量會提升為原來的 846 倍;而 DM 老鼠誘導 sepsis 後,肺部細菌量 又來比控制組誘發 sepsis 來得高約 91 倍。這結果顯示,在高血糖狀 況下予以一個導致 sepsis 的因子,對於肺部清除細菌的功能是降低 的,且其肺部受損是提高的。

0

20 25 30 35

6wk 10wk 14wk 18wk 22wk 26wk 30wk

Body weight (g)

control DM

圖二、老鼠予以 STZ 誘發成慢性糖尿病鼠,週齡 6 到 30 週每月體重 之紀錄。以配對方式做比較,結果顯示糖尿病鼠及非糖尿病鼠在其週 齡 10 週時,兩組體重就有明顯差異,且 P =0.0399。*P < 0.05 , DM vs. control。

*

* *

*

* *

0 試比較(sepsis n=8; sham n=4),結果顯示無統計上之差異;將 sepsis 與 sham 組兩者的糖尿病鼠的肺泡巨噬細胞數目,及非糖尿病鼠的肺 泡巨噬細胞數目,以非配對測試比較,結果也顯示無統計上之差異 (P=NS),其結果以 Mean ± SEM 表示。

0 5 10 15 20 25 30

sham sepsis

AM apoptosis (gate %) )

control DM

*#

圖四、敗血症模式術後 20 小時,使用流式細胞儀(FACScan)測量慢性 糖尿病及非糖尿病老鼠之肺泡巨噬細胞的凋亡情形。32 週齡 sepsis 組,糖尿病與控制組老鼠肺泡巨噬細胞的凋亡,以配對測試比較,

n=8;而 sham 組之糖尿病與控制組老鼠肺泡巨噬細胞的凋亡,以配對 測試比較,n=4;sepsis 與 sham 組之糖尿病鼠及非糖尿病鼠肺泡巨 噬細胞的凋亡則以非配對測試比較,結果以 Mean ± SEM 表示。*P < 0.05 vs. respective control, #P < 0.05 ,sepsis vs. sham。

0 1 2 3 4 5 6 7

sham sepsis

AM apoptosis (%) )

control DM

#

圖五、敗血症模式術後 20 小時,使用 DAPI 染色於顯微鏡下測量慢性 糖尿病及非糖尿病老鼠之肺泡巨噬細胞的凋亡情形。32 週齡 sepsis 組,糖尿病與控制組老鼠肺泡巨噬細胞的凋亡,以配對測試比較,

n=8;而 sham 組之糖尿病與控制組老鼠肺泡巨噬細胞的凋亡,以配對 測試比較,n=4;sepsis 與 sham 組之糖尿病鼠及非糖尿病鼠肺泡巨 噬細胞的凋亡則以非配對測試比較,結果以 Mean ± SEM 表示。#P <

0.05,sepsis vs. sham。

0

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