敗血症是有明確的感染來源且合併全身系統性發炎反應症候群 (Systemic inflammatory response syndrome；SIRS)，其造成的全 身性器官衰竭以呼吸系統衰竭最為普遍(Akihiro et al.，2000)，而 肺泡巨噬細胞是肺部防禦機制一個很重要免疫細胞，所以肺泡巨噬細 胞的凋亡與損傷是肺部受損一個重要的指標。許多研究皆指出糖尿病 病患比一般健康的人容易遭受到細菌的入侵，並且可能引發敗血症 (Donder，2002)，但 Moss 等學者於 2000 年研究臨床敗血症的病人，
發現糖尿病病人比非糖尿病病人不容易進入嚴重病程如呼吸窘迫 症。所以為了了解敗血症對於糖尿病患者所造成的肺部傷害，本篇實 驗使用 STZ 誘導 BALB/c 糖尿病老鼠，並將其血糖值定義 = 250 mg/dl 才視為有意義的糖尿病誘發成功，Vsevolody 等人於 2001 使用 STZ 誘發 C57BL/6J 老鼠，其將血糖值定義須大於 200 mg/dl 才為糖尿病 鼠，所以本篇實驗對血糖值定義是合理的。實驗結果顯示於 8 週齡 時，糖尿病老鼠平均血糖值為 287.5 ± 13.4 mg/dl，將老鼠持續飼 養至 30 週齡，使之成為慢性糖尿病老鼠，其平均血糖值為 430.3 ± 18 mg/dl，此現象表示老鼠是持續處於高血糖狀態，且血糖值因週數的 增加有持續上升情形；有報告指出相同的結果，發現在予以 STZ 誘發 BALB/c 老鼠後，其血糖值在 8 週齡時為 250 mg/dl，持續飼養到 25
週齡時，其血糖值則攀升至 360 mg/dl (Vidya et al.，1996)；所 以本實驗老鼠於 30 週齡時，其平均血糖值為 430.3 ± 18 mg/dl 是合 理的。本篇實驗中所飼養的糖尿病老鼠體重變化，在誘發後一個月，
其體重明顯比控制組小鼠來得輕，且有統計上差；相同的結果顯示於 Yoko 等人於 1999 年所發表的報告中，其在 HuBTg 老鼠 8 週時使用 STZ 誘導糖尿病，結果發現 HuBTg 公鼠於 14 週，也就是誘發糖尿病後一 個月，其體重明顯低於非糖尿病鼠，且 P < 0.05。由以上結果可了 解本實驗成功誘導出慢性糖尿病老鼠。
接著本研究將 32 週齡大的糖尿病老鼠與控制組老鼠，以配對方 式分成敗血症及非敗血症組兩組進行實驗，敗血症的模式主要是使用 盲腸結紮穿刺術，主要是模擬臨床所發生的敗血症病程，接著使用 FACScan 及 DAPI，來檢測敗血症對於糖尿病老鼠及控制組老鼠之肺泡 巨噬細胞凋亡的影響。結果發現在控制組老鼠予以一個感染因素 (CLP)，並引發敗血症後 20 小時，其不論於 FACScan 及 DAPI 所檢測 出的肺泡巨噬細胞之凋亡，是高於未感染之控制組老鼠，且進一步測 量老鼠之肺部細菌菌落數量，觀察其對肺部清除細菌功能之影響，發 現 CLP 所誘發的敗血症會提升老鼠肺部的細菌量約原來的 846 倍，也 就是說敗血症確實會導致嚴重的肺部損傷；相同的實驗結果在本實驗 室使用 Sprague Dawley 老鼠，觀察其早期(9 小時)及晚期(20 小時)
敗血症，發現在早期敗血症，其肺泡巨噬細胞凋亡為健康老鼠的 2.5 倍，而晚期敗血症則為 3.2 倍，且肺泡巨噬細胞吞噬功能明顯比健康 老鼠來得低(LU et al.，2002)。然而在 2001 年 Liacos 等學者，收 集臨床 20 位敗血症病患之肺泡巨噬細胞進行細胞凋亡分析，發現肺 泡巨噬細胞凋亡情形，是比非敗血症病人來得少，且同年也有學者使 用 CD-1 老鼠，將其利用 CLP 方式誘發敗血症，發現在敗血症老鼠及 健康老鼠，其肺泡巨噬細胞的凋亡是無差異性，但分別在 CLP 後 6 小 時、24 小時和 72 小時，利用支氣管灌流取得肺泡巨噬細胞，予以螢 光小球進行肺泡巨噬細胞吞噬功能測試，發現敗血症時間越長，其吞 噬功能越低(Raju et al.，2001)。
糖尿病鼠研究方面，實驗發現在未感染情形下，糖尿病鼠肺泡巨 噬細胞凋亡比例與正常老鼠相當，且測量其肺部細菌菌落數量，也與 正常老鼠肺部細菌菌落數量無差異性；但一旦糖尿病鼠感染(CLP)進 而引發敗血症，此時糖尿病老鼠肺泡巨噬細胞凋亡比例以 FACScan 檢 測結果顯示，其肺泡巨噬細胞凋亡之比例約為控制組老鼠誘發敗血症 導致肺泡巨噬細胞凋亡比例的 1.5 倍，而在 DAPI 染色檢測結果則是 一般糖尿病老鼠肺泡巨噬細胞凋亡比例的 3 倍。觀察其對肺部清除細 菌功能之影響，在糖尿病老鼠誘導敗血症後，其肺部細菌量來得比控 制組老鼠誘發敗血症高約 91 倍。此結果顯示，糖尿病老鼠在未感染
產生敗血症時，其肺部損傷並無因糖尿病疾病而提高其肺部受損程 度；但一旦因感染而產生敗血症，其肺部損害就會大幅提升，且比控 制組老鼠產生敗血症時的肺部損傷更加嚴重。
推測可能原因為，有學者提出糖尿病的 PMNLs 之附著、趨化、吞 噬、氧化及細胞毒殺能力均呈現抑制狀態，進一步觀察其炎症反應發 現，來自單核球和 PMNLs 所產生的細胞激素，如 TNF-α、IL-6 及 IL-8 的釋放是增加的(Delamaire et al.，1997； Gallacher et al.，
1995)，然而這些細胞激素大量產生所導致的過度炎症反應，是造成 身體多重器官衰竭一個重要因素。Eliashiv 等學者於 1978 年，比較 各 10 位糖尿病病人及非糖尿病人身體免疫系統之差別，發現糖尿病 病人細胞免疫反應功能是降低的，主要是淋巴細胞活化及成熟度皆減 少，所以相對細菌感染的頻率在糖尿病病人身上是增加的；而 Sima 等學者於 1988 年，觀察糖尿病大鼠其肺泡巨噬細胞，發現感染金黃 色葡萄球菌(Staphylococcus aureus bacteria)後之吞噬及毒殺細菌 能力，皆比一般正常大鼠來得差。所以在本研究結果發現糖尿病鼠予 以誘發敗血症後 20 小時，其肺泡巨噬細胞之凋亡和肺部細菌菌落數 量，是高於敗血症之非糖尿病老鼠，此結果是可想而知的。但目前對 於敗血症如何導致肺部損傷，其機制尚未清楚，多數學者推測可能與 過高的細胞激素產生有關，所以想更了解敗血症所造成糖尿病鼠肺部
傷害之機制，是有待我們繼續探討。近年許多研究發現在老鼠及天竺 鼠上，雌性素可刺激巨噬細胞的吞噬能力，且提升巨噬細胞的清除能 力(Schreiber et al.，1988；Friedman，1985)，在臨床上觀察敗血 症在女性的生存率比男性高(Asai et al.，2001)，且女性體內含較 多的 IL-10，而在男性卻以 TNF-α 較多(Schroder et al.，2000)，
這可能是影響生存率一個重要因素。所以利用基因轉植雌性素接受器 α 於巨噬細胞(Raw264.7 細胞株)，觀察予以雌性素接受器 α 基因 轉植後的巨噬細胞在敗血症環境下，是否能提升其吞噬能力及細胞生 存率，進而降低敗血症所造成的肺部傷害，也是我們所要進一步觀察 之重點。