先前研究中,Carter 等人利用 cDNA 微陣列分析偵測 1B4 LCL、柏金氏淋巴 瘤細胞株 BL41 及潛伏期第三期的 BL41 細胞株,以 RT-PCR 分析發現能夠被 EB 病毒所誘導的基因為 IL-32 (Carter et al., 2002),此研究數據支持本實驗室 cDNA 微陣列初步分析的結果。本研究進一步證實 IL-32mRNA 以及蛋白質的表現量在 reticulum, ER)上(Hasegawa et al., 2011),但這方面的研究仍為不足。
4.2 EB 病毒調控 IL-32 的機制
化 NFκB 的訊息傳遞路徑,再活化轉錄因子 p65 進而促進 IL-32 的表現,研究中 力(Ragoczy and Miller, 2001; Zalani et al., 1992),另外也可以與 CBP (CRE-binding protein)結合作用(Swenson et al., 2001),在本研究中也發現 CRE 及 Sp1/Sp3 結合 位對 Rta 活化 IL-32 的表現是重要的,但有趣的是,CRE 及 Sp1/Sp3 結合位必須
力,進而抑制 EB 病毒顆粒產生。
另外本實驗室過去研究已知 TSA,其為一組蛋白脫乙醯酶(histone deacetylase, HDAC)的抑制劑,具有活化 Zp 的能力,機制為 TSA 能使結合在 Zp 的 ZID 區域
後,抑制 PKCδ的活性及溶裂期基因啟動子的活性,最後使 EB 病毒能夠維持在 潛伏期。過去研究已知疱疹病毒具有抑制宿主細胞 MHC 的表現以及抑制細胞凋 亡的能力(Carpenter et al., 2007; Divito et al., 2006),進而使病毒能夠躲藏在宿主細 胞內,進入潛伏期而不被免疫系統發現,EB 病毒也和多數的疱疹病毒一樣,感 染宿主細胞後主要處於潛伏期的狀態,躲藏在宿主體內,IL-32 則具有抑制 EB 病毒溶裂期基因表現的能力,所以對 EB 病毒來說,具有幫助其維持潛伏期並躲 避免疫系統的能力。
IL-32 在血管內皮細胞株或 PBMC 中具有活化 TNFα、IL-1β、IL-6、IL-8 及 IL-10 的能力(Hong et al., 2010; Nold-Petry et al., 2009),且在 THP-1 單核球細胞株 中 IL-32 能被 TNFα及 IL-1β活化 (Heinhuis et al., 2011; Kobayashi et al., 2010),顯 示 IL-32 具有活化其他細胞激素的能力,也能夠被其它細胞激素所活化,推測此
LMP1 活化許多細胞激素,所以 IL-32 在本實驗研究的模式中所佔的影響較小,
1. RMND1 : Required for Meiotic Nuclear Division 1 homolog (yeast) 2. PAICS : Phosphoribosylaminoimidazole Carboxylase,
Phosphoribosylaminoimidazole Succinocarboxamide Synthetase 3. NCL : nucleolin
4. LBR : lamin B receptor
5. TIMM44 : translocase of inner mitochondrial membrane 44 homolog (yeast) 其中 RMND1、PAICS 及 TIMM44 位在細胞質中,RMND1 及 TIMM44 過去則更 細部的被認為在細胞質中的粒腺體,NCL 位在細胞核中,LBR 位在細胞核膜上,
本研究先前已知 IL-32 主要位在細胞質中,所以推測 RMND1、PAICS 及 TIMM44 較可能與 IL-32 有交互作用。目前對 RMND1 的研究尚不明確,只知道和粒線體 的穩定以及生成有關,PAICS 主要的功能為合成嘌呤核酸 (purine),對於生長速 度快的細胞,如癌細胞是重要的,TIMM44 主要是幫助粒線體和細胞質之間物質 的交換,已有研究指出抑制 TIMM44 會造成人類胸線瘤的產生 (Bonora et al., 2006; Garcia-Diaz et al., 2012; Zalkin and Dixon, 1992)。所以 IL-32 可能透過結合 PAICS,達到抑制合成嘌呤核酸的現象,由於 LCL 等生長速度快的細胞需要更 多的核甘酸才能進行染色體複製及細胞分裂,推測宿主細胞藉由 IL-32 結合 PAICS 來抵抗 EB 病毒的侵蝕,另外 RMND1 及 TIMM44 和粒線體的穩定及維持
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其正常功能扮演重要角色,而過去已知粒線體可能對癌細胞的生長是重要的 (Wallace, 2012),推測 LCL 可能活化 IL-32 並結合 RMND1,以達到穩定粒線體 的功能。
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