序列 (附錄 3)。而以蛋白質預測建模網站 SCRATCH 與 Pymol 軟體進行 WSSV108 pIB-GFP-wssv108-V5/His 轉染至 Sf9 昆蟲細胞中，並偵測細胞中蛋白質的分布狀 態 (圖 3)，結果發現，GFP-WSSV108 融合蛋白質會分布在細胞核當中，且在細 胞質中也有少量的存在，與 GFP 在細胞中的分布相同，因此推測 WSSV108 蛋白 質存在於細胞核中，但是否具有特別的進核序列影響其在細胞內的分布尚未證 實。前人報導指出，60 kDa 以下的蛋白質可以利用擴散的方式進核 (Wang et al., 2007)，推測 WSSV108 可能是利用擴散的方式進核，但無法排除 WSSV108 利用 進核序列進核的可能性，詳細的進核機制仍需要更進一步的探討，同時，WSSV108 在細胞質中是否具有其他功能也需要更多的研究。
WSSV108 被前人報導具有轉錄活性 (Li et al., 2009)，為了驗證 WSSV108 在
Sf21 昆蟲細胞中是否能成功調控基因轉錄活性，將報導載體 G5p35
BAS-Luc 與表現 載體 GAL4-DBD、GAL4-IE1 及 GAL4-WSSV108 分別共轉染至昆蟲細胞 Sf21 中，結果發現，GAL4-IE1 能活化報導載體達 1.76 倍 (圖 4)，而 GAL4-WSSV108 則會 抑 制 報 導 載 體 至 原 本 的 0.38 倍 ( 圖 4) ， 與 控 制 組 相 比 ， GAL4-IE1 及 GAL4-WSSV108 皆具有顯著差異 (p value<0.05)，WSSV108 在 Sf21 昆蟲細胞中 明顯抑制下游基因轉錄活性，顯示 WSSV108 具有影響下游基因轉錄活性的能力。
由上述結果推測 WSSV108 具有影響其他的病毒基因轉錄活化的能力，將表 現載體 pIB-V5/His、pIB-5’UTR-wssv108-V5/His 與含有白點症病毒基因啟動子的 報導質體或是負控制組 pGL3-basic 共轉染到 Sf21 細胞中做冷光報導分析的初步測 試，能發現 WSSV108 蛋白質對於部分極早期與早期基因的啟動子都能發現具有
轉錄活化的現象，顯示 WSSV108 會調控部分病毒極早期基因的轉錄活性。原先 性分析，發現 WSSV108 會活化 pGL3-wssv304-(-93~+82) 達 5.90 倍，而對於 pGL3-wssv304-(-36~+82) 的活化倍率只有 1.43 倍 (圖 6)，將極早期基因 wssv304 可能的調控區域縮小至 -93 nt 至 -36 nt 之間。除此之外，WSSV108 對於 pGL3-wssv304-(-54~+82) 的活化倍率能達到 2.41 倍，但經過 Student's t-test 統計 分析之後，pGL3-wssv304-(-54~+82) 的活化倍率分別與 pGL3-wssv304-(-93~+82) 及負控制組 pGL3-basic 相比皆具有顯著差異，因此推論 WSSV108 的調控可能位 於 wssv304 啟動子的 -54 nt 周遭區域。
定探針，並同時設計多點核酸突變的競爭者序列，分別製備三條六點核酸突變之 性的 STAT bindung site 和 AP1 site 仍然無法有效競爭。由上述結果推測，WSSV108 會結合於 wssv304 啟動子的 -65 nt 至 -46 nt 區域，並且在此片段上可能有數個結 行實驗，不論 GST-WSSV108 或 His-WSSV108 皆無法看到蛋白質-DNA 複合體，
因此無法確認 WSSV108 是否直接結合 DNA，未來可能需要更多實驗證明
便其中之一的突變株進行冷光活性分析，驗證 WSSSV108 是否藉由兩個相似的序 列活化 wssv304 啟動子，同時，兩者是否都能發揮讓 WSSV108 結合與調節轉錄 地能力需要更進一步的實驗證明。
二聚體為兩個蛋白質以非共價鍵 (non-covalently bound) 鍵結形成。一些轉錄 因子會藉由二聚體形式結合在特定的 DNA 序列上，像是會受到細菌和病毒感染 WSSV108 蛋白質是否具有同樣形成同源二聚體的能力，利用 GST pull-down assay 分析，實驗結果發現，GST-WSSV108 能與 His-WSSV108 結合 (圖 10, lane 7)， 用 GST pull-down assay 分析，發現 WSSSV108 能與 LvYY1 直接結合，目前已發 現 LvYY1 於白點症病毒的極早期扮演重要角色，實驗室先前的研究也證實 LvYY1
能活化極早期基因 ie1 與 wssv108 啟動子的轉錄活性 (黃庭儀, 2014; 蔡沛賜, 2015)，WSSV108 極早期蛋白質是否能與 LvYY1 進行協同作用或是相互抑制來使 病毒極早期的調控變得更加彈性，WSSV108 的多聚體特性與 LvYY1 結合的關聯 性，WSSV108 是否會在同源、異源多聚體之間切換，都是未來值得進一步探討 的地方。
由以上結果可以總結出，WSSV108 是白點症病毒當中第一個發現具有序列 專一性的轉錄因子，在極早期基因當中可能扮演著非常重要的角色，甚至有可能 是白點症病毒進入溶裂循環的關鍵調控因子，同時，與 LvYY1 的相互作用使 WSSV108 在極早期的調控方面具有更多的探討空間，如 WSSV108 是否透過利用 宿主體內的轉錄因子 LvYY1 促使白點症病毒進入溶裂循環，揭露出病毒體內的 轉錄因子 WSSV108 與病毒基因與宿主體內轉錄因子具有彈性且多元化的調控機 制，但目前仍需要再做更多次的表現觀察與實驗才能得知，因此整體而言，在未 來對於極早期基因 wssv108 的研究是非常值得探討與發展的。