第一節 豬苓多糖之輻射防護作用
一 、 WR-2721 之 應 用
於癌症病人以輻射或化療藥物治療中，加用防護劑來輔助，不只可以增進 治療的成效，也可以降低輻射及化療所引起的副作用如突變和二次致癌的危 險性，WR-2721 是大家熟悉的輻射防護劑，於第二次世界大戰時由美國陸軍 研發出來為了保護戰場上的士兵，根據研究指出 WR-2721 可以保護正常組織 免於輻射或化療藥物所導致的細胞毒害，但 WR-2721 有低血壓( 57% )、面潮 紅( 39% )、打噴嚏( 29% )、噁心( 11% )和惡寒( 4% )的副作用；WR-2721 的 給藥方式一般在輻射或化療投予前 30 分鐘以輸注的方式在 15 分鐘內完成，
由此可知其藥效短暫，使用上也不方便( Hospers,1999 ),所以在臨床使用有一 定 的 限 制 ； 目 前 已 找 出 一 些 毒 性 較 小 的 輻 射 防 護 劑 Ocimum sanctum
（Ganasoundari et al.,1998）， ß-carotene（El-Habit et al.,2000）， Geniposide ( Hsu et al.,1997 )， flavonoids（Shimoi et al.,1994） 和 polysaccharides
（Patchen et al.,1992） 等來輔助或替代 WR-2721 以減低病人的不適感，而 豬苓多糖的著力點也在此。
WR-2721 在鹼性磷酸酵素( alkaline phosphatase ) 存在下產生去磷酸化作 用而成游離硫羥基（thiol-）的活性成分 WR-1065，其防護作用機制如 捕捉自由基 、以氫離子的轉移來修補 DNA 上之 free radical、WR-2721 本身 去磷酸產生 WR-1065，再經氧化作用形成雙硫化合物( disulfide )（附圖 4），
同時消耗掉氧( Trestses et al.,1991 )，而且雙硫化合物和 DNA 結合後可穩定 DNA 和抑制 DNA 的複製，藉此來延長 DNA 的修復時間( Geraldine et al.,1988 )，而豬苓多糖的作用機轉是否如此，則有待進一步的探討。
以 35S radiolabeled 之 WR-2721 來研究，知其在正常細胞中含量較高，
由於(1)正常組織細胞膜表面有較多的的鹼性磷酸酵素(較癌細胞高 275 倍)；
(2)正常組織周圍的中性 pH 值有利於鹼性磷酸酵素發揮作用(腫瘤組織的 pH 值偏酸性)；(3) WR-1065 能通過主動運輸進入正常細胞，故知 WR-2721 可保 護非腫瘤組織免於放療或化療的毒性作用，由以上原因得知 WR-2721 不會影 響治療的效果，同時臨床試驗顯示類似的結果。(Washburn ,1974; Utley et al.,1976；Geraldine et al.,1988）由 Kemp (1996)、Liu (1992) 之臨床實驗知 WR-2721 對腫瘤細胞雖沒有保護作用，但可保護正常細胞減少輻射或化療產 effect )；而以 WR-2721 和 Prostaglandin E2（PGE-2）併用或 WR-2721 和 5-hydroxytryptamin (5-HT)併用的效果最佳，具有協同作用（Synergistic effect）
（Maisin,1993）。目前的研究多從老鼠的腸粘膜（Hanson, 1987）、頭髮損傷
（Malkinson et al.,1993）、皮膚方面（He and Lim,1991）之防護著手。本實驗 是採用 WR-2721 常用的劑量和豬苓多糖單獨使用最有效的劑量合併使用，雖 然實驗結果如體外體內微核試驗與氧化傷害試驗數值均有意義的降低，但是 並不如預期有相加或更好的效果，似乎應再探討不同劑量組合和併用時間點 等的各種條件，以找出理想的配對組合。
二 、 豬 苓 多 糖 之 應
目前具抗輻射作用的中草藥如人參(panax ginseng)（Kim et al., 2001），聖 羅勒(Ocimum sanctum)（Uma Devi, 2001），靈芝(Ganoderma lucidum)（Kim, 1999），雲芝(Coriolus versicolor)（Lin et al.,1996），枸杞(Lycium chinense)（Hsu et al.,1999），桃仁(prunus persica)（Kim et al.,2000）等雖見報導，但多從存
活率著手，本實驗試著豬苓多糖單獨或併用 WR-2721 由染色體損傷微核生成 率之降低、tk 基因突變率之降低，氧化 DNA 傷害所產生之 8-OHdG、LPO 之降低，來看豬苓對細胞的保護程度而推知其對輻射及化療之防護成效良好。
關於臨床應用方面，豬苓多糖併用輻射治療肺癌等章榮烈教授的報告，均 未為正式發表，報告指出其能使體重增加，血紅素維持正常，病人不致因放 療後呈現白血球及血小板下降而中斷治療；也見豬苓多糖併用 CP 治療肺癌 的病例，可使病人精神體力明顯好轉，食量增加，肺癌症狀如胸痛、咳嗽、
發燒等症狀獲得不同程度的改善；食道癌病人以豬苓多糖併用 CP 治療，使 病人胸骨後疼痛、進食後的嘔吐、進食時噎哽、體力衰弱的症狀改善；豬苓 多糖併用輻射及化療的病例報告不多，在臨床上的療效評估也是一個可進行 的目標。
另外，臨床上，豬苓多糖以肌肉注射使用在肝炎、肝癌、肺癌、膀胱癌、
白血病等的報告居多，也有報導以豬苓抽取物經口服給藥也可達一定效果；
在台灣，臨床使用上以豬苓飲片為主，似乎可發展為使用豬苓多糖之抽取物 口服給藥，設計單獨使用或併用 WR-2721 對輻射和化療藥物的防護來評估其 臨床效用如何，並和實驗結果來對照。我們的實驗均以豬苓多糖腹腔注射給 藥，配合臨床也將進一步探討口服給藥的實驗結果。
如今知豬苓多糖其抗輻射作用不亞於 WR-2721，而 WR-2721 有其副作 用，也有其禁忌證，如懷孕期間禁用、哺乳期若使用 WR-2721 應停止授乳，
有腦血管病或心血管病、低血鈣症、低血壓、高血壓時應慎用（朱珠，1999），
並且價格昂貴，藥效短暫；豬苓只有「無水濕者禁用，以免傷陰」之禁忌，
沒有特別禁忌之報告，如此恰好可彌補 WR-2721 之缺點，將來兩者併用可考 慮應用於臨床，況且，豬苓和 WR-2721 併用效果和 WR-2721 單獨使用相當，
併用後可減少 WR-2721 的劑量及副作用，並可降低成本，讓醫者在輻射和化 療藥物的防護領域中有更多的選擇。
三 、 實 驗 之 討 論 小時顯現的結果。( The collaborative study group,1992 )（宮麗崑，2001）
由於不同理化刺激所引起的周邊網狀紅血球（RET）微核率最高值出現的
本實驗中我們選擇在暴露輻射 48 小時後犧牲老鼠，測量 8-OHdG 的量，
豬苓多糖或 WR-2721 組和陽性對照組比較均有意義的降低，尤其 WR-2721 效果更好，反過來豬苓多糖在防護氧化 DNA 傷害的作用似乎較弱。
利用 tk 基因突變率之測試，可以偵測到使細胞生長比較快的 tk-fast growing mutant 之突變，其為點突變及小段的基因缺失，也可以偵測到使細 胞生長比較慢的 tk-slow growing mutants 之突變，其為 DNA 大片段缺失；先
前結果顯示輻射主要會造成 DNA 大片段缺失，此次實驗以 30 µg/ml、
100µg/ml、300µg/ml，三種不同劑量濃度和 300 µg/ml WR-2721 比較，在不 同劑量下的豬苓多糖，都能有效地降低輻射所造成的基因傷害。
脂質過氧化的上升，一般都被視為活性氧族群上升而與脂質產生連鎖反應 的結果。在此實驗中，WR-2721 對脂質過氧化能有意義的降低。可喜的是，
豬苓多糖效果甚至比 WR-2721 好。
第 二 節 豬 苓 多 糖 對 化 療 藥 物 防 護 作 用
CP 是烷化類的抗癌藥物，進入生物體後，會於肝臟活化成活性中間物，
進而於靶器官與 DNA 或蛋白質反應，導致 DNA 與細胞傷害。CP 雖是常用 化療藥物，但若長期使用，將可能會導致骨髓抑制、免疫低下，甚至引發白 血病等第二原發癌，因此如何降低 CP 的副作用，進而提高其臨床療效是一 重要課題。
此次實驗顯示不論是體外或體內實驗，CP 所導致染色體損傷的 MN 增 加，均能被豬苓多糖有效地抑制，可知其具有保護化療藥物誘發染色體損傷 的能力。在體外 TK6 細胞的數據表示對 CP 防護效果於 300
µ
g/ml 的豬苓多 糖 30 分鐘前投予，再暴露於 120µ
g/ml 劑量的 CP，能有意義地降 CP 低微 核的生成率；體內 ICR 老鼠的數據顯示以 50 mg/Kg 劑量的豬苓多糖投予，30 分鐘後給予 50 mg/Kg 劑量的 CP，也能有意義地降低微核的生成率，並且
豬苓多糖對 CP 微核抑制作用呈現劑量反應關係。豬苓多糖對正常細胞是否 透過以下機轉，如：1.抑制 CP 的吸收；2.抑制 CP 之代謝活化；3.誘發 CP 解毒酵素的活性；4.提高 DNA 修復能力，則有待進一步的研究。
我們知道給予化療藥物的防護劑，可減少其誘發第二原發癌，在 CP 防護 上，目前可見酵母菌（Yeast）（Chorvatovicova et al.,1999），葡萄籽和葡萄皮
（ Grape seed and grape skin ）（ Erexson ,2003）， 蜂 膠 (Propolis)（ 王 志 萍,2001），全甲洋參膠囊(Quanjia Yangshen capsule)（任連生,2001），長春新 鹼 (Vincristinine)（葉亞新,2001），藍靛( Lonicera edulis)（全成旭,2001），靈 芝多醣 (Polysaccharides of Ganoderma lucidum )（陳建濟,2000），香菇多醣 (Lentinan)（陳冠敏, 2000）等報告，對 CP 所致染色體的損傷均有一定的保護 作用；而豬苓多糖經實驗證明對 CP 所導致染色體損傷也有良好的防護能力。
第三節 總結
MN (in vitro)
MN (in vivo)
MF (tk gene)
8-OHdG LPO
PUPs 1 1 1 2 1
WR-2721 2 3 2 1 2
PUPs+WR 3 2
如表所示，總結以上實驗，防護效果程度好壞以 1.2.3.表示，1 為最好，
2 次之。豬苓多糖不管由體外及體內染色體遺傳損傷微核( MN )試驗、老鼠 脂質過氧化( LPO )試驗、體外細胞 tk 基因突變率，效果均比 WR-2721 好，
而氧化 DNA 傷害( 8-OHdG )則 WR-2721 較好。
中醫的治則是從辯證開始，中醫的證型多數是疾病發生的病理基礎和疾病 發展導致的病理生理異常。據報導氣虛、陰虛的人容易發生腫瘤，同時腫瘤 到了一定時期也會導致氣虛和陰虛，以輻射或化療又均可導致或加重陰虛（孫 燕，2000）。豬苓是優良的生物調節物，和中醫的扶正理論有關，但是豬苓屬 於本經中品，＜本經＞：“主痎瘧，解毒，蠱疰不祥，利水道。久服輕身耐老。”，
應也有解毒的作用，似乎也可從清熱解毒的角度切入。我們從染色體遺傳損 傷，氧化 DNA 傷害和脂質過氧化作用著手，希望將豬苓多糖從分子生物學 的角度闡明中醫的學說，雖然以上實驗未能具體將兩者相聯繫，但是已從中 醫證型的分子生物學方面踏出一小步。
由豬苓的各種天然條件和實驗結果顯示頗符合理想的輻射防護和化療藥 物防護的條件，諸如可以口服給藥，很快地被吸收，沒有特別毒性，便宜易 取得，方便攜帶和儲存，使病人對輻射或化療有較好的耐受性，可以增加治 療劑量，以增加病人的存活率等，況且豬苓在民間已普遍長久地被使用在泌 尿系統等方面，若再加入對輻射和化療防護的新觀念，豬苓則是老藥新用的 一個很有價值的中藥。