根據奈米包覆藥物的水溶性實驗結果顯示，本研究進行之粗萃奈米 包覆藥物β-CD complex，可以溶解在純水中，並且呈現透明水溶液狀 態；此一結果與β-環糊精可以溶解於水中，並呈現透明水溶液狀態相 同；另外，看到牡丹皮粗萃膠置入純水中後，會呈現渾濁無法溶解的狀 態，皆與本研究製備出之粗萃奈米包覆藥物及環糊精的水溶性相異。因 此，本實驗證明了環糊精確實可將非水溶性的成分包覆成一複合體，並 轉換特性成水溶性狀態提供應用。
由 於 丹 皮 酚 在 274 nm 具 有 最 大 吸 收 波 長 ， 因 此 ， 利 用 UV spectrometer 測試粗萃奈米包覆藥物。從實驗結果看到，環糊精在 274 nm 波長吸光值趨近於0，而丹皮酚以及粗萃牡丹皮均在 274 nm 有最大吸光 值；而粗萃奈米包覆藥物在 274 nm 吸收波長下，吸光值減少。由於吸 光值的相異，是來自被包覆的分子其週遭環境與未包覆分子不同。因 此，我們認為粗萃物確實已經包覆進入環糊精中，才會有在 274 nm 吸 收波長下，丹皮酚、粗萃牡丹皮、環糊精及粗萃奈米包覆藥物吸光值差 異性的產生。
為了更進一步確認粗萃奈米包覆藥物的包覆狀態，進行了 NMR 實 驗。根據NMR 實驗結果顯示，從 NMR 光譜圖中可以看到，在環糊精、
丹皮酚奈米包覆藥物、不同包覆條件下產生的β-CD-1 及β-CD-2，在環
糊精環內相同位置上的氫，波峰會產生不同的化學位移。NMR 圖譜中，
在環糊精環內的H3 及 H5，分別位於 4 與 3.9 的位置上；在丹皮酚奈米 包覆藥物圖譜上，環內氫的 H3 及 H5 的波峰已經移動到分別是 3.94 及 3.8 的位置上；最後看到不同包覆條件下產生的β-CD-1 及β-CD-2 粗萃 奈米包覆藥物，β-CD-1 其環內氫的 H3 及 H5 分別位移到 3.96 和 3.84，
β-CD-2 則是移動到了 3.94 與 3.82。當波峰移動的範圍越大表示包覆效
果越好。由於粗萃物並非純物質，因此我們從不同包覆條件下產生的β -CD-1 及β-CD-2 其波峰所移動的位置看來，似乎添加較多的粗萃物所 製備出的粗萃奈米包覆藥物，其波峰的化學位移比較接近丹皮酚奈米包 覆藥物。因此，我們可以推測，當加入的粗萃物含量越高時，可以使環 糊精對目標客分子的包覆率增加。另外，由進行粗萃奈米包覆藥物的實 驗過程中，測試多種不同條件下的包覆作用得到一些資訊。在粗萃奈米 包覆藥物製備過程中，包覆藥物過程中的溫度、時間、加入粗萃物(或環 糊精)的量等，都是影響包覆率的變因。我們發現在粗萃奈米包覆藥物的 製備中，由於牡丹皮粗萃物是混合物 無法有效控制其當量讓藥物有效 的進行包覆，所以牡丹皮粗萃物和環糊精的重量比可能最為重要。
在抗氧化活性評估試驗中，我們可以發現 HQ 與粗萃牡丹皮的抗氧 化性能力相近；而丹皮酚的抗氧化性能力卻較差。根據之前的論文提到 牡丹皮中的丹皮酚具有抗氧化能力，從本實驗中看到丹皮酚確實是有抗
氧化力，但在粗萃物效果比丹皮酚好的結果看來，也許牡丹皮中抗氧化 能力最好的不是丹皮酚，但在粗萃物抗氧化的效果和HQ 不分軒輊的結 果，也證明牡丹皮確實是很好的天然抗氧化藥材。而在環糊精奈米包覆 藥物抗氧化性能力的試驗裡，我們發現不同包覆組成的奈米包覆藥物均 具有清除自由基能力。但奈米包覆藥物以 HP-β-CD-1 效果最好且略優於 β-CD-2，而此兩者效果遠優於其他奈米包覆藥物。推測是由於 HP-β-CD 具有-OH 基，親水性優於 β-CD 所以效果較好，而 β-CD-2 清除自由基效 果優於β-CD-1 的原因，可能在於包覆製備時所加入的粗萃物含量較高，
因此包覆程度較好也較多，而影響到清除自由基能力的差異。當我們將 藥物組和奈米包覆藥物組的清除自由基能力合併來看時，可以發現不同 組成份的包覆奈米藥物，其抗氧化活性不同，甚至 HP-β-CD-1 的清除自 由基效果略高於HQ。當 HP-β-CD-1 給藥濃度到了 200 μg/ml 而 β-CD-2 當給藥濃度到了300 μg/ml 時，其清除自由基的能力也與 HQ、粗萃丹 皮酚相差無幾。而同樣都是 HP-β-環糊精，因為包覆物的不同也使的清 除自由基能力有所差異，包覆粗萃物的 HP-β-CD-1 抗氧化力就比包覆丹 皮酚的HP-β-CD-2 來的好上許多。這也與我們藥物組所作出來的結果相 同。
在抑制酪胺酸酶活性評估試驗中，我們可以發現 HQ 的抑制酪胺酸 酶活性能力可達80% ，而粗萃物和丹皮酚的抑制酪胺酸酶活性能力與
HQ 相比則較差；而粗萃物和丹皮酚的在抑制酪胺酸酶活性相似，但是 抗氧化性差異的不同上，可以看到粗萃物抗氧化性比丹皮酚高。根據之 前的論文提到牡丹皮中的丹皮酚具有抑制酪胺酸酶活性能力，從本實驗 中看到丹皮酚確實是有抑制酪胺酸酶活性能力。而在粗萃奈米包覆藥物 抗氧化性能力的試驗裡，我們發現不同包覆組成的奈米包覆藥物均具有 抑制酪胺酸酶活性能力。以包覆純丹皮酚的HP-β-CD-2 的抑制效果最 好，而粗萃奈米包覆藥物HP-β-CD-1 效果略優於 β-CD-2、β-CD-3，而 此兩者效果遠優於β-CD-1。因此，推測由於 HP-β-CD 具有-OH 基，親 水性優於β-CD 所以效果較好。而 β-CD-2 抑制酪胺酸酶活性效果優於 β-CD-1，也與抗氧化試驗中我們看到的結果一樣。因此，我們從上述結
果推論，包覆製備時所加入的粗萃物含量較高，會導致包覆程度較好也 較多，而影響到藥物作用能力的差異。
在實驗進行中也發現溶劑不同會造成藥物溶解後狀態不同。DPPH test 用的溶劑是 50% 乙醇；Tyrosinase inhibition test 用的是 10% DMSO，
HQ 在兩樣溶劑中的溶解度由外觀看來並無差異，但是丹皮酚及粗萃牡 丹皮在兩樣不同溶劑下就有外觀上差異。丹皮酚與粗萃牡丹皮在 50%
乙醇中溶解度很好，不會有混濁狀態產生；而使用 10% DMSO 當作溶 劑時，丹皮酚與粗萃牡丹皮均出現渾濁現象。在 Tyrosinase inhibition test 中，因為抑制目標為蛋白質無法使用乙醇當溶劑，會造成蛋白質降解。
嘗試過使用50% DMSO，但實驗結果會與使用乙醇當溶劑一樣影響反應 目標。因此，我們可以用來解釋為什麼在Tyrosinase inhibition test 中，
藥物組與奈米包覆藥物組的抑制率並無法太高；可以確定的是，在 Tyrosinase inhibition test 結果中，藥物組與奈米包覆藥物組抑制率隨著濃 度增加而逐漸爬升，因此推測再繼續增加濃度會使抑制率增加。但由於 藥物及β-環糊精的溶解度有限，繼續往高濃度進行會造成誤差而失去意 義，因此β-環糊精實驗到這不再繼續探討下去。
另外，我們將由水溶性極佳的 HP-β-環糊精所包覆之粗萃奈米包覆 藥物 HP-β-CD-1 及包覆丹皮酚的 HP-β-CD-2 來做比較，看抑制酪胺酸酶 的能力。發現包覆丹皮酚的 HP-β-CD-2 在 1.5 mg/ml 則可達到 50％ 的 抑 制 率 ， 比 起 HP-β-CD-2 來 的 效 果 好 很 多 。 而 當 HP-β-CD-1 及 HP-β-CD-2 給藥濃度都達到 3 mg/ml 時，抑制酪胺酸酶的能力都可達到 60％ 以上，且兩組藥物差異彼此減小至抑制能力相當。在這組實驗中 看到的結果推測，丹皮酚由於為脂溶性成分在水溶液中溶解度有限，因 此由當溶解度也有限的β-環糊精所包覆時，其抑制酪胺酸酶的能力就不 顯著；反觀由溶解度極佳的 HP-β-環糊精所包覆時，無論丹皮酚或粗萃 物的抑制酪胺酸酶能力都隨濃度增加而增加。
由本研究實驗結果得到訊息，我們認為當在特定條件下時，環糊 精並不會減低牡丹皮粗萃物活性，也不會導致粗萃物清除自由基及抑制
酪胺酸酶活性消失。當濃度足夠時，粗萃奈米包覆藥物也可能達到與原 來藥物相仿的效用，證實環糊精確實可將脂溶性成分包覆並轉換其化學 性質，且不影響原本成分的活性與功效。而 HP-β-環糊精具有-OH 基，
親水性優於β-環糊精，所以在實驗中看到的效果較好。從實驗中發現，
牡丹皮粗萃物的抗氧化性優於丹皮酚；丹皮酚的抑制酪胺酸酶能力則略 優於牡丹皮粗萃物，但不論粗萃物或丹皮酚經包覆後，達到一定濃度時 抑制酪胺酸酶的能力會慢慢接近。β-環糊精具有經 FDA 認可及成本較低 的優勢；HP-β-環糊精則是親水性好且在室溫下即可製備，不受溫度限 制的優點。本研究主要目的探討環糊精包覆中草藥後的應用，目前實驗 結果證實此一包覆技術可行，而後續可以進行改善包覆技術且進行生物 利用度的實驗，去加以佐證環糊精奈米包覆藥物在中草藥上帶來的製劑 技術突破。
第六章、 結論
本研究進行實驗證實牡丹皮粗萃包覆奈米藥物已成功製備，並獲得 UV 及 NMR 分析儀器鑑定證實其成份，並且將此粗萃包覆奈米藥物置 入水中時，會呈現透明水溶液態，證明牡丹皮粗萃包覆奈米藥物具有良 好的水溶性。而從DPPH test 中得知牡丹皮粗萃物抗氧化活性比丹皮酚 高，環糊精(CD)並不會導致粗萃物抗氧化活性消失，且不同組成份牡丹 皮粗萃包覆奈米藥物，其抗氧化活性不同；而從 Tyrosinase inhibition test 中，也得知牡丹皮粗萃物抑制酪胺酸酶活性所需濃度較高，而使用的限 制也較多。就正向而言，環糊精(CD)並不會導致粗萃物抑制酪胺酸活性 消失，不同組成份粗萃包覆奈米藥物，其抑制酪胺酸酶活性不同。
從抗氧化活性測試及抗氧化美白測試中且在特定條件下，看到了環 糊精並未導致牡丹皮粗萃物活性消失。而 HP-β-環糊精具有-OH 基，水 溶性比β-環糊精好且包覆後的效用也較佳。所做實驗都證實環糊精確實
從抗氧化活性測試及抗氧化美白測試中且在特定條件下，看到了環 糊精並未導致牡丹皮粗萃物活性消失。而 HP-β-環糊精具有-OH 基，水 溶性比β-環糊精好且包覆後的效用也較佳。所做實驗都證實環糊精確實