第一章 前言
八、 進樣的方式與時間
進樣的方式可分類類為壓力力進樣，重力力進樣，電動進樣，真空抽吸進樣；而進 樣時間長短會影響樣品進入毛細管的體積。此外，樣品注射之體積所佔毛細管總 體積之比例例，甚至可能影響緩衝溶液的導電度度，進而影響分離離效率率率。
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表一、以毛細管電泳法分離離尿尿液中核苷的研究及其分析條件
Table 1. Analytical conditions of studies determining urinary nucleosides by capillary electrophoresis Real
sample
Preparation Detection type Condition Analysis time range from 190 to 390 nm
BGE: 25 mM borate, 42.5 mM phosphate
pH 6.7, 200 mM SDS; uncoated fused-silica
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伍、 環糊精精之簡介
環糊精精（cyclodextrins）是由六六個以上葡萄糖糖以 α—1, 4—糖糖苷鍵聯聯合而成的 巨環聚合物，依組成的葡萄糖糖數數目不不同而命名。其中最常見見三種的是 α環糊精精 glucosyltransferase, CGTase），其會將澱粉分解產生環糊精精。CGTase 從兩兩端切切斷 呈螺螺旋狀狀的澱粉，之後再將頭尾連連接起來來組成一個中空錐筒狀狀構造。CGTase 可
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腔室為主體，包合各種不不同的有機、無機化合物，離離子或稀有氣體，形成主客錯 合物（host-guest complex）或稱為內包錯合物（inclusion complex），這些錯合物 的穩定性與客體分子的大小，形狀狀與疏水性有關，此外環糊精精與客體分子間的非 共價鍵結作用力力（凡得瓦力力、氫鍵與疏水性交互作用）也扮演重要的角色。當各 種物質被環糊精精包合後，其穩定性，溶解度度與揮發性等各種理理化性質會產生明顯 的改變，也因此使它可廣泛應用於許多不不同的領領域，例例如，醫藥、化妝品、分析、
材料料合成及分子生物等。尤其是醫藥方面的應用，除了了增加藥物溶解度度、穩定性、
與生體可用率率率，降降低藥物的毒性、副作用、苦味與對黏膜的刺刺激性外 [50]，其 本身也具有療療效，可應用於膽固醇代謝異異常的疾病 （尼曼匹克症，Niemann-Pick disease） [53]。
羥丙基-β-環糊精精（HP-β-CD）是由 β-CD 與環氧丙烷（propylene oxide）經 化學反應後，將 β-CD 的一級羥基對稱取代為 CH2CHOHCH3而來來的。由於此取 代基具高極性，因此 HP-β-CD 的溶解度度也大幅提昇，且毒性低於 β-CD [54]。
HP-β-CD 在分析化學的應用，主要是用來來分離離異異構物，其分離離原理理是藉由 異異構物本身立立體空間結構的差異異，造成所與環糊精精所形成的內包錯合物穩定度度不不 同，而達到分離離。此外，它也可以幫助提昇疏水性物質的溶解度度。本研究首次將 其應用於幫助分離離尿尿液中的核苷。
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表二、環糊精精的基本性質 [52]
Table 2. Characteristics of cyclodextrins
環糊精精
α β γ
葡萄糖糖單體數數目 6 7 8
分子式（無水） C36H60O30 C42H70O35 C48H80O40
分子量量（無水）g/mol 972.85 1134.99 1297.14
腔室高度度，nm 0.8 0.8 0.8
腔室內徑，nm（估計值） 0.52 0.66 0.84
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圖二、β 環糊精精的分子構造圖 [52]
Fig. 2 Molecular structure of β-cyclodextrin
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陸陸、 研究動機
癌症的診斷與預後相關的生物標記，一直都都很有研究價值，主要是因為其高 盛行行率率率與高復復發率率率，而有用的生物標記可能幫助臨臨床醫師在疾病早期診斷出來來，
讓患者有機會接受治癒性的治療療，且在治療療後的追蹤，也同樣能幫助醫師篩選出 高復復發危險性的病患，進行行更更密切切的追蹤。數數種尿尿液中核酸代謝物組成的代謝體 學，是有別於傳統生化學腫瘤標記外的另一個癌症生物標記的研究方向，但需要 一個靈靈敏，簡單，迅速的分析工具，來來分析大量量生物檢體，探尋有用的生物標記。
因此本研究希望開發出一種不不須前處理理或萃取步驟的毛細管電泳法，可迅速 分析癌症與健康對照受試者尿尿液中的數數種修飾核苷與 DNA 氧化損傷標記 8-OHdG 的變化，作為之後大量量篩檢作業的工具。
由於肝癌與大腸癌為癌症死亡原因的第二、三名 [1]，因此在選擇偵測目標 時，我們參參考了了 2009 年年鄭隆隆賓等人的研究結果：肝細胞癌病患尿尿液中的三種修 飾核苷 (C, A, I) 高於健康人 [34]，以及 2009 年年， Lai 等人的發現：大腸癌病 患尿尿中修飾核苷 A、C、m22G、U 與 8-OHdG 的排放量量顯著高於對照組 [35]，
而選擇偵測的苷項目為 8-OHdG、A、C、m22G、U、I 等六六種。
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