鯉魚靜水式毒性試驗

本研究所使用之鯉魚靜水式毒性試驗的標準方法，主要採用我國環境檢驗環 檢所所發布之標準方法，其概略步驟如下：

(一)

鯉魚馴養：

1. 將鯉魚幼魚自魚苗繁殖場取回後，待適應馴養水之水質後，放入內盛馴養水 之馴養容器中。

2. 鯉魚馴養時，以曝氣設備進行曝氣，使溶氧維持在 8 mg/L 以上，並以水循環 過濾裝置維護水質，如有死魚應立即移出，當水質呈白色混濁及水面上含大 量泡泡時，須立即換水，避免因水質惡化造成鯉魚死亡。

3. 馴養之水溫與毒性試驗溫度一致，即 25 ± 2℃，光照時間應維持在每天 16 ± 1 小時。

4. 馴養時間至少 7 天，毒性試驗開始前 7 天內，期間幼魚死亡率不得超過 10%。

5. 幼魚成長速度與馴養之密度及餵食狀況有關，須依實際情況調整馴養容器中 幼魚數量及餵食次數。過剩之飼料宜移除以免導致水質惡化。

6. 毒性試驗開始前 24 小時停止餵食。

7. 試驗用之鯉魚全長應為 2.0 至 3.0 公分。

(二) 範圍尋找試驗（range-finding test）

1. 進行試驗時，若不確定樣品之半數致死濃度落於哪一濃度範圍，可先進行範 圍找尋試驗。

2. 建議可將水樣或環境用藥以稀釋水適度進行 10 倍序列稀釋。每一濃度之試驗 水樣體積至少 1.5 L，以 1 個試驗容器盛裝。

3. 每一濃度之試驗生物總數均為 5 隻。以手操網將經馴養且全長 2.0 至 3.0 公

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分之鯉魚移入試驗容器，每個容器各放 5 隻。

4. 試驗期間鯉魚不得餵食，水溫應控制在 25 ± 2℃，光照應維持每天 16 ± 1 小時。

5. 觀察 8 至 24 小時，移出死亡之魚並記錄死亡數量。試驗結果作為確定試驗稀 釋方式之參考。

(三) 確定試驗（definitive test）

1. 將水樣或環境用藥以稀釋水稀釋為 5 個濃度，相鄰濃度之稀釋倍數不得超過 2 倍。放流水則以 5 個固定濃度進行試驗（100%、80%、60%、40%及 20%）。

每一濃度之試驗水樣總體積至少 3 L，以 2 個試驗容器平均盛裝。

2. 稀釋完成後，檢測最高濃度試驗水樣之 pH、溶氧、導電度及餘氯。另須檢測 稀釋水之 pH 及導電度。

3. 每一濃度之試驗生物總數均為 20 隻。以手操網將經馴養且全長 2.0 至 3.0 公分之鯉魚移入試驗容器，每個容器各放 10 隻。

4. 空白試驗(Control)則取 2 個試驗容器，分別盛裝至少 1.5 L 之 100%稀釋水，

以手操網各放入 10 隻經馴養且全長 2.0 至 3.0 公分之鯉魚。

5. 試驗期間為 96 小時，水溫應控制在 25 ± 2℃，光照應維持每天 16 ± 1 小時。

試驗期間鯉魚不得餵食。

6. 開始試驗後，至少於第 2、24、48、72 及 96 小時，觀察及移出死亡之鯉魚並 記錄死亡數量。

7. 結束試驗後，須測量並記錄最高濃度試驗水樣之溶氧及 pH，並記錄試驗期間 之最高及最低水溫。

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(四) 結果處理

1. 死亡判定：死亡之判定須符合下列二條件：

(1) 鰭及鰓的活動停止。

(2) 魚體經輕觸沒反應。

2. 96 小時 LC₅₀之計算：

計算各試驗濃度之 96 小時鯉魚死亡總數及鯉魚死亡百分率：

鯉魚死亡總數 = 2 個試驗容器之鯉魚死亡數量加總 鯉魚死亡百分率 = 鯉魚死亡總數 ÷ 20 × 100%

本研究以下列 2 種方法計算 96 小時 LC₅₀： (1) 機率單位法（probit method）

(2) 史丕曼－卡伯法（Spearman-Karber method）

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