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一、試驗材料:

(一)供試植物

供試植物為芸香科(Rutaceae)柑橘屬(Citrus spp.)之金桔(Citrus microcarpa Bonge)、酸橘(C. sunki Hort.)、檸檬(C. limon (L.) Burm.f.)及

柚子(C. grandis (L.) Osbeck)。上述供試植物皆由宜蘭縣青果合作社購得實 生苗各 50 株,並種植於 10 吋盆中做為供試盆栽,大約一至二星期以花寶 施肥一次,置放於室外。

(二)試驗及飼養容器

供試及飼養容器共有四種,為考量試驗空間的節省同時考量各蟲期幼 蟲所須空間,因此在幼蟲不同齡期適時更換飼養容器,使用三種飼養容器 依容量由小至大分別為:1、圓形透明塑膠盒 A(盒口直徑 9.2 cm、底部直 徑8 cm、高 5.8 cm,約 300cc,以下簡稱飼養盒 A,如附錄四 A);2、圓形 半透明塑膠盒B(盒口直徑 11cm、底部直徑 9cm、高 7.5cm,約 500cc,以 下簡稱飼養盒B,如附錄四 B);(三)圓形不透明紙盒 C(盒口直徑 13 cm、

底部直徑11 cm、高 10 cm,約 850cc,以下簡稱飼養盒 C,如附錄四 C);

壓克力飼養箱D (長 30cm、寬 30cm、高 30cm,如附錄四 D)。

(三)供試蟲源和飼養方法

由宜蘭縣龍潭湖取得大鳳蝶5 隻雌蝶及 5 隻雄蝶,攜回釋放於以鍍鋅

管建構,外覆百吉網的簡易網室(長6.1 m、寬 4.7 m、高 2.6 m)內(附錄 五),網室內栽種蜜源植物如馬纓丹(Lantana camara L.)、繁星花(Pentas lanceolata Delflers)、馬利筋( Asclepias curassavica L.)、非洲鳳仙花

(Impatiens wallerana Hork. f.)、長穗木(Stachytarpheta jamaicensis L.)、白 玉蘭(Michelia alba DC.)等植物,提供成蝶吸蜜、求偶、交配及遮陰避雨。

另移入酸橘盆栽供其產卵,為了擴大蟲源族群足供試驗之用及防止天敵之 危害,先將網室內雌蝶所產的卵攜回實驗室內以飼養盒 B 進行飼養,每盒 約放入20-30 粒卵,待卵孵化後每天更換新鮮柑橘屬寄主供幼蟲取食並且清 理其糞便,至幼蟲三齡後以毛筆將之移入透明壓克力飼養箱進行飼養至成 蝶羽化,每箱約飼養30 隻幼蟲,羽化後之成蝶放入上述之簡易網室內,待 每日產卵數足供溫度試驗每處理所需的50 粒卵,即可開始進行試驗。

二、試驗方法

(一)形態特徵之觀察與描述

在網室內採大鳳蝶當日產卵,置於25±1℃,80±5% RH,光週期 14L:

10D 條件下生長箱內的飼養盒 B 內,待卵孵化後以毛筆將一齡幼蟲移至飼 養盒 A 中單隻飼養,盒蓋以針刺密集小孔以流通空氣,每日提供足夠之酸 橘葉片供幼蟲取食並且清理容器,所有供試之酸橘葉片採下後皆先行擦拭 乾淨並且於葉柄包裹溼棉花保鮮。剛孵化的一齡幼蟲以嫩葉餵食,第二齡 後再逐漸放入較成熟之葉片餵食,五齡後將飼養盒 A 換成飼養盒 C,盒蓋

同樣以針刺較大孔洞,以流通空氣,而化蛹後在飼養盒 C 內懸掛較粗糙之 衛生紙,以利羽化,每日觀察記錄各蟲期形態特徵及生長發育情形,並且 各蟲期皆以數位相機分別加以拍照記錄。成蝶則製成乾燥標本,以供形態 觀察及特徵描述之依據。

幼蟲體長之測量是以數位式游標卡尺(Mitutoyo Corp, Series 500 CD-6”

CSX),測量剛孵化之第一齡幼蟲及剛蛻皮之各齡幼蟲在一般狀態下的體 長;幼蟲頭殼寬度是測量各齡幼蟲蛻下之頭殼寬;卵徑、卵高及一齡幼蟲 的頭殼寬度是用解剖顯鏡目鏡中所附的微尺測量,亦可以用數位式游標卡 尺測量,其餘各齡幼蟲的頭殼寬皆以數位式游標卡尺測量。蛹長、蛹寬、

蛹重之測量是於化蛹當日以電子天平(A&D Company, limited HF-300)測 量單隻蛹體之蛹重,並以數位式游標卡尺測量蛹長、蛹寬;成蝶翅長、翅 寬、成蝶重量之測量則於成蝶羽化當日以數位式游標卡尺測量成蝶之翅 長、翅寬,測量翅長是由前翅翅基至頂角;翅寬則是測量前翅頂角至肛角,

成蝶重量則於羽化當天將成蝶放置於飼養盒 B 中以電子天平測量其重量,

並扣除飼養B 重量即得單隻成蝶重量。

(二)不同寄主對各蟲期生長發育之影響

於試驗前日將一盆酸橘盆栽(株高約120cm,含 50-80 片葉片)置於網 室內供雌蝶產卵用,試驗當日在網室內採大鳳蝶當日產卵,置於 25±1℃,

80±5 % RH,光週期 14L:10D 的條件下的生長箱中飼養盒 B 內,盒蓋以針

刺密集小孔以流通空氣,為暸解不同寄主對大鳳蝶生長、發育之影響,待 卵一孵化後立即以毛筆將一齡幼蟲移至飼養盒 A 中單隻飼養並註明產卵日 期及編號,以避免幼蟲開始取食酸橘葉片而影響試驗,依各不同寄主植物 實驗分成四個處理,每處理50 粒卵,由於各處理之孵化率不定,因此各處 理依孵化後供試的一齡幼蟲分別以金桔(C. microcarpa Bonge)葉片餵食 20 隻;酸橘(C. sunki Hort.)16 隻;檸檬(C. limon (L.) Burm.f.)21 隻;

柚子(C. grandis (L.) Osbeck)22 隻,並置於上述條件之生長箱內單隻飼育,

幼蟲五齡時,再移入較大之飼養盒 C 中飼養,每日清理飼養盒並提供充足 新鮮之寄主供其取食至成蝶羽化。每日觀察並記錄其卵孵化日、各齡幼蟲 脫皮日、化蛹日、蛹色、成蝶雌雄,同時依各不同發育階段所測量記錄的 資料計算出各蟲期之存活率、發育日數、幼蟲之體長與頭殼寬、蛹之體重 與體長及體寬、成蝶之體重與翅之長度與寬度、蛹色與成蝶性比等,並且 製成圖表。

(三)溫度對各蟲期生長發育之影響

於試驗前日將一盆酸橘盆栽置於網室內供雌蝶產卵用,試驗當日在網 室內採大鳳蝶當日產卵,將卵單粒置於飼養盒 A 中,盒蓋以針刺密集小孔 以流通空氣,同時註明產卵日期、試驗溫度及編號,依各不同溫度試驗分 成五個處理,每個處理 50 粒卵計 250 粒卵,分別移入 15、20、25、30 及 35±1℃,相對濕度 80±5% RH,光照 14L:10D 的生長箱內飼養,每日觀察

並記錄各溫度卵孵化日及數量,以計算不同溫度卵期及卵之孵化率。待卵

(四)幼蟲期之食葉量

採大鳳蝶當日產卵50粒,置於25±1℃,相對濕度80±5 %,光週期14L:

10D的條件下的飼養盒B內,待卵一孵化後立即將一齡幼蟲移至飼養盒A中 單隻飼養並編號,供試一齡幼蟲共20隻,以檸檬葉片餵食,每日觀察並記 錄幼蟲各齡期的食葉量。根據吳和楊(1995),陳和歐陽(2002;2003;

2005;2007)報告之方法,每天採取厚薄相近檸檬葉片,餵食前先將葉片 放於方格紙上,再以鉛筆描繪葉片外形並編號,取此葉片放入飼養盒A餵 食,隔日再將取食後殘留的葉片放回原先相對應之方格紙輪廓上,先以鉛 筆描繪後再以剪刀修剪掉殘留葉片部分, 即得到被食部分之葉片紙樣, 再 用葉面積測定儀(MODEL LI-3100 AREA METER;LI-COR, Inc. Lincoln, Nebraska USA.,附錄六)逐一測量葉片紙樣的面積,測得各供試幼蟲每日 之食葉面積,並記錄幼蟲蛻皮的時間,以累計各齡期的食葉量。

(五)雌蝶產卵偏好

本試驗目的為比較大鳳蝶雌蝶對於四種芸香科柑橘屬經濟作物分別為 金桔、酸橘、檸檬及柚子是否有產卵的偏好性及雌蝶產卵於寄主植物部位 之偏好。本試驗共5重複,每重複一對成蝶。試驗時將一對當日羽化之大鳳 蝶成蝶移入以鍍鋅管建構外覆百吉網的簡易網室(長3 m、寬2m、高1.6m)

內(附錄七),簡易網室內放置一盆臺灣土肉桂(Cinnamomum osmophloeum Kaneh.)(約150cm高)供成蝶休息遮陰蔽雨,同時放置繁星花盆栽及長穗

木數盆做為蜜源植物,並隨機於網室內放置金桔、酸橘、檸檬、柚子(株 高約120cm,含50-80片葉片)盆栽各一,供雌蝶產卵。調查至雌蝶死亡,

每日記錄各寄主植物上產卵數量及產卵位置,試驗後計算於不同寄主植物 上卵數及寄主植物上產卵位置之百分比,而寄主植物上產卵位置之偏好只 計算產於檸檬葉片上的卵粒。

三、資料分析

本試驗之所有生物學基本資料包含各蟲期發育日數、各齡期幼蟲體 長、頭殼寬、蛹重、蛹長、蛹寬、成蝶重、翅長、翅寬等數據皆以SAS System version 9.1 for windows統計軟體(PROC MEANS, SAS Institute 2003)計算 出平均值(Mean)和標準誤差(Standard Error)。不同寄主及不同溫度之間 各項資料再依據SAS 9.1 統計軟體之變異數分析ANOVA(PROC GLM)進 行分析,並進一步以最小顯著差異(Least significant difference-LSD)進行 平均值之間的顯著性差異比較。對於各齡幼蟲頭殼寬與體長、發育速率與 溫度之間的相關性是採用迴歸分析(PROC REG)進行分析。雌、雄比例依 卡方(X2)之適合性測驗(Chi-Square of goodness of fit)進行計算。

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