近年研究發現，EGFR signaling 促進乳癌細胞的細胞遷移行為是透過 focal adhesion 中 tensin 家族的 tensin3 及 C-terminal tensin like molecule (Cten) 之 互換機制達成 (Katz et al., 2007)。Cten 在許多組織癌化的過程中都有大量表現 的情況，且在癌細胞轉移的過程中扮演重要角色。
1.3.1 Tensin 家族
Tensin 的蛋白質結構連接了細胞骨架與細胞膜上的 integrin receptors，
因此在 focal adhesion 中扮演著結構性蛋白的角色，協助支撐 focal adhesion 的結構。另外，tensin 可和許多的結構性蛋白或訊息傳導分子結合，因此也 為一種 scaffolding 蛋白質 (Lo, 2004)。再者，許多因子可促進 tensin 的 tyrosine 磷酸化的現象，包括貼附於細胞外基質時 (Bockholt and Burridge, 1993)、處理細胞生長因子 PDGF (Jiang et al., 1996)、thrombin、angiotensin (Ishida et al., 1999) 及 oncogenes Src、BCR/ABL (Davis et al., 1991; Salgia et
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al., 1995) 等，顯示 tensin 在 focal adhesion 中可藉由磷酸化提供組成不同 的訊息傳導複合體所需的平台，以因應不同的環境。
研究 tensin 基因剔除小鼠 (knockout mice) 發現，tensin 在腎臟功能、
肌肉新生方面都扮演重要角色 (Lo et al., 1997; Ishii and Lo, 2001)，從 tensin-null mice 的胚胎中分離出的纖維細胞 (fibroblasts) 也發現具有較慢 的細胞遷移速率，顯示 tensin 在細胞遷移中也扮演重要角色 (Chen et al., 2002)。
Tensin 家 族 具 有 四 個 成 員 ， 分 別 為 tensin1 、 tensin2 、 tensin3 及 tensin4/Cten (Lo, 2004)。 Tensin 蛋白質結構的 N 端具有 actin-binding domain (ABD)，可與 actin filaments 進行結合，影響細胞骨架的 cross-link (Lo et al., 1994)；C 端則具有兩個 pTyr-binding motifs，分別為 Src Homology 2 (SH2) domain 及 pTyr-binding (PTB) domain 。 SH2 domain 可 和 tyrosine-phosphorylated 蛋白質結合，包括 phosphoinositide-3-kinase (PI3K)、
p130Cas 及 FAK (Auger et al., 1996; Davis et al., 1991)。雖然 PTB domain 為 另 一 種 pTyr-binding motifs ， 但 tensin 的 PTB domain 卻 不 和 tyrosine-phosphorylated 蛋白質結合，反而會和 β-integrin 的 cytoplasmic tail 中的 NPXY motif 結合 (Calderwood et al., 2003)。不同成員之間的 N 端及 C 端區域具有高度的保守性，唯獨 tensin4 不具有 N 端的 ABD，只有 C 端的 SH2 及 PTB domain 與其它 tensin 成員相似，因此又名 C-terminal tensin-like molecules，簡稱 Cten (Lo and Lo, 2002)。
1.3.2 Cten
相較於其他 tensin 成員廣泛表現於各種人類組織中 (Chen et al., 2000)，Cten 則高度表現於正常前列腺組織及胎盤組織之中，顯示 Cten 具 有組織特異性 (Lo and Lo, 2002)。另一方面，相較於正常前列腺細胞，Cten 在前列腺癌細胞中有蛋白質含量較低的情況，因此在前列腺組織中被認為是
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tumor suppressor 的角色 (Lo and Lo, 2002)；但 Cten 在胸腺癌 (Sasaki et al., 2003 b)、肺癌 (Sasaki et al., 2003 a)、胃癌 (Sakashita et al., 2008)、乳癌 (Katz et al., 2007) 及大腸癌 (Albasri et al., 2009; Liao et al., 2009) 中都有蛋白質 含量大量提升的情形，且隨著腫瘤的惡化，Cten 蛋白質含量也有更進一步 上升的現象，因此在這些組織中被認為 oncogene 的角色。
許多研究指出 Cten 主要參與在細胞遷移及細胞侵入等生理機制中。
在大腸癌細胞株 HCT116 及 SW480 中，過量表現的 Cten 會促進表皮-間 葉細胞轉換 (epithelia-mesenchymal transition, EMT) 的發生，同時伴隨著細 胞遷移及細胞侵入的能力上升 (Albasri et al., 2009)。研究也發現在大腸癌細 胞株 HCT116 中，Cten 及 integrin-linking kinase (ILK) 都會與 integrin 有 交互作用，且 Cten 可調控 ILK 的表現，同時 Cten-ILK pathway 在調控細 胞遷移甚至是癌細胞轉移方面也很重要 (Albasri et al., 2011)。在許多具有 K-ras/B-raf mutation 的大腸癌及胰臟癌組織當中發現，Cten 為 K-RAS 的 下游調控基因之一，且 Cten 也參與在 K-RAS 所誘導的細胞遷移機制中 (Al-Ghamdi et al., 2011)。這些研究皆指出 Cten 在癌細胞侵入或擴散至周圍 組織中扮演關鍵性的角色。除了上述機制外，在正常的前列腺表皮細胞中，
當細胞發生細胞凋亡時 (apoptosis)，Cten 會被 Caspase-3 進行水解，水解 後的產物 PTB domain 片段 (571-715 a.a.) 可進一步促進細胞凋亡，顯示 Cten 參與在細胞凋亡的機制中 (Lo et al., 2005)。
在調控 Cten 表現的訊息傳導方面，許多生長因子，如 EGF、FGF2、
NGF、PDGF、TGFβ、IGF-1 等，以及一些 cytokines，如 IL-6 及 IL-13 皆 可誘導 Cten 的表現，顯示 Cten 為與癌症相關的生長因子及 cytokines 所 調控的下游共同目標之一 (Hung et al., 2013)，同時 Cten 也參與在 EGF、
FGF2 所誘導的細胞遷移機制中 (Katz et al., 2007; Hung et al., 2013)。而在非 惡性 (nontransformed) 的人類乳腺細胞株 MCF10A 中，IL-6 可藉由轉錄因 子 Stat3 誘導 Cten 的大量表現進而促進細胞遷移發生 (Barbieri et al.,
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2010)。除此之外，在狗的腎臟上皮細胞株 MDCK 中，Stat3-Cten pathway 會 影響 epithelial sheet invasion 及 tubulogenesis 的發生 (Kwon et al., 2012)。
在 人類皮膚角質細胞株 HaCaT 中發現，Cten 為轉錄因子 ∆Np63α 的下 游調控基因之一，且 ∆Np63α-Cten pathway 對一切皮膚病變 (Seborrhoeic keratoses) 很重要 (Seo et al., 2012)。但在 EGF 所誘導的 Cten 表現機制中，
是否涉及 Stat3、∆Np63α 或其他相關的轉錄因子目前仍不明確。
1.3.3 Cten 於 EGFR signaling 中參與的調控機制
Katz 等 人 (2007) 研 究 報 告 指 出 ， 在 人 類 非 惡 性 乳 腺 表 皮 細 胞 株 MCF10A 中， EGF 誘導的細 胞遷移現 象是透過 位於 focal adhesion 的 tensin family 進行調控，在 EGF 的刺激下，細胞中不具有 actin-binding domain 的 Cten 表現量會上升，而 tensin3 的表現量卻下降，大量表現的 Cten 取 代了 tensin3 與 integrin 的結合，進而促使細胞骨架瓦解，促進細胞遷移，
並有助於乳癌細胞的侵犯性。該研究並發現，EGF 誘導 Cten 的表現量上 升是專一性透過 EGFR signaling 下游的 ERK kinase 所調控。
Cao 等人 (2012) 發表的研究報告探討了更下游的調控機制，他們發現 蛋白質 deleted in liver cancer 1 (DLC1) 及 RhoA 參與在 EGF 所誘導的 tensin3-Cten 的 調 控 機 制 中 。 在 沒 有 EGF 的 刺 激 下 ， tensin3 的 actin-binding domain 會和 DLC1 的 SAM domain 結合，抑制了 DLC1 本 身的 autoinhibition 效果，活化 DLC1 上的 Rho-GAP (GTPase activation proteins) domain 活性，RhoA-GTP 因而被水解並失活，降低了細胞遷移性；
但在 EGF 刺激之下，受 EGF 誘導表現量上升的 Cten 取代了 tensin 3 與 DLC1 的結合，但因為 Cten 不具有 actin-binding domain，因此使 DLC1 可 進 行 autoinhibition ， 使 其 無 法 活 化 自 身 Rho-GAP 的 活 性 ， 因 而 提 高 RhoA-GTP 的含量，活化的 RhoA 可促使 focal adhesion 及 stress fibers 的 形成，並促進細胞遷移。
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Hong 等人 (2013) 則發現 EGF 可促進 Cten 的 SH2 domain 與 E3 ubiquitin ligase c-Cbl 的結合，降低 EGFR 被 ubiquitination 的現象，也降 低 EGFR 因 ligand 所誘導的降解現象 (ligand-induced degradation)，而得 以延長 EGFR signaling 的活化時間，突顯了 Cten 除了於 EGFR signaling 下游中的轉譯後調控功能。
以上研究描述 Cten 在 EGF 所誘導的細胞遷移機制中扮演的重要角色，
且 EGF 所誘導的 Cten 表現量上升，可進一步以正回饋的方式延長 EGFR signaling 的活化時間。但 EGFR signaling 如何調控 Cten 的表現並無進一 步探討，此部分也是本論文擬探討的主題。