National Sun Yat-sen University Institutional Repository:Item 987654321/39633

行政院國家科學委員會專題研究計畫 成果報告

台灣海域軟珊瑚與細菌所含抗癌、抗病毒天然物的探討

計畫類別： 整合型計畫 計畫編號： NSC91-2323-B-110-003- 執行期間： 91 年 08 月 01 日至 92 年 07 月 31 日 執行單位： 國立中山大學海洋資源學系(所) 計畫主持人： 許志宏 報告類型： 完整報告 處理方式： 本計畫可公開查詢

中 華 民 國 92 年 10 月 23 日

行政院國家科學委員會補助專題研究計畫

_{; 成果報告}

計畫

中文名稱:台灣海域軟珊瑚與細菌所含抗癌

、抗病毒天然物的

探討

英文名稱:

Searching Anticancer and Antivirus Natural Products from Soft Corals and Bacteria along the Coast of Taiwan

計畫類別：□ 個別型計畫

;

整合型計畫

計 畫 編 號 ：NSC91－2323－B－110－003

成果報告時程：91 年 8 月 1 日至 92 年 7 月 31 日

計畫主持人：許 志 宏

共同主持人： 計畫參與人員：

成果報告類型(依經費核定清單規定繳交)：□精簡報告

;

完整報告

本成果報告包括以下應繳交之附件：

□赴國外出差或研習心得報告一份

□赴大陸地區出差或研習心得報告一份

□出席國際學術會議心得報告及發表之論文各一份

□國際合作研究計畫國外研究報告書一份

處理方式：除產學合作研究計畫、提升產業技術及人才培育研究計畫、列管

計畫及下列情形者外，得立即公開查詢

□涉及專利或其他智慧財產權，□一年□二年後可公開查詢

機構及單位名稱：中山大學海洋資源學系

中 華 民 國 92 年 10 月 22 日

附件一

中文摘要 在本年度計畫中，本研究室分離純化出十五個純天然化合物，其中八個巳完成結構鑑定。 總計在本計畫執行三年來，在分離純化工作上、我們共純化並鑑定出七十八個天然化合物，其 中三十五個為新的天然化合物，此外，有兩個化合物也被發現具有新架構(25及52)。這些化合 物有十七個是norditerpenoids、二十二個是diterpenoids、八個是sesquiterpenoids、十九 個是steroids、一個是不飽和脂肪酸、三個是necleosides、二個是β-carotenoids、一個是 tyrosine-derived amide、二個是norsesquiterpenoids、二個是furanone、一個是p-vinylbenzyl alcohol的天然化合物，部分化合物已被發現具有顯著抑制上述兩種癌細胞成長之活性，另有七 個天然化合物之結構則尚待進一步確認。

英文摘要:

In this year, our group has successfully isolated fifteen pure natural products. The molecular structures of eight newly isolated compounds have been fully established. Overall, seventy-eight natural products among which two metabolites possess new skeletons, including seventeen norditerpenoids, twenty-two diterpenoids, eight sesquitepenoids, nineteen steroids, an unsaturated fatty acid, three nucleosides, two β-cartenoids, a tyrosine-derived amide, two norsesquiterpenoids, two furanone derivatives and a p-vinylbenzyl alcohol have been isolated from various octocorals in the investigation for the past three years. In above metabolites, thirty-eight compounds were identified as new natural products by extensive spectroscopic and chemical methods, and several compounds were found to exhibit significant cytotoxicity toward NUGC-3 and HONE-1 tumor cells. In addition, the structures of the seven newly found metabolites are waiting for further confirmation.

Keywords : norditerpenoids, diterpenoids, β-cartenoids, norsesquiterpenoids, octocorals, cytotoxicity.

一、 前言 國科會「製藥與生物技術」國家型計畫所分出的天然與化學合成藥物組為了開發具 有臨床所用價值的抗癌與抗病毒之海洋天然藥物，通過從 89 年 8 月日起至 92 年 7 月 31 日止，以三年時間執行「海洋天然物開發研究」之整合型總計畫，結合國內海洋天然物 研究人力從事活性海洋天然物之萃取、純化和結構鑑定以及活性衍生物的製備，並與國 家衛生研究院生物技術與藥物研究組密切合作，進行藥物活性篩選，期能開發出有用的 抗癌或抗病毒海洋藥物。本計畫屬於該整合型計畫之子計畫，主要工作為探討軟珊瑚與 細菌所含具開發潛力的活性天然物。 二、 計畫目的。 本子計畫之目的是希望從臺灣海域軟珊瑚及海洋細菌中找到有用的抗癌、抗病毒天 然藥物，但因有關細菌分離、鑑種及培養之子計畫未獲通過，因此本計畫目前完全從事 軟珊瑚所含活性天然物的研究，期望能從臺灣海域生物量豐富及高多樣性的軟珊瑚中找 到國人自行開發之具有發展成有效抗癌、抗病毒藥物的海洋天然化合物或其他化學衍生 物。 三、 文獻探討 近三十年來的海洋天然物化學的研究得知各種固著性無脊椎動物如軟珊瑚、海綿及海 鞘等海洋生物均是海洋活性天然物的重要來源[1] ，如 cembranoids [2, 3, 4]、steroids [5]、 prostanoids [6]、dehydrodidemnin B [7]、dolastatin 10 [8]、ecteinascidin 743 [9, 10] 、 halichondrin B[11] 、isohomohalichondrin B [12] 、curacin [13] 、discodermolide [14] 、 eleutherobin [15]以及 sarcodictyin A [16]等等各類從海洋生物中所純化分離出的特殊構造的 天然化合物，在經過各種生物活性檢測及化學生態學的試驗均顯示這些天然化合物具有廣 泛的生物活性。 四、研究方法 1.本計畫所需軟珊瑚樣品將經由台大海洋研究所戴昌鳳教授負責採集，小量生物樣品先經 由初步萃取（以乙醇萃取），將粗萃取物即各種溶劑之分配得到各分配層混合物，送往 國家衛生研究院進行抑制癌細胞及抗病毒之初步研究， 2.分離純化原則上以矽膠充填管柱層析法進行，如有分離困難之狀況發生，則可以加上逆 向層析、HPLC、製備型 TLC….等有效分離方法加以克服。為了有效率地取得活性成分，

我們將依生物活性導引整個純化分離工作之進行，也就是說管柱層析法所得到之各初分 層（fraction）將先送測活性，有活性之 fractions 再進行進一步之純化分離，直到找 到具有活性的純天然化合物為止。 3.純化合物的結構鑑定將依正常之光譜分析方法，測定 UV，IR，MS（包括 HRMS），以及最 為重要的 NMR（1 H 及13 C）圖譜之測定。在測 NMR 圖譜時，要測1 H 及13 C（包括 DEPT）一 維圖譜，再輔以二維圖譜（1 H-1 H COSY，HMQC，HMBC，NOESY…..）進行分子骨架的連結 和立體化學的確定；若仍碰到困難，則可進行衍生物的製備與單晶培養，再以單晶 X-光繞射法來確定化合物的分子結構。 4.粗萃取物、各分層(fraction)及已純化之物質均送國家衛生研究院依其目前活性分析方 法進行對癌細胞（NUGC-3 等…）。 五、結果與討論 1. 在本計畫，我們共完成對 54 個軟珊瑚樣品進行萃取及不同溶劑之溶提，並對這些萃取 液及溶提層進行胃癌細胞(NUGC-3)，及鼻咽癌細胞(HONE-1)進行抑制活性之測試， 發現有25%之分層含有顯著細胞毒殺活性（如表一）依這些數据，我們同時也選擇了其

中的 Sinularia notanda 、S. granosa 、S. facile、S. gibberosa 、 S. leptoclados、Sinularia notanda、S. granosa 、S. facile、S. gibberosa、S. leptoclados、S. scabra、Sinlaria sp.、 S. nanolobata、S. parva、Lobophytum paucifloeum 、S. abrupta 與 Cladiella australis 的

粗萃取物做了進一步的層析分離，部份的萃取物層析分離層亦送往國家衛生研究院進 行細胞毒殺活性的試驗。

2. 本年度完成十五個化合物之純化分離，其中八個化合物 52-56、65 和 72-73.

3. 三年來共完成分離及結構鑑定之化合物：共分離並鑑定出七十八個天然化合物，其中三

十五個化合物是新的天然物。

Sinularia notanda : three cembranoids, 1-3 (Compound 1 is a new product). Sinularia granosa : six cembranoids, 2-6 . seven steroids 24 – 30.

Sinularia facile : four steroids 7– 10.

Sinularia gibberosa : seven steroids, 11 – 17. one tyrosine-derived amide , 18. eight

sesquiterpenoids, 19-26 . one necleoside, 27. and three diterpenoids, 28-30. (compound 12, 16, 23, 25 and 26 are new natural products).

Sinularia leptoclados : eight norditerpenoids, 31-40. (compounds, 31, 34-37 and 38 are new natural products).

-carotenoids, 46-47. (Compounds 31, 38 and 41-45 are new natural compounds)

Sinularia sp. : 一個不飽和脂肪酸 49.(new compound)

Sinularia nanolobata : two diterpenoids, 50-51. one norditerpenoid, 52. two norsesquiterpenoids 53-54. two furanone derivatives 55-56 (Compounds 50-56 are new natural compounds).

Sinularia parva : three cembranoids, 57-58.

Lobophytum paucifloeum : five diterpenoids, 59-63. one steroid, 64.(Compound 64 is

a new natural compound).

Cladiella australis : four diterpenoids, 65-68. two steroids, 69-70. two necleoside, 71-72. one p-vinylbenzyl alcohol, 73 (Compounds 65-69 and 70-73 are new natrual compounds).

Sinularia abrupta : four steroids, 74-78. (Compound 76 is a new compound).

4.上述七十八個已經純化並且確定其分子結構之化合物，部份已進行細胞毒殺活性檢 測，檢測的結果可發現有些 steroids 對 NUGC 及 HONE-1 癌細胞具有顯著的抑制效果， 在比較其細胞毒殺活性時發現在 9,11-secosteroids (7-9) 中 C-11 位置上接 hydroxy group 時之細胞毒殺活性較該位置接 acetoxy group 時為強。

5.Sinularia leptoclados 的天然物部份已由國外學者從同種珊瑚發現，本實驗室以較少量 的珊瑚研究即順利純化分離出不少新的化合物，且各種珊瑚中所含代謝物的多樣性及 分子結構複雜度，可證明由軟珊瑚中開發出新的藥用分子是很有潛力，可以此做為未 來開發新藥的基礎。

6.本實驗室於軟珊瑚 Sinularia scabra 目前分離純化出兩個結構接近β- carotenoids 的天然 物，依已往研究之結果β- carotenoids 一般具有抗癌或抗氧化的活性，本實驗室己發 現一個化合物具不錯之抗 KB cells 之活性。 7. 三年來的研究發現八十五個化合物，其中七十八個已確定結構，另外七個代謝物之結 構仍待確定，這些天然物具有相當高的結構多樣性，而且我們也已發現其中化合物 7， 9，14，15，17，58，61，在 20µg/mL 的濃度下對 HONE-1 及 NUGC-3 癌細胞具有非常好 的抑制活性；化合物 55 在 20µg/mL 的濃度下對 HONE-1 具有良好的抑制活性；化合物 32 及 33 則對 Hepa59T/VGH 及 KB 兩種癌細胞具有很好的抑制活性；而化合物 47 則對 KB 細胞具有良好的抑制活性。因次再三年的研究中我們共發現十一個具良好抗癌活性 之海洋天然化合物。

表一：不同軟珊瑚之酒精萃取物及各有機溶劑物質在 50µg/ml 濃度下對 NUGC、HONE-1 兩種 癌細胞之細胞毒殺活性 Ethanol 萃取物 Hexanol 分配物 CH2Cl2 分配物 n-Butanol 分配物 NUGC (%) HONE-1 (%) NUGC (%) HONE-1 (%) NUGC (%) HONE-1 (%) NUGC (%) HONE-1 (%) Junceella fragilisa 96 90 114 114 75 99 98 92 Sinularia leptocladosa 108 96 101 107 23 4 125 109 Sinularia gibberosaa 101 90 103 70 26 14 98 97 Sinularia nanolobatab 2 2 2 Sinularia gibberosab 2 0 -2 Sinularia gibberosab 51 55 50 Sinularia numerosab 95 59 43 Sinularia inelegansb 114 77 73 Sinularia parvab 65 86 63 Sinularia capillosab 63 53 57 Sinularia granosab 73 16 66 Sinularia pedunculatab 40 36 6 Sinularia crassab 5 10 1 Sinularia facileb -1 -3 -3 Sinularia compactab -1 2 -3 Sinularia firmab 84 81 83 Sinularia depressab 106 89 74 Sinularia gibberoac 88 32 88 70 19 58 88 32 Sinularia inelegansc 108 91 99 101 95 108 108 91 Lobophytum pauciflourmc 24 55 80 65 75 95 24 55 Lobophytum pauciflourmc 114 91 24 88 8 60 114 91 Sinularia halvasonc 118 87 87 8 10 13 118 87 Lobophytum pauciflourmc 116 89 0 78 57 62 116 89 Sinularia discrepensc 114 92 31 32 8 25 114 92 Sinularia ovispiculatac 116 92 16 50 7 14 116 92 Sinularia gransilobata c 100 92 17 75 7 25 100 92 Sinularia capillosac 109 92 46 18 74 85 109 92 Sinularia gibberoac 113 91 5 100 3 8 113 91 Sinularia leptocladosc 1 96 -1 -1 -1 0 1 96 Sinularia gibberoac 114 89 5 73 7 12 114 89 Sinularia gibberoac 114 89 1 103 12 74 114 89

Ethanol 萃取物 Hexanol 分配物 CH2Cl2 分配物 n-Butanol 分配物 NUGC (%) HONE-1 (%) NUGC (%) HONE-1 (%) NUGC (%) HONE-1 (%) NUGC (%) HONE-1 (%) Sinularia crassac 145 92 94 104 63 89 115 92 Sinularia notandac 115 89 1 120 12 17 112 89 Sinularia brassicac 109 91 30 93 9 11 109 91 Sinularia parvac 109 90 84 107 20 22 103 90 Sinularia leptocladosc -1 91 -1 -1 0 -1 114 91 Sinularia parvad 0 6 94 116 96 89 Sinularia triangulad 74 76 105 101 105 89 Discosoma sp.d 102 107 100 105 109 89 Sinularia scabrad 21 110 70 111 105 89 Clavularia viridisd 0 1 0 49 105 89 Sinularia nanolobatad 0 46 0 1 106 90 Sinularia inflatad 41 107 21 97 106 89 Cladiella australisd 6 67 2 20 54 97 Sinularia abruptae 105 99 2 102 79 114 107 97 Sinularia halvasonie 109 97 1 107 96 101 99 98 Sinularia ceramensis e 106 92 89 32 100 96 105 96 Sinularia cruciatae 107 96 38 94 103 102 110 97 Sarcophyton cinereume 105 91 101 104 108 98 108 98 Lobophytum pauciflorume 104 92 25 84 106 98 107 97 Sinularia lochmodese 94 81 111 107 95 106 97 Soft Coral-061901f 99 99 82 53 106 98 106 98 Soft Coral-061902f 102 95 97 94 97 95 98 96 Soft Coral-061904f 105 12 89 48 107 96 107 98 a：採樣日期 89 年 10 月 15 日 b：採樣日期 89 年 12 月 25 日 c：採樣日期 90 年 1 月 5 日 d：採樣日期 90 年 2 月 8 日 e：採樣日期 90 年 7 月 2 日 f：採樣日期 90 年 7 月 2 日 (尚未鑑種)

O O _O OAc H OH H OH H

Sinularia notanda

New

Organism

_Structure

_Identity

Cytotoxicity data

HONE-1 at 20µg/mL 105% NUGC-3 at 20µg/mL 30% HONE-1 at 20µg/mL 90% NUGC-3 at 20µg/mL 104% O O H O H O O H O H OH OH

S. granosa

O O OH H H O O _O O H OH H OH H

S. granosa

S. notanda

Known HONE-1 at 20µg/mL 110% NUGC-3 at 20µg/mL 115% O O H H AcO H O O Known HONE-1 at 20µg/mL 99% NUGC-3 at 20µg/mL 83% Known Known O Known HONE-1 at 20µg/mL 92% NUGC-3 at 20µg/mL 91% 1 2 3 4 5 6

S. facile

Known

Organism

_Structure

_Identity

Cytotoxicity data

HONE-1 at 20µg/mL 6% NUGC-3 at 20µg/mL 11%

S. gibberosa

HO O HO Known New HONE-1 at 20µg/mL 91% NUGC-3 at 20µg/mL 74% HO O Known HONE-1 at 20µg/mL 78% NUGC-3 at 20µg/mL 41% Hepa59T/VGH ED₅₀ 9.3 µg/mL KB ED₅₀ >20 µg/mL HO RO O H H H 7: R=H 8: R=Ac HO RO O H H H 9: R=H 10: R=Ac HONE-1 at 20µg/mL 101% NUGC-3 at 20µg/mL 107% HONE-1 at 20µg/mL 0% NUGC-3 at 20µg/mL 0% HONE-1 at 20µg/mL 32% NUGC-3 at 20µg/mL 65% P-388 ED₅₀ 2.93 µg/mL A-549 > 50 µg/mL HT-29 > 5.23 µg/mL P-388 ED₅₀ 0.43 µg/mL A-549 9.03 µg/mL HT-29 1.37 µg/mL P-388 ED₅₀ 3.00 µg/mL A-549 > 50 µg/mL HT-29 4.16 µg/mL 7 8 9 10 11 12 13

Known

Known

Organism

Identity

Cytotoxicity data

HONE-1 at 20µg/mL -1% NUGC-3 at 20µg/mL 6%

S. gibberosa

New HONE-1 at 20_{NUGC-3 at 20}µ_µg/mL 96%_{g/mL 55%}

Known HONE-1 at 20_{NUGC-3 at 20}µ_µg/mL 0%_{g/mL 2%} Hepa59T/VGH ED₅₀ 6.8 µg/mL KB ED50 13.2 µg/mL HO O O H HO O O HONE-1 at 20µg/mL 11% NUGC-3 at 20µg/mL 28% HO O OH OH Hepa59T/VGH ED50 10.0 µg/mL KB ED50 6.8 µg/mL HO OH OH OH Known HONE-1 at 20µg/mL 75% NUGC-3 at 20µg/mL 90% Hepa59T/VGH ED50 6.1µg/mL KB ED₅₀ 13.4 µg/mL N H O OH Known H 14 15 16 17 18 19

Organism

_Identity

Cytotoxicity data

S. gibberosa

New HONE-1 at 50µg/mL 116% NUGC-3 at 50µg/mL 108% Hepa59T/VGH ED₅₀ >20 µg/mL KB ED₅₀ >20 µg/mL H Known OH O O Known HONE-1 at 50µg/mL 110% NUGC-3 at 50µg/mL 100% Hepa59T/VGH ED₅₀ 8.2µg/mL KB ED₅₀ >20 µg/mL H O OH HO H OH H OH HONE-1 at 50µg/mL 92% NUGC-3 at 50µg/mL 81% Known OH HONE-1 at 50µg/mL 92% NUGC-3 at 50µg/mL 95% Known New New 20 21 22 23 24 25 26 \

New

Organism

_Identity

Cytotoxicity data

HONE-1 at 20µg/mL 107% NUGC-3 at 20µg/mL 113%

S. gibberosa

HONE-1 at 20µg/mL 121% NUGC-3 at 20µg/mL 108% Hepa59T/VGH ED₅₀ >20 µg/mL KB ED₅₀ 6.0 µg/mL Hepa59T/VGH ED₅₀ 12.6µg/mL KB ED₅₀ >20 µg/mL Known HONE-1 at 20µg/mL 117% NUGC-3 at 20µg/mL 111% Hepa59T/VGH ED₅₀ 6.8µg/mL KB ED₅₀ 9.3 µg/mL OH H H H OH OH OH OH OH Known 30 28 29 HN N H O O HONE-1 at 20µg/mL 121% NUGC-3 at 20µg/mL 108% Hepa59T/VGH ED₅₀ >20 µg/mL KB ED₅₀ >20 µg/mL Known 27

Organism

Identity

Cytotoxicity data

S. leptoclados

S. scabra

Structure

Known O H O O O O H H OH O H O O O O H HO H HONE-1 at 20 µg/mL 30% NUGC-3 at 20 µg/mL 32% Hepa59T/VGH ED50 2.6µg/mL KB ED50 2.5 µg/mL HONE-1 at 20 µg/mL 45% NUGC-3 at 20 µg/mL 55% Hepa59T/VGH ED₅₀ 2.4µg/mL KB ED₅₀ 2.3 µg/mL Known New O H O O O O H H _O HONE-1 at 20 µg/mL 101% NUGC-3 at 20 µg/mL 117% 31 32 33 O O O EtO O H OH H H O O O EtO O H H OH H New 34 New 35

S. leptoclados

Organism

Identity

Cytotoxicity data

S. leptoclados

Structure

O O H H H O HO H _O New

New HONE-1 at 20_{NUGC-3 at 20}µ_µg/mL 97%_{g/mL 117%}

S. leptoclados

S. scabra

New HONE-1 at 20µg/mL 100% NUGC-3 at 20µg/mL 104% O O H O O H H O H H H H Known HONE-1 at 20µg/mL 107% NUGC-3 at 20µg/mL 105% 36 37 38 39 O O O EtO O OH O H O O O O H H _O O O O O H OH H H O O H 3 New 40

S. leptoclados

Organism

Identity

Cytotoxicity data

S. scabra

HONE-1 at 20µg/mL 106% NUGC-3 at 20µg/mL 112%

Structure

O H O O O O O H H H O HO _H O H New O H New O H O O O O H New OMe H O H O O O O H OH H H _{O New} New O H O O O O H H OH 41 42 43 44 45

Organism Identity Cytotoxicity data S. scabra Structure HONE-1 at 20 µg/mL 123% NUGC-3 at 20 µg/mL 108% Hepa59T/VGH ED₅₀ 17.1 µg/mL KB ED50 >20 µg/mL O H O O COOMe O Known 46 HO AcO O _O O OH O O OH O H HO AcO H Known 47 48

Isolated for the first time from nature.

Sinularia sp. OH New S. nanolobata New OH H H O H H H O H OH O New 49 50 51 O OH Hepa59T/VGH ED₅₀ 4.9 µg/mL KB ED₅₀ 1.1 µg/mL

Organism

Structure

Identity

Cytotoxicity data

S. nanolobata

H O HO H H O O HO H H O O O _OAc OH H H O H O OAc New 52 New 53 New 54 55 56

Isolated for the first time from nature

Isolated for the first time from nature

HONE-1 at 4 µg/mL 104% NUGC-3 at 4 µg/mL 76% HONE-1 at 20 µg/mL -2% NUGC-3 at 20 µg/mL 75% HONE-1 at 4 µg/mL 88% NUGC-3 at 4 µg/mL 93% HONE-1 at 20 µg/mL 96% NUGC-3 at 20 µg/mL 95% HONE-1 at 4 µg/mL 96% NUGC-3 at 4 µg/mL 96% HONE-1 at 20 µg/mL 101% NUGC-3 at 20 µg/mL 98%

Organism Identity Cytotoxicity data Lobophytum pauciflorum Structure OH O OH OMe HONE-1 at 4 µg/mL 103% NUGC-3 at 4 µg/mL 104% HONE-1 at 20µg/mL 116% NUGC-3 at 20µg/mL 61% HONE-1 at 4 µg/mL 110% NUGC-3 at 4 µg/mL 102% HONE-1 at 20µg/mL 3% NUGC-3 at 20µg/mL 0% HONE-1 at 4 µg/mL 101% NUGC-3 at 4µg/mL 105% Known Known Known 59 60 61 Known S. parva O H O H 57 O O O OAc H H Known 58 HONE-1 at 20µg/mL 97% NUGC-3 at 20µg/mL 54% HONE-1 at 4 µg/mL 107% NUGC-3 at 4 µg/mL 116% HONE-1 at 20 µg/mL 113% NUGC-3 at 20 µg/mL 94% HONE-1 at 20 µg/mL 1% NUGC-3 at 20 µg/mL 6% HONE-1 at 4 µg/mL 103% NUGC-3 at 4 µg/mL 92%

Organism

Identity

Cytotoxicity data

Lobophytum pauciflorum

Structure

Known OH OH OH OH Known 62 63 OAc HO OH O HO H H H H New 65 New 64 New 66 HONE-1 at 20 µg/mL 106% NUGC-3 at 20 µg/mL 101% HONE-1 at 20µg/mL 116% NUGC-3 at 20µg/mL 108% HONE-1 at 20µg/mL 104% NUGC-3 at 20µg/mL 111% HONE-1 at 4µg/mL 101% NUGC-3 at 4µg/mL 104% HONE-1 at 4µg/mL 108% NUGC-3 at 4µg/mL 102%

Cladiella australis

OAc OH OH H O H O OAc H₃CH₂CH₂CCO H OH O OH O MCF 7 at 20 µg/mL 111% NCI-H460 at 20 µg/mL 103% SF-268 at 20 µg/mL 125% MCF 7 at 4 µg/mL 106% NCI-H460 at 4 µg/mL 103% SF-268 at 4 µg/mL 109% MCF 7 at 20 µg/mL 103% NCI-H460 at 20 µg/mL 95% SF-268 at 20 µg/mL 125% MCF 7 at 4 µg/mL 101% NCI-H460 at 4 µg/mL 98% SF-268 at 4 µg/mL 104%

Organism

_Structure

Identity

Cytotoxicity data

Cladiella australis

70 New 67 OAc H _OCCH 2CH2CH3 O HO H OH O OH H OCCH₂CH₂CH₃ O OH O New 68 HOOC HO Known 69 HOOC AcO HN N O CH₃ O O OH AcO ₇₁

Isolated for the first time from nature

MCF 7 at 20 µg/mL 124% NCI-H460 at 20 µg/mL 107% SF-268 at 20 µg/mL 130% MCF 7 at 4 µg/mL 108% NCI-H460 at 4 µg/mL 96% SF-268 at 4 µg/mL 102% MCF 7 at 20 µg/mL 121% NCI-H460 at 20 µg/mL 96% SF-268 at 20 µg/mL 127% MCF 7 at 4 µg/mL 111% NCI-H460 at 4 µg/mL 100% SF-268 at 4 µg/mL 127% MCF 7 at 20 µg/mL 95% NCI-H460 at 20 µg/mL 119% SF-268 at 20 µg/mL 114% MCF 7 at 4 µg/mL 112% NCI-H460 at 4 µg/mL 128% SF-268 at 4 µg/mL 101% MCF 7 at 20 µg/mL 102% NCI-H460 at 20 µg/mL 90% SF-268 at 20 µg/mL 109% MCF 7 at 4 µg/mL 102% NCI-H460 at 4 µg/mL 107% SF-268 at 4 µg/mL 104% New MCF 7 at 20 µg/mL 113% NCI-H460 at 20 µg/mL 95% SF-268 at 20 µg/mL 101% MCF 7 at 4 µg/mL 112% NCI-H460 at 4 µg/mL 111% SF-268 at 4 µg/mL 112%

Organism

Structure

Identity

Cytotoxicity data

74 Known

S. abruta

HO OH HO HO OH AcO HO OH AcO 75 Known 76 New HONE-1 at 4 µg/mL 99% NUGC-3 at 4 µg/mL 106% HONE-1 at 20 µg/mL 117% NUGC-3 at 20 µg/mL 108% HONE-1 at 4 µg/mL 104% NUGC-3 at 4 µg/mL 110% HONE-1 at 20 µg/mL 104% NUGC-3 at 20 µg/mL 75% HONE-1 at 4 µg/mL 103% NUGC-3 at 4 µg/mL 107% HONE-1 at 20 µg/mL 33% NUGC-3 at 20 µg/mL 22% HN N O CH3 O O OAc HO 72 OH 73

Cladiella australis

Isolated for the first time from nature

MCF 7 at 20 µg/mL 112% NCI-H460 at 20 µg/mL 95% SF-268 at 20 µg/mL 104% MCF 7 at 4 µg/mL 109% NCI-H460 at 4 µg/mL 106% SF-268 at 4 µg/mL 108% MCF 7 at 20 µg/mL 132% NCI-H460 at 20 µg/mL 101% SF-268 at 20 µg/mL 122% MCF 7 at 4 µg/mL 113% NCI-H460 at 4 µg/mL 100% SF-268 at 4 µg/mL 115%

HO OH HO HONE-1 at 4 µg/mL 98% NUGC-3 at 4 µg/mL 102% HONE-1 at 20 µg/mL 95% NUGC-3 at 20 µg/mL 94% 77 Known

S. abruta

Organism

Structure

Identity

Cytotoxicity data

HO OH HO HONE-1 at 4 µg/mL 81% NUGC-3 at 4 µg/mL 98% HONE-1 at 20 µg/mL 6% NUGC-3 at 20 µg/mL 99% 78 Known

六、參考文獻

1. Faulkner, D. J. Nat. Prod. Rep. 2002, 19, 1-48 and previous reports in this series

2. Uchio, Y.; Eguchi, S.; Kuramoto, J.; Nakayama, M.; Hase, T. Tetrahedron Lett. 1985, 26, 4487. 3. Mori, K.; Suzuki, S.; Iguchi, K.; Yamada, Y. Chem. Lett. 1983, 1515.

4.Weiheimer, A. J.; Maston, J. A.; Hossain, M. B.; Van der Helm, D. Tetrahedron Lett. 1977, 2923. 5. Kobayashi, M.; Lee, N.-K.; Son, B.-W.; Yanagi, K.; Kyogoku, Y.; Kitagawa, I. Tetrahedron Lett.

1984, 25, 5925.

6. Kitagawa, I.; Kobayashi, M.; Yasuzawa, T.; Son, B.-W.; Yoshihara, M. Tetrahedron 1985, 41, 995.

7. Sakai, R.; Rinehart, K. L.; Kishore, V.; Kundu, B.; Faircloth, G.; Gloer, J. B.; Carney, J. R.; Namikoshi, M.; Sun, F.; Hughes Jr, R. G.; Grávalos, D. G.; De Quesada, T. G.; Wilson, G. R.; Heid, R. M. J. Med. Chem. 1996, 39, 2819.

8. Pettit, G. R.; Kamano, Y.; Herald, C. L.; Tuinman, A. A.; Boettner, F. E.; Kizu, H.; Schmidt, J. M.; Baczynskyj, L.; Tomer, K. B.; Bontems, R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 6883.

9. Wright, A. E.; Forleo, D. A.; Gunawardana, G. P.; Gunasekera, S. P.; Koehn, F. E.; McConnell, O. J. J. Org. Chem. 1990, 55, 4508.

10. Rinehart, K. L.; Holt, T. G.; Fregeau, N. L.; Stroh, J. G.; Kiefer, P. A.; Sun, F.; Li, L. H.; Martin, D. G. J. Org. Chem. 1990, 55, 4512.

11. Hirata, Y.; Uemura, D. Pure Appl. Chem. 1986, 58, 701.

12. Litaudon, M.; Hart, J. B.; Blunt, J. W.; Lake, R. J.; Munro, M. H. G. Tetrahedron Lett. 1994, 35, 9435.

13. Gerwick, W. H.; Proteau, P. J.; Nagle, d. G.; Hamel, E.; Blokhin, A.; Slate, D. L. J. Org. Chem.

1994, 59, 1243.

14. Gunasekera, S. P.; Gunasekera, M.; Longley, R. E.; Schulte, G. K. J. Org. Chem. 1990, 55, 4912. 15. Lindel, T.; Jensen, P. R.; Fenical, W.; Long, B. H.; Casazza, A. M.; Carboni, J.; Fairchild, C. R. J.

AM. Chem. Soc. 1997, 119, 8744.

七、計畫成果自評: 本計畫原預計要純化分離出三十個以上天然化合物，並確定結構及送抗癌活性測 試。而在三年的研究期間，我們已純化分離出七十八個天然化合物，另有七個純化合物 結構尚待鑑定；同時，有五十八個已確定結構之天然物因分離到的量較多，故也分別做 了一些抑制癌細胞活性之測試，其中有十一個具有不錯的抗癌活性。因此，計畫成果自 評為符合預期，執行成效良好。