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利用高通量影像篩選平台進行新穎的神經保護劑開發

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Academic year: 2021

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(1)

國立成功大學「邁向頂尖大學計畫」

  延攬優秀人才工作報告表

NCKU’s “Aim for the Top University Project”

Work Report Form for Distinguished Scholars

□續聘

continuation of employment

■離職

resignation

100 年 7 月 13 日更新

受聘者姓名

Name of the Employee 李美逸 男 ■女

Male Female

聘 期 Period of Employment

from 102 年(y) 4 月(m) 1 日(d) to 102 年(y) 6 月(m) 30 日(d) 研究或教學或科技研發與

管理計畫名稱 The project title of research,

teaching, technology development and management

從訊息傳遞研究腫瘤病毒致病機轉

(傳染性疾病及訊息研究中心) 計畫主持人

(申請單位主管)

Project Investigator (Head of Department/Center)

賴明德

補助延聘編號

Grant Number

HUA - - -

一、 研究、教學、科技研發與管理工作全程經過概述。(由受聘人填寫)

Please summarize the entire research, teaching, or science and technology R&D and management work process (To be completed by the employee)

本人於本研究計畫中的主要工作內容有:實驗設計、計畫執行、實驗結果整理及數據分析、論文撰寫及 投稿至專業期刊,並協助實驗室主持人指導培育研究生,協助成大醫學院與醫院光學影像核心實驗 室高階影像系統之推廣使用。以下分點就各個工作內容進行概述。

1. 研究: 由於化學式療的癌症病人常苦於中樞及周邊神經病變,造成病人生活品質受影響,甚者更導致 化療療程中止。為了探討常見化療藥物所造成的神經毒性,本人與沈孟儒教授團隊著手發展以顯微影 像為基礎的高通量/高內涵篩選之平台,想要利用此平台來建立各種常見的化療藥物所導致之神經毒 性,並更進一步搭配小分子藥物之大規模篩選,期望進一步找到有潛力之新穎神經保護劑藥物。首 先,我們利用剛出生第零天的小鼠,犧牲取腦作腦神經細胞之初代培養,培養於 96 微孔盤中培養合 適天數,搭配 microtubule-associated protein 2 (MAP2)、synaptophysin I 及 Hoechst 三重染色,染色分別 顯示神經細胞本體與 neurites、前突觸蛋白、及細胞核。利用自動拍照的螢光顯微鏡,拍取大量的螢光 細胞圖檔,再佐以合宜的分析參數,利用軟體程式來自動分析計數初代混雜細胞群中的神經細胞數,

神經主支幹數目、主支幹長度、所有 neurite 總長度、分支 branch 的數目,以及前突觸蛋白染色點之數 量,再配合結果運算分析與統計計算以得到量化數據。神經細胞體外的天數時間測試結果為:體外培養 十天的神經細胞,相較於七天、十四天、二十一天而言,保有最多的神經細胞數,最大量的前突觸蛋 白表現,以及僅次於第十四天的最佳 neurite 生長條件,因此我們選用第十天的神經細胞來檢測評估 化療藥物對於神經細胞的傷害程度,作不同濃度的藥物對於上述所述之參數進行量化檢測。已針對破 壞 microtubule 動態平衡的抗癌藥物,vincristine 以及 paclitaxel 為例,選以不同濃度的藥物處理體外十 天 培 養 的 初 級 神 經 細 胞 24 小 時 , 發 現 vincristine 與 paclitaxel 的 確 會 對 neuron viability 、 neurite outgrowth、synaptogenesis 有顯著影響,並有著獨特性的影響程度。對於不同參數,作圖表示藥物對於 神經細胞之各方面傷害,此 concentration-response curve 對於藥物的神經毒性提供了詳盡的敘述,也 驗證了本研究建立的顯微影像自動拍照分析平台的大量篩選之可行性。本人與沈孟儒教授已合力完成 此文章初稿,待進一步擴大驗證。

2. 教學: 協助實驗室主持人指導培育實驗室一位博士班學生與三位碩士班學生。協助藥理所碩士班學妹 的於 lab meeting 的 paper report 以及藥理所的 seminar 的口頭報告,加強訓練其科學性文字與口語的表 達;並定期與主持人、研究生、研究助理開會討論研究進度及指導研究方向,對碩博班研究生的研究 整體方向與實驗細節給予實質建議與幫助,對研究團隊的人才培育養成有實質貢獻。

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3. 科技研發: 協助影像為主的高通量篩選技術平台的建立。利用 mouse cortical neuron 的 primary culture,

於體外環境培養,佐以合適的免疫螢光抗體染色以及最佳化的軟體分析參數,並建立螢光影像的自動 拍照與分析平台。搭配常見化療藥物處理,已建立化療藥物所造成之細胞神經毒性 profiles。目前以搭 配大規模藥物庫篩選,已找到有潛力之神經保護劑,目前利用已建立的小鼠神經傷害模式,研究神經 保護劑可能的神經保護機轉。

4. 管理工作: 協助實驗室的公用儀器管理,協調管理實驗室公用事務運作。協助成大醫學院的光學影像 核心實驗室運作,幫忙推廣 confocal microscope 的使用服務,帶領新使用者的一對一教學與儀器認 證;以及協助成大醫院的光學核心實驗室進行 high-content screening microscope 的儀器使用教學認證。

二、

研究或教學或科技研發與管理成效評估(

由計畫主持人或單位主管填寫

Please evaluate the performance of research, teaching or science and technology R&D and management Work: ( To be completed by Project Investigator or Head of Department/Center)

(1)是否達到延攬預期目標?

Has the expected goal of recruitment been achieved?

李美逸博士具備有細胞生物學、分子生物學、動物實驗之相關技術與經驗,並對高階生物醫學影像分析、

癌症生物學、病毒學及臨床檢體分析有所專長,具有高度的研究潛力與能力。對於本研究計畫之進行有莫 大助益,此符合原本延攬研究人才之預期目標。

(2)研究或教學或科技研發與管理的方法、專業知識及進度如何?

What are the methods, professional knowledge, and progress of the research, teaching, or R&D and management work?

李博士對於研究計畫認真負責,過往受聘一年十一個月內,已有一篇研究論文發表於 Molecular Pharmacology,一篇回顧性文章發表於 American Journal of Translational Research,另外有一篇關於建立高 通量影像分析之文章正在準備中,對高通量影像分析工作平台評估神經傷害毒性之科技研發提供科學方 法。此外,李博士對於本實驗室的研究風氣有重要表率及提升效果,其定期參與同儕間與跨領域的學術研 究討論。此外,李博士於今年一月協助撰寫國家型生技製藥計劃構想書,幫助研究團隊申請計劃,對研究 團隊的研究架構想法以及經費申請有所貢獻。

(3)受延攬人之研究或教學或科技研發與管理成果對該計畫(或貴單位)助益如何?

How have the research, teaching, or R&D and management results of the employed person given benefit to the project (or your unit)?

李博士與本申請人的論文發表成果,對於頂尖中心的研究發表能量有所貢獻;李博士熱心積極分享其對 於先進光學影像之專才,持續提供成大醫學院光學影像核心實驗室與成大醫院高通量顯微影像系統的認 證指導服務。

(4)受延攬人於補助期間對貴單位或國內相關學術科技領域助益如何?

How has the employed person, during his or her term of employment, benefited your unit or the relevant domestic academic field?

李博士與本申請人已建立一個有效且快速的高通量影像篩選平台,提供一個藥物快速篩選的有效工具。此 外,目前小鼠動物行為模式也已經建立,以驗證神經傷害與保護機轉之活體研究模式。

(5)具體工作績效或研究或教學或科技研發與管理成果:

Please describe the specific work performance, or the results of research, teaching, or R&D and management work:

李美逸博士於過往受聘的一年十一個月內,有研究論文發表於 Molecular Pharmacology,以及回顧性論文 發表於 American Journal of Translational Research,目前也有一篇研究論文初步大致完成,待更完整的動 物實驗加以驗證後即可發表。對於本研究團隊以及

傳染性疾病

及訊息研究中心整個團隊的研究能量,有 具體貢獻。

(6)

是否續聘受聘人 ?

Will you continue hiring the employed person?

□續聘

Yes

■不續聘

No

※此報告表篇幅以三~四頁為原則。This report form should be limited to 3-4 pages in principle.

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※此表格可上延攬優秀人才成果報告繳交說明網頁下載。

This report form can be downloaded in http://scholar.lib.ncku.edu.tw/explain/

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參考文獻

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