「奈米國家型科技計畫」研究成果紀錄
限本計畫成果，敬請確實填寫
計畫主持人：葉晨聖
執行機關：國立成功大學化學系
計畫名稱：利用智慧型標定式奈米球體攜帶人造核酸脢暨藥物並發展微機電光學檢測系統以開創癌症治療之新平台
計畫全程期限：2006/8/1~2009/7/31
填表日期：97 年 5 月 23 日
績效指標
初級產出
2008
國外 包含 SCI 篇數 SCI 篇數 9 期刊論文（篇數） 國內 國外 會議論文（篇數） 國內 研究報告（數量） 主辦學術活動（次數）學術成就
形成教材（名稱及件數） （製作教材、CD 或自由軟體授權釋出教材） 國外 國外 專利【數量（案/件），請將清單列於表三】 申請 國內 獲得 國內 技術報告（數量） 技術活動（研討會）/次數 可移轉技術（項數、家數、金額） 國外 國內 先期技轉（項數、家數、金額） 國外 國內 釋出軟體執行檔、自由軟體授權（項數、家數） 技術移轉 引進技術（名稱、來源、金額） 技術服務（項數、家數、金額） 接受委託案（件數、金額）技術創新
技術服務 工業服務（家數、金額）績效指標
初級產出
2008
規範/標準制訂【參與制訂政府或產業技術規範/標準（件數）】 促成廠商投資【研發投資（家數、金額）】 創新產業或模式建立【衍生公司（家數/名稱）】 協助提升我國產業全球地位(相關產業產品世界排名或世界佔有率) 輔導廠商、品質保證、技術標準認證 （件數、家數、配合款） 共通/檢測 技術服務 申請與執行主導性新產品及關鍵性零組件 （件數、家數、配合款）經濟效益
增加就業（人數） 儀器名稱核心設施
使用之核心設施 使用次數與時數（請註明） K-12 種子教師培訓（人數） 博士後 2 碩士生 3 助理 3 研究人才培育（人數/年，請將清單列於表二 ） 博士生 7 大學生 產業奈米技術人才培育（人數） 奈米課程人才訓練（人數） 教育宣導人才培育
社會教育
資訊服務（設立網站、提供客服）績效指標
初級產出
2008
國際能見度
國際研討會參與時間/參與形式（□一般論文發表【國際研討會名稱/主辦國家/機構/會議舉辦人、□專題演講 人、□擔任與談人 人、□其他）/本計畫人員參與人數/是否有 博碩士生參與（□有 人/□無）】
1. Chen YL, Zhang JB, Yeh CS, Hsieh WY, Shieh DB*. Construction of Single-domain Antibody- nanoparticle Complex Library System for MRImaging of Cancers. 86th General Session & Exhibition of the IADR, Toronto, Canada, 2008 Jul.(2008 IADR Diagnostic
Sciences Group Student Award)
2. Tsai TL, Chuang KS , Hwu JR, Yeh CS, Su WC, Shieh
DB*. Modification of warhead with triplex-forming
oligonucleotide (TFO) functionalized gold nanoparticles for STAT3 gene clervage.
IIAS 2008 / NSC-NSF SBE&S Workshop, NCKU, Tainan, Taiwan, 2008 Feb. (the Best Poster Presentation Award)
3. Wu PC, Tsai TL, Cheng FY , Yeh CS, Shieh DB*. An alternative drug carrier of based Iron Oxide nanoparticles for cancer therapy. IIAS 2008 / NSC-NSF SBE&S Workshop, NCKU, Tainan, Taiwan, 2008 Feb.
4. Chen YL, Zhang JB, Yeh CS, Hsieh WY, Shieh DB*. Construction of Single-domain Antibody- nanoparticle Complex Library System for MRImaging of Cancers. IIAS 2008 / NSC-NSF SBE&S Workshop, NCKU, Tainan, Taiwan, 2008 Feb.
Shieh DB. Translational Nanomedicine –potential in-cell
surgery and theranostics. Partnership for International Research, Innovation and Development, University of Ottawa-Taiwan International Workshop on Nanotechnology. Ottawa, Canada, 2008 Mar. ( Invited speaker)
績效指標
初級產出
2008
國際合作執行【合作國家單位/開始時間/雙方參與人數/合作 形式（□共同研究、□人員互訪、□研討會舉辦、□技術移 轉、□其他）】 NSC-ITRI-NRC 三邊合作計畫(2006.01-2008.07) 1. 共同研究: 與加拿大 NRC 合作 nanobody conjugate iron oxide 及 quantum dot nanoparticles for bioimaging and therapy.2. 人員互訪: 今年接待 Dr. Jianbing Zhang 至成大交流 參訪。並已送一名博士生與一名博後人員赴加國 NRC 培訓並進行合作計畫。擬七月初再組團並攜一 碩士生參訪 NRC。
3. 研討會舉辦: Partnership for International Research, Innovation and Development, University of Ottawa-Taiwan International Workshop on Nanotechnology. Ottawa, Canada, 2008 Mar.
技術移轉: 與 NRC 學者合提模組式奈米粒子設計之專
利。並接受加國單域抗體技術操作訓練。
國際獎項獲得【獲得國外獎項名稱/授獎單位/獲獎時間】 1. 2008 年 IIAS 暨 NSC-NSF SBE&S Workshop 論文海
報競賽第一名(蔡宗霖，基醫所)
2008 年 86th General Session & Exhibition of the IADR (International Association for Dental Research), Toronto, Canada, 2008 Jul. 2008 IADR Diagnostic
表一、論文發表清單
「請註明作者中文姓名，選定期刊資料庫類別(SCI、SSCI、EI…)後請填寫 impact factor，「屬性」請填國內或國外期刊論文、國內或國外研討會論文。」
No. 論文名稱 作者 期刊(年份) 卷數/期數/頁次 SSCI SCI EI 屬性
1
Stabilizer-free poly(lactide-co-glycolide) nanoparticles for multimodal
biomedical probes Chang FY （ 鄭 豐 裕 ） , Wang SPH, Su CH（蘇家 豪）, Tsai TL（蔡宗霖）, Wu PC（吳炳慶）, Shieh DB（謝達斌）, Chen JH （陳志宏）, Hsieh PCH （謝清河）, Yeh CS（葉 晨聖）. Biomaterials (2008) 29 / 2104-2112. IF:5.196 國外期刊論文 2
A New Photothermal Therapeutic Agent: Core-Free Nanostructured
AuxAg1-x Dendrites Hu KW(胡國威), Huang CC(黃志嘉), Hwu JR（胡 紀如）,Su WC（蘇五洲）, Shieh DB（謝達斌）, Yeh CS（葉晨聖） Chem. Eur. J (2008) 14 / 2956-2964 IF:5.015 國外期刊論文 3
The Gd2O(CO3)2‧H2O Particles and their Corresponding Gd2O3: Preparation and Applications of MR
Contrast Agents and Template Particles for Hollow Spheres and
Hybrid Composites Li, I. F.(李宜芳); Su, C. H. (蘇家豪);Sheu, H. S. (許火順);Chiu, H. C. (邱 惠琪); Lo, Y. W.(羅翊 瑋); Lin, W.T.(林韋亭); Chen, J. H.( 陳 志 宏 ); Yeh, C. S. (葉晨聖) Adv. Funct. Mater. (2008) 18 / 766–776 IF:6.779 國外期刊論文
4
Superparamagnetic Hollow and Paramagnetic Porous Gd2O3
Particles
Huang, C. C.( 黃 志 嘉 ); Liu, T. Y.(劉子瑜); Su, C. H.(蘇家豪); Lo(羅翊瑋), Y. W. (羅翊瑋); Chen, J. H.(陳志宏); Yeh, C. S(葉 晨聖) Chem. Mater. (2008) Accepted IF: 5.104 國外期刊論文 5
Synthesis of Hexagonal Gold Nanoparticles Using a Microfluidic
Reaction System Weng, C. H.( 翁 政 勳 ); Huang, C. C.( 黃 志 嘉 ); Yeh, C.S. (葉晨聖); Lei, H. Y.(黎煥耀); Lee, G. B.(李國賓) J. Micromech. Microeng (2008) Accepted IF:2.321 國外期刊論文 6
Facile Preparation of Self-assembled Hydrogel-like GdPO4·H2O Nanorods Huang, C. C.( 黃 志 嘉 ); Lo, Y. W.(羅翊瑋); Kuo, W. S.(郭文碩); Hwu, J. R.(胡紀如); Su, W. C.(蘇 五洲); Shieh, D. B.(謝達 斌); Yeh, C. S. (葉晨聖) Langmuir (2008) Accepted IF:3.902 國外期刊論文 7 Novel arylhydrazone-conjugated gold nanoparticles with DNA-Cleaving ability: The first
DNA-Nicking nanomaterial Hsu MH, Josephrajan T, Yeh CS（葉晨聖）, Shieh DB（謝達斌）, Su WC （蘇五洲）, Hwu JR（胡 紀如）. Bioconjugate Chemistry, ( 2007 Nov-Dec). 18 (6): 1709-1712 IF:3.823 國外期刊論文
表二、人才培育清單 「人才清單中，「碩士/博士」請以勾選方式填報，「屬性」請填培育或培訓，培育定義為長期參與此計畫，培訓定義為短期參加課程訓練。」 No. 姓名 學校 系所 碩士 博士 屬性 1 郭文碩 國立成功大學 化學系 培育 2 吳炳慶 國立成功大學 基礎醫學研究所 培育 3 蔡宗霖 國立成功大學 基礎醫學研究所 培育 4 陳逸臨 國立成功大學 口腔醫學研究所 培育 5 張佑民 國立成功大學 口腔醫學研究所 培育 6 蕭宇宏 國立成功大學 口腔醫學研究所 培育 7 莊高樹 國立清華大學 化學系 培育 8 林書玉 國立清華大學 化學系 培育 9 黃文傑 國立清華大學 化學系 培育 10 蘇文彬 國立成功大學 臨醫所 培育 表三、專利獲得清單(含申請中案件) 「專利清單中，「核准與否」請填申請中或已核准，未正確填寫將無法計算。」 No. 專利名稱 申請人 申請日期 專利申請國 法律事務所 獲得專利年度 申覆紀錄 專利申請案號 核准與否 備註 1 鐵/金核殼型複合奈米 粒子於治療腫瘤之 用途, 2008/04/01~2025/01 /12. 陳東煌, 謝達斌, 施宣宇, 連昭晴, 吳昭良, 葉晨聖, 周辰熹 中華民國 萬國法律事務所 2008 發明第 I 295177 號 核准
2 建立快速配對合成之模 組式設計功能性奈米粒 子庫之方法暨生物醫學 應用 Establishment of efficient fabrication system for
modular Designed targeting Nanoparticle Library and its biomedical
applications 吳炳慶, 謝達斌, 鄭豐裕, 葉晨聖, Jianbing Zhang 96/10/19 中華民國 萬國法律事務所 申請中 3 以模組化設計標之奈米 粒子之設計製作以及其 在分子影像暨治療之應 用 Modular Designed Nanoparticles for molecular imaging and
therapeutic 吳炳慶, 謝達斌, 鄭豐裕, 葉晨聖 96/10/19 中華民國 萬國法律事務所 申請中 表四、技術移轉清單 繳庫金額(單位：元) 產出 年度 技術移轉項目 移轉 年度 廠商名稱 先期技術授權金 技術移轉授權金 合計 現況說明
表五、促進民間投資清單(含技術移轉、產學合作等) 產出 年度 技術移轉、關鍵技術、 產品、產學合作名稱 移轉 年度 廠商名稱 廠商投入金額(元) 此計畫投入經費(元) 現況說明 備註 表六、產學研合作列表 表七、國際合作 計畫名稱 技術移轉、關鍵技 術、產品項目 合作單位名稱 年度金額（仟元） 總金額 （仟元） 現況說明 備註
Molecular Imaging for Cancer Diagnostics: Nanobodies meet Nanoparticles. 癌細胞之分子造影：奈 米子與奈米粒子之整合 研究 與 NRC 學者合提 模組式奈米粒子 設計之專利。並 接受加國單域抗 體技術操作訓 練。 (NSC-ITRI-NRC 三邊合作計畫) (2006.01-2008.07) 4,255.5 12,766.5 1. 參與國科會 2007 台灣與加拿大科技創新合作週 之活動及安排成大與南科參訪演講系列活動。 2. 在 共 同 研 究 方 面 ， 雙 方 合 作 開 發 nanobody
conjugate iron oxide 及 quantum dot nanoparticles 之相關技術並進行 in vitro 與 in vivo 之各項 bioimaging and therapy 之驗 證改良。
3. 在人員互訪方面，今年 11 月間，本團隊負責接 待 Dr. Arthur Carty 與 Dr. Dennis Whitfield 至成大與南科之交流參訪活動。並已派送一名博 士生與一名博後人員赴加國 NRC 培訓奈米粒子 合成技術與單域抗體操作技術，並落實合作計畫 內容。 年度 推動計畫名稱 計畫投入經費 （仟元） 執行單位名稱 計畫主持人 合作廠商/研究單位/學 術單位名稱 廠商/研究單位/學術單位連 絡窗口名稱 (姓名、電話、職稱) 合作單位投入金額 備註
表八、奈米國家型計畫所培育博碩士就業情形 「碩士/博士」以勾選方式填報，為了解主持人及共同主持人培育博碩士情形，請於備註欄註明。請務必填寫此表。 姓名 學校 系所 碩士 博士 就業單位/職稱 聯絡方式（電話、E-mail) 備註 （請註明主持人或共同主持 人姓名） 施宣宇 國立成功大學 口醫所 國衛院/ 研究助理 0919-114104 謝達斌（共同主持人） 吳亞娜 國立成功大學 分醫所 成功大學/ 研究助理 0911-811173; email: [email protected] 謝達斌（共同主持人） 張千蕙 國立成功大學 口醫所 中研院/ 研究助理 0928-333892; [email protected] 謝達斌（共同主持人）
奈米國家型科技計畫研究重要成果表
（以下資料請中、英文並呈）
1. 計畫背景：
計畫主持人及共同主持人（PI and Co-PIs）： 計畫主持人--葉晨聖教授
共同主持人--謝達斌副教授、胡紀如教授、蘇五洲教授、曾永華教授 PI: Prof. Chen-Sheng Yeh
Co-PIs: Associate Prof. Dar-Bin Shieh，Prof. Jih-Ru Hwu，Prof. Wu-Chou Su，Prof. Yonhua Tzeng
研究題目（Project Title）：
利用智慧型標定式奈米球體攜帶人造核酸脢暨藥物並發展微機電光學檢測系統以開創癌症 治療之新平台
Novel anti-cancer platform with integrated smart targeting nanospheres carrying artificial nuclease and drugs and advanced optical detection system
主持人執行機構（Organization）：國立成功大學化學系,Dept. of Chemistry, National Cheng Kung University
全程計畫執行期限（Project period）：2006/8/1~2009/7/31 分年經費（Budget per year）：2006 year $9,375,000
2007 year $7,500,000 2008 year $5,625,000
2. 計畫目標：
(1) 設計並合成智慧型標定式奈米球體 (2) 篩檢並建立癌細胞抗藥性 profile 及模型殖株及動物模型 (3) 設計人造核酸脢暨新穎抗癌藥物並二者之結合 (4) 發展微機電光學檢測系統以開發癌症治療平台之快速篩檢 (a) Design and synthesis of smart targeting nanospheres(b) Screen and establish drug resistance cancer cell lines and resistance profile as well as animal model systems
(c) Design of artificial nuclease and novel anti-cancer drug and evaluate for their potential synergistic effect.
3. 參與計畫單位及人數：
國立成功大學化學系: 4 人,(主持人,1 助理,1 博士生,1 博後) 國立成功大學口醫所: 7 人, (共同主持人, 1 助理及 2 博 3 碩士生) 國立成功大學內科學科: 3 人,(共同主持人, 1 助理,1 博士生) 國立清華大學化學系: 5 人(共同主持人，1 博後，3 博士生)4. 限本奈米國家型計畫產生之研究成果統計表
篇數 統計類別2005
2006
2007
2008
國外期刊論文 N/A* 7 7 6國內期刊論文 N/A* N/A* N/A* N/A
5. 請列出最具代表性之論文或專利
至多 6 篇
：
(1) Cheng, F. Y.; Saprina Wang, P. H.; Su, C. H.; Tsai, T. L.; Wu, P. C.; Shieh, D. B.; Chen, J. H.; Patrick Hsieh, C. H.; Yeh, C. S., "Stabilizer-free poly(lactide-co-glycolide) nanoparticles for multimodal biomedical probes", Biomaterials 2008, 29, 2104-2112. (IF:5.196)
(2) Hu, K. W.; Huang, C. C.; Hwu, J. R.; Su, W. C.; Shieh, D. B.; Yeh, C. S., "A New Photothermal Therapeutic Agent: Core-Free Nanostructured AuxAg1-x Dendrites", Chem.
Eur. J. 2008, 14, 2956-2964. (IF:5.015) (selected as frontispiece picture)
(3) Li, I. F.; Su, C. H. ;Sheu, H. S.;Chiu, H. C. ; Lo, Y. W.; Lin, W.T.; Chen, J. H.; Yeh, C. S., "The Gd2O(CO3)2‧H2O Particles and their Corresponding Gd2O3: Preparation and Applications of MR Contrast Agents and Template Particles for Hollow Spheres and Hybrid Composites", Adv. Funct. Mater. 2008, 18, 766–776. (IF:6.779)
(4) Huang, C. C.; Liu, T. Y.; Su, C. H.; Lo, Y. W.; Chen, J. H.; Yeh, C. S., "Superparamagnetic Hollow and Paramagnetic Porous Gd2O3 Particles", Chem. Mater. (IF: 5.104) (Accepted) (5) Hsu, M.-H.; Josephrajan, T.; Yeh, C.-S.; Shieh, D.-B.; Su, W.-C.; Hwu, J. R. "Novel
Arylhydrazone-Conjugated Gold Nanoparticles with DNA-Cleaving Ability: The First DNA-Nicking Nanomaterial," Bioconjugate Chem. 2007, 18, 1709–1712.
6. 計畫已獲得之主要成就與成果（請列出相關文獻及圖表，
內容以整體計畫呈
現，500 字為限，請勿以分項成果條列說明）：
（1）在中下游端，我們已完成新核酸切割彈頭合成與初步測試，篩檢癌細胞庫之抗藥性資訊。 而今年則完成了新切割彈頭的設計。而同時，亦尋找出理想的抗腫瘤多重抗藥性基因之 TFO 結 構設計（圖一），並光動力專一基因序列切割機制的開發。
而在體外驗證中，我們利用 Electromobility Southern Hybridization Assay (EMSA)證實設計的 TFO 能與標定基因做特異性結合而造成放射性標定的基因片段產生位移（圖二）。
In the in vitro assay, we use Electromobility Southern Hybridization Assay (EMSA) to evaluate the specific targeting of the TFO design and obtained a confirmation for the design. (figure 2)
Figure 8 攜帶成三股寡核酸酮腙之金奈米之組裝 與光動力核酸切割。(a~c) 5’-端硫醇並 3’端胺 基修飾之 TFOs 能與金奈米藉金屬硫醇鍵自組裝並 外露胺基予酮腙連結。(c~e) 此一結構藉由 TFO 之專一辨識能與質體之特定基因序列區段產生特 異性雜交並在外加光子的能量下進行雙股切割而 使超螺旋雙股結構轉化為線性結構。Assembly of nanoparticle-TFO-hydrazone complex
(NP-TFO-Hz) and the photoactivated targeted DNA cleavage. (a) 5’-end thiol and 3’-end amine modified TFOs were self-assembled on the gold nanoparticle surface through metal-thiol bond and leave the amine group extended outward. (b,c) The BMPS-hydrazone was then added to form the final product NP-TFO-Hz DNA cleaver. (c,d) When plasmid DNA containing the TFO target sequences were incubated with the nanoparticle-TFO-cleaver, the TFOs on the nanoparticle surfaces recognize the target sequence and capture the plasmid. Upon light exposure,thehydrazoneon the3’-end of the TFO will be activated locally to induce double strand break at 12 bps upstream to the TFO binding site. (e) Double strand cleavage of the plasmid converted the Form I supercoiled DNA to Form III linear DNA.
而此一結合在不到一小時即可達成並可持續超越三天。基因切割方面，照射紫外（302nm）於結 合 TFO-彈頭的試劑可成功的將標靶基因切斷而使分子量降低呈現於電泳膠較高之位置。而進一 步限制脢圖譜分析與直接基因定序也證實其切割位置之專一性（TFO 末端延伸 12 核酸序列支位 置）（圖三至五）。
The formation of TFO-targeting DNA complex could be achieved within an hour and maintain stable for more than 3 days. In the evaluation of gene sequence selective cleavage, the NP-TFO-Hzs were able to respond to UV light (302nm) and execute target DNA cleavage. (figure 3~5)
Figure 9 EMSA 測 試 證 實 所 設 計 之
TFO 具有專一之核酸標定功能。TFO 與奈米金粒子連結之複合體亦具有專 一 基 因 標 靶 之 功 能 。 Electrophoretic
mobility shift assays (EMSA) for the binding affinity and specificity of TFO and TFO-nanoparticles to the target DNA sequence. (a) The specificity of
STAT3-TFO targeting was revealed by a dose dependent increase in triplex DNA formation (lanes 2~5) compared to the control (lane 1) and the scrambled sequence (lane 6). (b) A dose dependent supershift of the target DNA was observed when using TFO modified nanoparticles as the probe (lanes 1~6). Adding the cold probe to the reaction mixture was able to compete off the NP-TFO binding to the target DNA in a dose dependent manner (lanes 7~12).
Figure 3 連結 TFO-酮腙之奈米粒子在光照下能將 有標靶基因序列的質體超螺旋結構轉化為線性結 構。而對不具有標靶序列的質體，則只能轉化為開 放環狀結構。Photoactivated double strand DNA cleavage by NP-TFO-Hz complex. (a) The addressed
or unaddressed supercoiled pGEM-T easy plasmid DNA template was incubated with NP-TFO-Hz complex (5 x 10-12M) for 90 min followed by 302nm UV light exposure. The resultant products were subjected to electrophoresis separation in a 1% agarose gel. (b) Quantitative measurement of the DNA band intensity in the agarose gel was illustrated. About 88% of the plasmid DNA was converted to from II (*) in the unaddressed Double strand DNA when exposed to NP-TFO-Hz and UV light, close to the results of the free hydrazone compound. Effective conversion (73%) of the plasmid DNA to Form III linear DNA occurred only in the addressed plasmid exposed to NP-TFO-Hz and UV light (lane 5, marked as “**”). All other experimental conditions derived only minimum levels of form II or form III conversion.
Figure 4 限制脢片斷圖譜分析顯示連結 TFO-酮
腙之奈米粒子能專一的切割雙股去氧核糖核酸於 標定區域。產生ㄧ 368 個鹼基對之核酸片斷。
Restriction fragment mapping of the plasmid subject to NP-TFO-Hz cleavage. (a) A single cut
point was designed in the template plasmid as illustrated. The Supercoiled plasmid DNA was cleaved into linear form by Nae I to derive a 3045 bp template. (b) As the TFO binding site was located downstream (60 ~ 87 nt), a short DNA fragment about 368 bps will be generated when targeted by the NP-TFO-Hz and photoactivated for double strand cleavage (lane 10). Only 3045bps linear DNA could be detected in all other groups.
為將來在細胞與活體中應用之開發，目前我們已成功將激發切割波長由紫外轉入可見光區段。 並證明其切割效果與對 DNA 之顯著減少傷害。我們更著手多基因區段切割之設計並將激發光譜 漸漸轉入能穿透人體深部之近紅外光區。我們也改良光源，
使用發光二極體驅動。並開始進行癌症動物模型與細胞模型測試。
To improve future cell line and animal model application development, we have successfully developed visible light activation mechanism and will further move the activation spectrum to NIR for deep organ malignancies. We also change the activation light source from UV bulb to LED high power flash to improve the efficacy. Now, we have initiated the evaluation in animal models and cell line models. We have improved the reproducibility of our animal model system and the similarity of
Figure 5 直接基因定序基因切割奈米粒子之切割片斷發現切割位置固定於 TFO 終端 12 鹼基對之位置。足見其專一特性 。 Direct sequencing of the cleavage product from NP-TFO-Hz. (a) sequence of the addressed linear form template DNA around the TFO target
site (337~364). (b) A premature termination of the sequence was observed at 12 bps from the 3’-terminal of the TFO (374) suggesting a double strand break (DSB) in this codon.
7. 上述重大研究突破，與國際上類似領域之比較（
內容以整體計畫呈現，500 字
為限，請勿以分項式條列說明
）
：
雖然國際上已有許多利用 SiRNA 或 Anti-sense 技術調控基因表現之文獻, 但藉由 TFO 專一性 及多重胞內機制以更持久的特質之術調控基因表現則尚罕見。本年度成功完成抗藥性 TFO 設 計，並驗證其專一性切割。以及結合核酸切割化合物後之效應。並將光源成功調節在可見光區。 避免 DNA 的傷害。在近期內將進行動物實驗之驗證。
Despite the fact that successful gene silencing has been widely reported through siRNA or anti-sense oligonucleotides, most of these technology achieved only partial gene silencing and transient effect. TFO technology directly act on both mRNA and DNA level and could potentially disrupt specific gene through DNA cleavage is a novel way for gene silencing purposes. We have achieved gene specific targeting and silencing in the in vitro study this year. Also shifted the UV activation to visible light spectrum for cell line and animal study. We are now moving forward for the mechanism and animal study for the next year.
8. 評估主要成果之價值與貢獻度：
（請從學、技術創新、經濟效益、社會衝擊等
影響面，
內容以 300 字為限
)：
(1)現今癌症為全球第一大死因。團隊開發之白金化物新抗癌藥已發現與幾個訊息調控路徑息息 相關。正進行重複驗證中。清大胡紀如教授已申請專利，未來若分子機制更清楚並且動物實驗 成功將有助於未來之新穎癌症治療平台的建立以及合併現有化療藥物（雞尾酒療法）之開發。 Cancer is the leading of course of death in the world. We have developed novel platinum compound that proved to be more effective to treat platinum compound resistance cancer lines more effective. These new compounds could activate special signal transduction pathways such as STAT3 in cell line model. We are currently validating this obervation and applying for patents for these new compounds through Prof. Hu of NTHU. These compounds may be applied for our developed nanocarriers and evaluated in the coming year and combined other chemotherapy agents or gene expression modulation modalities for cocktail therapy.
(2)奈米粒子結合三股核酸標定策略已由想像、設計、到驗證的階段。未來在細胞與活體模型若 能成功開發，將具有極大之生藥產業應用潛力。
We have implemented the idea of integrated TFO, nanoparticle, targeting moiety and gene expression control from imagination, design, to the introduction to real world that now move forward for cellular level and animal model evaluation. Its biomedical applications are enormous.
