IL-1 beta
抑制臍靜脈內皮細胞遷移之分子機轉
本篇論文的主旨是在探討 IL-1β 抑制血管內皮細胞遷移之分子機轉。在過去的文獻中指出，血管增
生現象在許多生理及病理現象中都扮演相當重要的角色。例如當腫瘤形成時，為了從活體中得到大
量養分以及進行物質交換，腫瘤會釋放出血管增生因子與周邊血管上的接受器結合，促使血管內皮
細胞向腫瘤的方向進行遷移，並且逐漸形成新生之血管。而針對控制癌症的血管增生現象，成為目
前治療癌症很重要的方向。由於血管增生的過程，伴隨著許多生長因子及細胞激素的釋放，如 VE
GF 及 IL-1β 。因此本實驗室利用人類臍帶靜脈內皮細胞 (human umbilical vein endothelial cell, HUV
EC) 來探討 IL-1β 對血管增生的影響。我們首先給予 IL-1β 處理二十四小時後，利用西方點墨法以
及反轉錄 - 聚合酶連鎖反應實驗證實 Thy-1 在蛋白質或是在 RNA 層級都會有大量表現。進一步進
行了創傷修復實驗，給予 IL-1β 處理二十四小時後，遷移之內皮細胞數目有明顯的減少現象。而本
實驗室先前在細胞實驗中也發現在 Thy-1 過度表現時，內皮細胞遷移受到了明顯的抑制。所以推測
IL-1β 可能是藉由增加 Thy-1 來抑制細胞遷移。接著我們針對訊息傳遞相關蛋白質進行西方點墨法
實驗，發現到 PKC family 之 PKC δ 有明顯的增加。 PKCδ 蛋白質會因為其在細胞內之表現聚集位
置不同而產生不同的效應，我們發現到分布於細胞膜的 PKCδ ，其表現量在給與 IL-1β 的組別中，
有明顯上升的情況。此外，我們藉由 Gö6976 以及 Röttlerin 等 PKC 抑制劑的作用，利用西方點墨法
和微血管形成實驗證實， IL-1β 所造成的內皮細胞遷移及管腔形成的抑制現象，主要是藉由 PKCδ-
mediated pathway 所造成。我們同時使用 RNA 干擾的技術將內皮細胞中的 Thy-1 mRNA knockdown
後，進行西方點墨法和細胞遷移的實驗，結果發現由 IL-1β 誘導增加之 Thy-1 被 knockdown 後， I
L-1β 抑制細胞遷移的現象明顯的回復，證明 Thy-1 在抑制細胞遷移扮演一重要角色。綜合以上實驗
結果我們可以發現， IL-1β 會藉由 PKC δ-mediated pathway 增加 Thy-1 蛋白質的表現，並且達到抑
制細胞遷移的現象，也藉由未知的分子路徑抑制血管內皮細胞之血管構造形成。
The molecular mechanisms underlying IL-1 beta-induced human
umbilical vein endothelial cells migration inhibition
It has been recognized that angiogenesis is required in many physiological and path
ological conditions. For instance, in the development of tumor, in order to get more
nutrients, tumor cells promote vessel formation through the expression of angiogeni
c molecules in the microenvironment. The understanding that the growth of tumors
depends on the acquisition of a blood supply has led to the development of new the
rapies strategy for cancer based on inhibition of angiogenesis. It has been known th
at several growth factors and cytokines were released during angiogenesis, such as
VEGF and IL-1 beta. The aim of this thesis study is to examine the molecular mech
anisms underlying IL-1 beta-induced human umbilical vein endothelial cells migrat
ion inhibition. To gain this purpose, we treated HUVEC with IL-1 beta. Our data de
monstrated that after 24 hours IL-1 beta treatment up-regulated the expression of T
hy-1 mRNA and protein, activated PKC delta and inhibited HUVEC migration and
capillary-like tube formation. Moreover, we found that treatment of HUVEC with P
KC delta inhibitor, Röttlerin, dramatically reversed the IL-1 beta-induced inhibition
of cell migration and tube formation. Knockdown Thy-1 protein by transfection of
Thy-1 siRNA into HUVEC partially reversed the IL-1 beta-induced inhibition of ce
ll migration. Taken together, our data suggest that IL-1 betanmight induce migratio
n inhibition in HUVEC though up-regulation of Thy-1 molecule via a PCK delta-de
pendent pathway.
