膠原蛋白基質作為敷料之開發及酵 素交聯法之應用
近幾年來有許多作為癒傷敷料的膠原蛋白製品研發出來,其中有些產品已經通過臨床試 驗並且已經上市,然而目前這些產品仍有一些待改進的空間,例如材質的脆弱、來自交 聯劑的潛在毒性以及結合兩種材質的優點之可能性。因此在本研究的第一部分,我們探 討自 Streptoverticillium mobaraense 篩選的酵素,微生物麩胺酸轉移脢 (Microbial transg lutaminase; MTGase) 作為交聯劑的效用。由實驗結果顯示, MTGase 所催化的交聯作用 可提高膠原蛋白溶液的黏度,並且膠原蛋白溶液的黏度會隨著 MTGase 添加量的增加而 提高;但是當作用溫度提高到 30℃ 時,膠原蛋白溶液之黏度反而有顯著下降的趨勢,其可能的原因是膠原蛋白纖維的析出所致。 MTGase 在低 pH 值下交聯作用所得的膠原 蛋白基質之拉張力較在高 pH 值下的作用為高,且經過酵素作用的膠原蛋白基質之變性 溫度 (Td) 均有提高的現象。另外,經過 MTT 試驗的結果顯示,以 MTGase 作用的膠原 蛋白基質並無細胞毒性的產生;因此,使用 MTGase 催化膠原蛋白產生交聯作用的方法 極具相當的潛力。
在本研究的第二部分中,我們嘗試以 N,O- 羧甲基幾丁聚醣 (N,O- carboxymethyl chitosan
; NOCC) 結合膠原蛋白作為癒傷敷料的基質 , 並添加軟骨素硫酸鹽 (Chondroitin Sulfate;
CS) 及去細胞基質 (Acellular Dermal Matrix; ADM) 作進一步的探討。由實驗結果發現,
纖維原母細胞會隨著 NOCC 濃度的增加產生顯著的遷移 (Migration) 現象。而在動態機 械分析儀的實驗中,以 NOCC/ CS/ COL 為基質所產生的拉張力較 NOCC/ ADM/ COL 基質為高。另外,觀察在含有 NOCC 基質上培養人類纖維原母細胞的生長狀況,發現 其生長速率有提高的現象。將材質應用於動物實驗中,發現覆蓋含有 NOCC 基質的傷 口,其傷口癒合的速度較快。因此,含有 NOCC 的基質是一個相當有潛力的癒傷敷料 .
Development of Collagen- Based Matrix as a Wou nd dressing and Characterization of an Enzymatic
Cross-Linking Method