香蕉花雄蕊的抗氧化能力測定
班級 : 食管 4-1
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大綱
前言
材料與方法
結果
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前言
前言
人體是一個需氧的有機體,在正常的代謝過程中會產 生活性氧分子與自由基,這些自由基及活性氧分子會 進而攻擊細胞膜、細胞組成及危害細胞核內的基因物 質,進而引發細胞變異和傷害、甚至死亡。
而與自由基相關的疾病相當多,如癌症、心血管疾病
、老化…等。
目前研究發現合成抗氧化劑成功延長食品的儲存時間
,但部分人工合成抗氧化劑進入人體後,有危害人體 健康之虞,因此天然抗氧化劑之發現與萃取成為健康 食品發展趨勢。
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抗氧化劑大致可分為以下三類:
1. 自由基終止劑 (free radical terminator) :供給自 身的氫於自由基,以中止連鎖反應進行。
2. 還原劑 (reducing agent) :本身同時具有消耗氧 的功能與還原的能力,可消耗環境的氧,減少 氧化作用發生。
3. 螯合劑 (chelating agent) :本身並不具有抗氧化 功能,但能促進氧化物質如鐵等二價金屬結合 而抑制自氧化反應的發生。
材料與方法
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香蕉 (Musa sapientum Linn) 為芭蕉科芭蕉屬多年 生草本植物,為香蕉生長過程中的農業廢棄物。
目前台灣對於香蕉花的研究相當有限,因此將其 作為研究材料以期望提高附加價值。
香蕉花
材料製備
香蕉花雄蕊
70℃ 烘乾磨粉
甲醇萃取 (1 : 10)
減壓濃縮完儲存於 -20℃ 備
用 8
總酚含量之測定
1ml Sample1ml Sample
+ 0.25 ml Folin-Ciocalteu
試劑
+ 0.25 ml Folin-Ciocalteu試劑
+ 0.25 ml 20% Na2CO3 + 0.25 ml 20% Na2CO3
+ 2.5 ml DDW + 2.5 ml DDW
室溫避光靜置 1 hr OD 室溫避光靜置 1 hr OD
Gallic acid 為標準品 製作標準曲線
DPPH 自由基清除能力原理
DPPH 是一種含有數個電子且安全性佳的自 由基,溶於甲醇時呈紫色,在 517nm 有高吸 光值。
當試樣品與抗氧化物結合時,抗氧化物提供 氫離子來還原 DPPH ,此時吸光值就會下降
。
吸光值愈低,表示抗氧化物質清除能力愈強
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DPPH 自由基清除能力
3 ml Sample 3 ml Sample
+ 1ml 0.3 mM DPPH + 1ml 0.3 mM DPPH
震盪均質 震盪均質
40℃ 水浴加熱 30 min 40℃ 水浴加熱 30 min
OD OD
維生素 C 為對照組
樣品濃度為 5~1000ppm
還原力原理
測定原理為利用抗氧化物質將赤血鹽 (K
3Fe (CN)
6) 還原成黃血鹽 (K
4Fe(CN)
6) ,黃血鹽 會與 Fe
3+作用而產生成普魯士藍。
以普魯士藍的生成量多寡為還原能力的指 標,吸光值愈高表示還原能力愈佳。
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還原力測定
0.5 ml Sample +0.5 ml K3Fe(CN)6 及 0.5 ml 0.2M pH 6.6 緩衝液
0.5 ml Sample +0.5 ml K3Fe(CN)6 及 0.5 ml 0.2M pH 6.6 緩衝液
50℃ 水浴 20 分鐘後快速冷卻 50℃ 水浴 20 分鐘後快速冷卻
+ 0.5 ml 10%TCA 避光靜置 10 分鐘 + 0.5 ml 10%TCA 避光靜置 10 分鐘
+ 2ml DDW 及 0.4ml FeCl3
+ 2ml DDW 及 0.4ml FeCl3
OD700 OD700
維生素 C 為對照組
樣品濃度為 5~1000ppm
結果
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香蕉花雄蕊之一般成分分析
水分 灰分 粗蛋白 粗脂肪 碳水化合物 雄蕊 91.08±0.02 1.35±0.05 0.75±0.02 1.01±0.10 6.34±0.47
Values are means ± SD (n=3)
碳水化合物含量 (%)=100(%)- 水分 (%)- 灰分 (%)- 粗蛋白 (%)- 粗脂肪 (%)
根據實驗結果所測得香蕉花雄蕊總多酚含量為
香蕉花雄蕊之總酚含量
圖 1. 香蕉花雄蕊甲醇萃取物 DPPH 自由基清除率 (%)
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謝謝聆聽
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