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StepOnePlus™ 即時聚合酶鏈鎖反應儀 (StepOnePlus™ Real-Time PCR System)

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Academic year: 2022

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StepOnePlus™ 即時聚合酶鏈鎖反應儀 (StepOnePlus™ Real-Time PCR System)

壹、用途說明

簡介:

即時螢光定量 PCR 技術於 1996 年由美國 Applied Biosystems 公司推出,由於該 技術不僅實現了 PCR 從定性到定量的飛躍,而且與常規 PCR 相比,它具有特異 性更強、有效解決 PCR 污染問題、自動化程度高等特點,在後基因體時代的來 臨,已廣泛利用 Real-Time PCR 技術來應用基因表現、病毒或病原菌偵測的實驗 及 SNP genotyping Assay。

特有的實驗設計流程:Assay Development Guidelines 縮短尋找條件的時間並保障 實驗的品質

 採用 Primer Express 設計 TaqMan Probe 與 Primer。

 採用 Optimized 定量 PCR 的試劑。

 採用標準化的 PCR 條件與反應濃度。

 可將 PCR 的效率提升至 100%。

特點:

1. 反應模式 快速模式僅需 40 分鐘,也可採取標準模式 2 小時內完成反應,最 多完成 96 個反應。

2. 獨家 Veriflex 加熱塊技術,六道獨立控溫,讓你同時進行六種不同 PCR 的反 應條件。

(2)

3. 四色螢光偵測系統,輕鬆執行 Multiplex Real Time PCR 實驗。

4. 軟體整合所有實驗應用 包含。

a. 絕對定量 (Standard Curve)。

b. 相對定量 (△△ Ct Method & Relative standard Curve)。

c. Melting Curve Analysis。

d. SNP genotyping Assay。

e. Presence/Absence Assay (定性判讀)。

5. 操作最簡便: 軟體介面直覺式引導設定 不需翻閱操作手冊。

貳、使用規則

一、使用本機需事先預約。(請參閱預約規定)

二、上機前應先於使用登記簿上填寫各項資料,並於上機完成後儘速將樣品取 回,否則樣品若有損壞請自行負責。

三、使用者不得在中心的電腦上進行下列操作:

A. 改動程式或參數,或他人的檔案。

B. 自行外接任何週邊設備。

C. 拷貝程式至中心電腦中執行(中心電腦中之程式皆為原版,有版權)。

違者永遠停止使用,若造成損害,將予以處罰。

四、若上機時有任何問題,請詢問儀器中心技術人員。

參、預約規定

StepOne plus Real-Time PCR(A)預約使用規定:

1. 星期二及星期四上午保留當天預約,其他時間可提早預約。

2. 預約時間勿超過一個月。

3. 預約請確實填妥姓名、聯絡電話、預約時間及上機次數。

4. 逾時 30 分鐘,其他使用者可優先使用。

5. 取消預約,請以修正液將預約塗掉,以方便其他使用者預約。

6. 未依規定使用者,禁止使用該設備一個月。

(3)

7. 附屬配件取用或歸位時間,不得影響他人使用。

8. 個人物品請帶走,勿留下 sample 或可能的碎玻璃。

精密儀器中心 2010.3.17

StepOne plus Real-Time PCR (B)預約使用規定:

1. 下午時段(14:00 以後)保留當天預約,其他時間可提早預約。

2. 預約時間最早為一週前。﹝例如:今天星期二最早只能預約至下星期一﹞

3. 預約請確實填妥姓名、聯絡電話、預約時間及上機次數。

4. 逾時 30 分鐘,其他使用者可優先使用。

5. 取消預約,請以修正液將預約塗掉,以方便其他使用者預約。

6. 未依規定使用者,禁止使用該設備一個月。

7. 附屬配件取用或歸位時間,不得影響他人使用。

8. 個人物品請帶走,勿留下 sample 或可能的碎玻璃。

精密儀器中心 2012.8.20 一、預約者須為真正使用人,不得頂替使用。

二、預約最早為二週前。﹝例如:今天星期二最早只能預約至下下星期一﹞

三、每人每次最多可預約兩個時段,且須間隔,每個時段最長不可超過 3 小時。

四、在預約時段內 30 分鐘以上沒使用,視同放棄使用,他人得以隨時使用。

請注意:

※ 取消預約須儘早取消,以免損及他人權益!若有經常預約不到又不先前取消 者,經檢舉調查有習慣佔用之嫌者,本中心將嚴格限制其使用。

肆、使用手冊與教學影片

【StepOnePlus快速上機流程)】

【StepOnePlus實驗建立流程】

【StepOnePlus簡易分析流程】

【Primer Express v3.0 中文操作手冊】

【教育訓練講義】

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伍、相關連結

美商應用生命系統 台灣分公司 (Applied Biosystems Taiwan)

參考文獻

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