免疫組織化學染色後之觀察與記錄

2.4.1 觀察

以光學顯微鏡觀察各染色標記於組織切片上之呈色。主要觀察部位為1. 腫瘤 細胞巢（tumor cell nest）中。2. 基底層（basal layer）。3. 基底旁層（parabasal layer）。 4. 棘狀層（spinal cell layer）。5. 腫瘤周邊發炎浸潤細胞（infiltrating cells）

2.4.2 染色程度之定量

記錄IDO 之表現，判讀染色結果採用陽性染色指標（labeling index），其方法 統一為：每一樣本在400x 的視野下，隨機選擇 5 個區域，觀察其的陽性染色細胞 佔所有癌細胞之比例（labeling index）。

記錄IFN-γ 之表現，判讀染色結果採用陽性染色指標（labeling index），其方 法統一為：每一樣本在400x 的視野下，隨機選擇 5 個區域，觀察其的陽性染色細 胞佔所有腫瘤周邊發炎浸潤細胞（infiltrating cells）之比例（labeling index）。

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2.4.3 臨床變數之紀錄

複查口腔鱗狀細胞癌患者臨床紀錄之文件來源包括：病歷正本、病歷縮影、

與癌症登記室的追蹤資料。

記錄的項目包括：病人的性別、年齡、TNM 臨床分期、癌症發生部位、術後 是否復發、發生局部或遠端轉移、死亡時間、口腔鱗狀細胞癌細胞分化程度、手 術後病理組織的五個危險因子，即腫瘤切除邊緣是否遭腫瘤侵犯（margin

involvement）、腫瘤的是否產生頸部淋巴結外擴散（extranodal extension 或稱為 extracapsular spread）等、原發腫瘤處之血管淋巴侵犯（lymphovasvular invasion）、

神經周邊侵犯（perineural invasion）以及有兩顆以上局部轉移的淋巴結（metastatic lymph nodes≧2）。

評估病人的TNM 臨床分期採用 AJCC 於 2010 年出版之修訂版。依據臨床電 腦斷層掃描（CT）或磁振造影（MRI）的結果，評估包括原發腫瘤大小、腫瘤有 無侵犯鄰近組織、是否局部淋巴結轉移及遠處器官轉移等因子，決定病患腫瘤的 TNM 臨床分期。

口腔癌是否產生復發，以病患切片或手術的病理報告為依據，比較前後兩次 發生的口腔癌在解剖位置的關聯性、腫瘤細胞型態及分化情形，判斷為復發或二 次原發（second primary）之口腔癌。復發之排除條件為：1. 若第一次手術之切除 邊緣遭腫瘤侵犯（margin involvement），則定義三個月內、於相同解剖位置再發之 口腔癌為殘存腫瘤（residual tumor），不歸類為復發；2. 若前後二次口腔癌位於不 同解剖位置，且在解剖構造上缺乏連續性，如左側及右側頰黏膜、上顎與下顎等，

也不定義為復發的口腔癌。

2.4.4 統計分析

本研究之資料以下列統計套裝軟體進行分析：IBM SPSS Statistics 20 （IBM

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Corporation, New York, USA）

1. 利用 linear regression 分析 IDO 和 IFN-γ表現量之因果關係。

2. 利用 Chi-square test 或 student’s t-test 分析 IDO 和 IFN-γ 於 OSCC 的表現與臨 床參數間的差異性。

3. 利用point-biserial correlation、Pearson correlation、Spearman correlation 分析 IDO 和IFN-γ 於 OSCC 的表現與臨床參數間的關聯性。

4. 利用 Kaplan-Meier method 分析 IDO 和 IFN-γ 表現與存活率之關係。再利用 Log-rank test 進一步推論 IDO 和 IFN-γ 表現是否與 OSCC 患者的存活時間有統 計上相關性。

5. 利用 Cox proportional hazard regression model，評估單變數及多變數影響下與

存活之預後關係，以單變數分析評估存活率與何種臨床參數以及是否跟IDO

和IFN-γ 表現量有關，以多變數分析決定存活率的獨立因子，藉以了解 IDO 和IFN-γ 表現所扮演的重要性。

各項統計分析均以p <0.05 判定為有意義。

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