各別的訊息傳遞路徑圖

除此之外，由於這兩株細胞株的來源不同，HSC-3 從日本細胞

庫購入，是口腔麟狀上皮細胞癌轉移到頸部淋巴，從頸部淋巴分離 取得，經研究指出其為高轉移能力的細胞株；SCC-4 從食品工業發

展研究所購入，此細胞再被分離取得之前，病患有接受放射線及化 療藥物(methotrexate)治療長達十六個月之久。因此除了相同的訊息

傳遞路徑外，也找到各別的訊息傳遞路徑，下面介紹這些各別訊息 傳遞路徑中的蛋白質。

葡萄糖調控蛋白質 78 GRP78(減少)(Glucose-Regulated Protein 78)。Hendershot et al. (1994)指出，GRP78 又稱為 BiP (immunoglobulin heavy chain-binding protein)，為 HSP70 (heat shock protein 70)的成員 之ㄧ，位於內質網中，具有鈣離子結合能力以及保護的功能，能夠 幫助新合成之蛋白質的折疊，使其具有正確的功能和結構。故本論 文推測，松杉靈芝萃取物會減少GRP78 的表現，導致細胞合成正確 蛋白質能力受損，因而達到抑制細胞生長的能力。Zhang et al. (2009), Virrey et al. (2008), Pyrka et al. (2007), Lee et al. (2006) 指出，GRP78 和化療藥物的敏感性和抗藥性有相關，當GRP78 被 knockdown 後，

會增加細胞株對化療藥物 CPT-11, etoposide(VP-16), temozolomide,

5-fluorouracil and CPT-11 的敏感性；當 GRP78 過表現時，會增加細

胞株對化療藥物 etoposide(VP-16) and temozolomide 的抗藥性。

Sadava et al. (2009)指出，靈芝萃取物可以顛覆小形肺癌細胞 (small-cell lung cancer)對化療藥物(etoposide 及 doxorubicin)的抗藥

性；除此之外 Li et al. (2008)也指出，靈芝(Ganoderma lucidum polysaccharides)可以藉由減少 MDR-1 及 MDR-associated protein (MRP)1 的表現，而顛覆抗藥性癌細胞(adriamycin (ADM)-resistant leukemic cell line K562/ADM)對化療藥物(doxorubicin)的抗藥性。故 本論文推測，如果在使用化療藥物治療癌症時，輔助給予松杉靈芝 萃取物，而松杉靈芝萃取物可以使得GRP78 的表現量下降，GRP78 的表現量下降可以增加細胞對化療藥物的敏感性，如此一來，治療 效果更明顯，但這僅止於推測，能需做進一步的實驗進行驗證。至 於在處理高濃度的松杉靈芝萃取物後(0.75mg/mL)，GRP78 的表現量 經西方墨點法分析，結果為上升的，推測高濃度的松杉靈芝萃取物 已對細胞造成壓力，因此GRP78 在此扮演 chaperones 的角色。

Tumor protein, translationally-controlled 1(減少)(TPT1)。Kim et al.

(2009)指出，TPT1 為細胞質內 Na,K-ATPase 的抑制劑；且由 Akt 路 徑所調控的細胞生長，PLC-gamma 路徑所調控的細胞移動能力，

TPT1 扮演重要的角色。Hsuan et al. (2005)指出，TPT1 可藉由抑制 Mcl-1 的 ubiqutinalation 而影響 Mcl-1 的分解，因此而增加 Mcl-1 蛋 白的半衰期，Mcl-1 屬於 Bcl-2 家族之一，Bcl-2 可阻止細胞凋亡。

故本論文推測投予松杉靈芝萃取物後，TPT1 表現量下降，會增加 Mcl-1 的分解(而 Mcl-1 屬於 Bcl-2 家族之一)，Mcl-1 下降，阻止細 胞凋亡的就減少，也就是說細胞凋亡增加。

Sanders et al. (1996)指出，Eukaryotic elongation factor-1 (EF1)由

四個 subunits 組成，分別是 EF1-alpha, EF1-beta, EF1-gamma 和 EF1-delta。在轉譯過程當中，EIF-alpha-GTP 藉由 GTP 水解成 GDP，

將aminoacyl-tRNA 轉移到核醣體上(ribosome)，EF1-alpha-GDP 再藉 由 EF1-beta, -gamma, and -delta subunits 的 幫 忙 ， 恢 復 成 EIF-alpha-GTP。

Cans et al. (2003)發現 TPT1 傾向於穩定 EF1-alpha-GDP 的形

式，因而影響了EF1-beta, -gamma, and -delta subunits 主導的 GDP exchange reaction，因此作者推測 TPT1 存在著抑制鳥糞嫖零核甘酸 分離(guanine nucleotide dissociation inhibitor)的活性，因而影響了蛋 白質合成過程當中的延長步驟。

Saito Y et al. (2008)指出，表現 cold shock domain protein A 可以

藉由直接和serum response element (SRE)或 hypoxia response element (HRE)結合，因而抑制血管新生和淋巴管增生。

Kleijnen et al (2000)指出，ubiquilin 參予 proteasome 所主導的蛋

白質降解，在處理松杉靈芝萃取取物後，其表現量上升，則推測蛋 白質降解也上升，因而導致細胞生長受阻。

葡萄糖調控蛋白質 75 GRP75(減少)(Glucose-Regulated Protein 75)，為 Hsp70 成員之ㄧ，主要存在於粒線體內，可以將粒線體蛋白 質從細胞質內運輸到粒線體。除此之外，Wadhwa et al. (1998)指出 GRP75 可以降低抑癌基因 p53 的活性；Wadhwa et al. (2006)指出，

GRP75 在很多腫瘤組織中都有過表現的現象；Ling (2008)指出，

GRP75 過表現可以抑制 glucose deprivation (GD) injury 所造成的細

胞凋亡，主要是藉由抑制Bax 結構的改變，而延緩 cytochrome c 的 釋放。總而言之，GRP75 如果過表現，對細胞是一種傷害，而在松 杉靈芝萃取物處理後，其表現量下降，對細胞無疑是好的。