第二章 結果與討論
第四節 嗜中性白血球過氧化物形成反應之抑制活性
Superoxide anion formation
Control 3.31±0.32
TFP 1 3.12±0.59 2.3±9.0
3 1.89±0.59** 44.2±12.4
續表六
10 0.53±0.06** 82.9±3.3
5.6±0.30
control 3.31±0.32
3a 30 C6H5 CHO H 3.54±0.45 4.6±11.3
100 3.89±0.90 -1.6±18.4
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
3b 30 o -Cl-C6H4 CHO H 3.43±0.39 7.5±9.8
100 4.15±0.43 -10.7±1.9
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
3c 30 m -Cl-C6H4 CHO H 3.98±0.28 -6.8±2.3
100 3.93±0.23 -6.1±5.7
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
3d 30 p-Cl-C6H4 CHO H 3.66±0.47 -5.2±2.7
100 4.06±1.03 -15.1±17.6
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
4a 30 C6H5 CH2OH H 3.74± 2.3±13.9
100 3.44± 8.6±4.7
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
4b 10 o -Cl-C6H4 CH2OH H 4.15±0.02 -48.5±9.0
30 4.24±0.05** -51.8±9.2
100 4.36±0.12** -56.2±11.0
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
4c 30 m -Cl-C6H4 CH2OH H 3.93±0.84* -33.7±14.2
100 4.25±0.50* -29.0±8.9
IC50 ＞100μM
control 3.31±0.32
4d 10 p-Cl-C6H4 CH2OH H 3.07±0.16 -9.3±3.8
30 2.97±0.08 -6.0±5.3
IC50 ＞100μM
control 2.81±0.17
TFP 3 2.13±0.04 23.7±3.5
10 0.56±0.08** 79.2±4.3
30 0.22±0.09** 91.9±4.3
IC50 9.7±1.1 μM
control 2.81±0.17
5 10 C6H5 COCH3 COCH3 2.44±0.13 12.0±9.4
30 3.01±0.12 8.0±9.4
IC50 ＞30μM
control 2.81±0.17
6 10 C6H5 COCH3 H 2.47±0.29 10.7±14.4
30 1.52±0.20** 45.7±7.6
IC50 ＞30μM
續表六
control 2.81±0.17
7 3 C6H5 CH=NOH H 3.35±0.10 -20.0±5.4
10 3.78±0.18* -36.7±11.8
30 5.35±0.11** -93.1±12.4
IC50 ＞30μM
control 2.81±0.17
8 10 C6H5 COOH H 2.80±0.25 0.3±5.6
30 3.07±0.18 9.9±8.4
IC50 ＞30μM
control 2.81±0.17
9 10 C6H5 CH2OCH3 H 3.26±0.52 -11.4±8.5μM
30 2.13±0.31 23.3±13.5
IC50 ＞30μM
control 6.95±0.33
10 10 C6H5 COOC2H5 H 7.36±0.46 -6.5±9.4
30 6.34±0.09 8.3±5.7
IC50 ＞30μM
control 5.85±0.50
TFP 3 6.04±0.19 -4.5±10.0
5 4.60±0.21 20.7±6.5*
IC5 8.3±0.8μM
control 2.81±0.17
16 10 H CHO H 2.12±0.22 22.9±12.1
30 1.72±0.24** 38.3±10.1
IC50 ＞30μM
control 2.81±0.17
17 30 H CH=NOH H 2.08±0.32** 27.2±8.3
100 2.51±0.07 10.2±3.9
IC50 ＞30μM
續表六
control 6.95±0.3
18 10 H CH=CHCOOH H 5.61±0.44 22.8±7.1
control 2.81±0.17
20 10 C6H5 CH=CHCOOH H 3.22±0.18 -16.2±12.6
30 2.64±0.16 5.2±7.7
IC50 ＞30μM
control 6.95±0.33
21 10 C6H5 CHC(COOEt)2 H 6.16±0.48 11.5±3.0
30 6.25±0.16 9.4±6.8
IC50 ＞30μM
control 6.95±0.33
22 10 C6H5 CH=NNHCONH2 H 6.85±0.26 1.1±4.8
30 3.02±0.31 12.9±6.7
IC50 ＞30μM
control 6.95±0.33
23 10 CHC(COOEt)(CN) H 6.52±0.32 6.2±1.5
TFP: trifluoperazine (as positive control).
第五節 肥胖細胞脫顆粒反應之抑制活性
compdsconc Percent release
3d 10 CH2-(p-Cl-C6H4) CHO H 21.6±5.7 32.7±12.4 59.7±1.8 9.4±1.2
control 18.0 ± 0.9 -- 25.0 ± 1.0 --
control 31.5±1.4 54.0±0.5
21 10 CH2-C6H5 CH=C(COOEt) H 27.2±0.9 12.8±2.2 57.3±2.3 -6.0±5.4
30 27.4±1.0 12.9±0.8 57.0±3.5 -5.5±7.6
control 31.5±1.4 54.0±0.5
22 10 CH2-C6H5 CH=NNHCONH2 H 31.7±1.8 -0.5±1.4 65.5±4.1 -22 4±8.2
30 31.9±1.1 -1.5±4.7 66.6±2.7 -23.3±6.1
control 31.5±1.4 54.0±0.5
23 10 CH2-C6H5 CH=CHCOCH3 37.6±3.0 -19.3±7.8 66.0±4.4 -22.2±9.3
30 31.9±1.4 -1.2±1.8 60.7±3.4 -12.4±7.5
control 31.5±1.4 54.0±0.5
24 10 CH2-C6H5 CH=CHCOOC2H5 H 33.5±1.9 -6.0±1.5 61.9±3.1 -14.7±6.6
30 32.9±1.8 -4.3±1.3 61.4±3.3 -13.6±7.0
control 31.5±1.4 54.0±0.5
Mepacrine 10 23.6±0.4 24.6±0.7* 41.8±2.5 22.5±1.8*
30 14.4±0.2 54.0±0.5** 29.4±1.8 45.4±1.2**
100 4.5±0.3 85.4±1.7** 10.9±0.6 79.7±0.5**
25.57±0.6 31.6±1.0
Mast cell were preincubation at 37 ℃ with 0.5 % DMSO or test compounds for 3 min. of cytochalasin Fifteen minutes after the addition of compound 48/80 (10μg/ml),β-glucuronidase and histamine activities in the supernatant were determined. Values are presented as mean±S.E., N=3-4, *P＜0.05 **: P<0.01 .
第四節 對 Microglia cells 產生 NO 及 TNF-α之抑制活 性
化合物2a-d，3a-d，4a-d 及 5-9 對 LPS / TNF-α所引起的 N9 microglia cell 產生 NO 及 TNF-α之抑制活性如表八所示。
在 Nitrile assay 中化合物 3b 比 postive control 1400 W 更佳的抑制 NO 產生之活性，其 IC50為 3.0μΜ，而化合物 3b 之
o-Cl 移到 m 位（3c）
時其活性降低約 1/5。若移到
p 位（3d）時，其活性又大幅下降，若將
Cl 去除（3a）其活性亦相當弱。上述化合物 3b，3c 之 CHO 去除時（2b 及2c），其活性明顯降低。而低活性的化合物3a 及 3d 除去 CHO 時（2a，2d）活性依然很低。進而將化合物 2a 之 phenyl group 除去時（11）活性
又減弱。另外化合物3b 之-CHO 改變成-CH2OH（4b）時活性略增。而當 化合物 4b 之
o-Cl 改變成 m-Cl（4c）及 4'-Cl（4d）及除去 Cl（4a）其效
價變化傾向與由化合物3b 變成 3c，3d 及 3a 時之變化類似。在 TNF-αassay，化合物 3b 及 4b 具有強效的抑制 LPS / TNF-α-γ -induced TNF-α產生之活性，IC50分別為 0.6 及 0.5μΜ。
表八. 化合物 2a-d、3a-d、4a-d 對 N9 細胞產生 NO 及 TNF-α之抑制活 性
N
R'
CH2-R
IC50 (µM)a
Compd R R'
Nitrite TNF-α
2 H H > 30 ( 6.8 ± 1.0%)b > 30 (21.7 ± 2.9%)
2a C6H5 H > 30 (32.7 ± 0.4%) > 30 (46.3 ± 1.8%) 2b o-Cl-C6H4 H > 10 (45.9 ± 0.9%) 2.93 ± 0.06 2c m-Cl-C6H4 H > 30 (37.2 ± 1.5%) > 30 (44.7 ± 1.9%) 2d p-Cl-C6H4 H > 10 ( 6.7 ± 2.5%) > 10 (40.9 ± 7.9%) 3a C6H5 CHO > 10 (20.0 ± 5.6%) > 10 (43.9 ± 1.8%) 3b o-Cl-C6H4 CHO 3.0 ± 0.1 0.64 ± 0.23 3c m-Cl-C6H4 CHO 16.4 ± 0.3 6.50 ± 0.13 3d p-Cl-C6H4 CHO > 10 ( 6.2 ± 0.6%) > 10 (38.4 ± 1.8%) 4a C6H5 CH2OH > 10 (45.0 ± 2.0%) 4.90 ± 0.14 4b o-Cl-C6H4 CH2OH 2.3 ± 0.1 0.52 ± 0.16 4c m-Cl-C6H4 CH2OH 9.9 ± 0.3 4.60 ± 0.12 4d p-Cl-C6H4 CH2OH > 10 (12.9 ± 1.6%) > 10 (11.1 ± 3.1%)
1400Wc 6.0 ± 0.1 NDd
Dexamethasonec ND 0.10 ± 0.01
a TNF-α was measured by using TNF-α ELISA kit and see ref 65 for NO determination. Values are expressed as the means ± S.E. (n = 3). b When 50% inhibition could not be reached at the highest concentration, the percent inhibition is given in the parentheses.Compounds that were unable to evaluation at the concentrations > 10 µM because of the cytotoxicity. c 1400W (N-(3- aminomethyl)benzylacetamidine) and dexamethasone are the reference inhibitors for nitrite and TNF-α formation, respectively. d ND, not determined.
第八節 Carbazole 衍生物(2-15)對 HL60、U937 及 K562
等癌細胞增殖率的影響
將 HL60、U937 及 K562 三種細胞株分別用化合物 2-15 處理 24 小時 後，再用 PI 螢光染色，經流式細胞儀偵測並分析存活細胞之數量的百分 比值，列記於表九及圖五，從表九及圖五得知這些 carbazole 衍生物，對 HL60、U937 及 K562 等細胞增殖率都有明顯的劑量依存性
(dose-dependent)抑制作用。
為了探討其結構與活性的相關性，著者將表九數據分別推算其 IC50，
列於表十，這些 carbazole 衍生物的結構與活性之關係敘述如下：
當基本骨架 carbazole 第 9 位接上 benzyl group (2a)及
m-chlorobenzyl
group (2c)時，對 HL60 及 U937 細胞株都呈明顯的抑制活性，但是對 K562 則活性甚弱。當接上
o-chlorobenzyl group (2b)時，則只對 U937 細胞株有
活性而已。若接上p-chlorobenzyl group (2d)時，對三種細胞株都沒有明顯
活性。進而將化合物2a 之第 3 位導入-CHO (3a)，其活性與化合物 2d 一樣，
都沒有明顯活性。當化合物3a 之 benzyl group 的 ortha 位與 para 位，導 入 Cl 而形成 3b 及 3c 時，對 HL60 及 U937 細胞株之活性甚強，而且對 K562 也呈明顯的活性。當 3b 或 3c 之 Cl 原子移至
para 位 (3d)時，則只
對 U937 細胞株抑制活性很強而已，對其他兩種細胞株活性較弱。另一方面，當 carbazole 之第 3 位固定為-CH2OH，而第 9 位為 benzyl group (4a)時，對 U937 呈現相當強的活性，而對其他兩種細胞株之活性只
是中等而已。若將化合物4a 之 benzyl group 改變成 o-chlorobenzyl group (4b)和
m-chlorobenzyl group (4c)時，則對 HL60 及 U937 細胞株之抑制活
性都很強，對 K562 則比較弱。再將 4b 或 4c 之 Cl 原子移至para 位 (4d)
時，則只對 U937 細胞株之抑制活性很強而已。若將2a 之第 3 位分別導入-COCH3 (6)及-CH=NOH (7)，則只對 U937 細胞株呈現中等活性而已。
進而將 carbazole 第 9 位接上各種 alkaly group 時 (11-15)，都只有對 U937 細胞株呈現活性而已。
綜合以上結構與活性關係之檢討，可以觀察到這些 carbazole 衍生物 對 U937 之抑制活性最為明顯，其次為 HL60，最不明顯的是 K562 細胞 株。
另外也可以觀察到 carbazole 第 3 位之-CHO 或-CH2OH 以及第 9 位 之 chlorobenzyl group 對活性之影響比較大。
表九. Carbazole 衍生物對 HL 60、U937 及 K562 癌細胞之抑制活性
R'
Compds R R' Conc.
Compds R R' Conc.
Compds R R' Conc.
Compds R R' Conc.
Compds R R' Conc.
細胞增值率的影響
(A)
Concentration (µM)
0 2 4 6 8 10 12
Proliferation rate (% of control)
0
Proliferation rate (% of control)
0
Proliferation rate (% of control)
0
U937 及 K562)細胞增殖率之 IC 50
第三章 結論
以 9-benzycarbazole-3-carbinol (4a)為先導化合物，合成一系列的衍生 物，分別測試其抗血小板活性、抗炎活性以及小神經膠質細胞活化之抑制 活性，初步建立了化學結構與各種生物活性的關係。從本研究中發現了化 合物3a、3b、4b、4c、4d 及 7 具有明顯的抗血小板活性。又發現化合物 3b、4b 及 4d 具有相當強的抗炎活性，其中 3b 對嗜中性白血球脫顆粒反
應，及嗜中性白血球超過氧化物之形成具有強效的抑制活性，而4b 及 4d
呈現對嗜中性白血球脫顆粒反應具有強效的抑制活性 IC50 均為 2.0 μ Μ，相當於 postive control TFP 之 6-7 倍.另外著者又確認化合物 3b 及 4b 具有對小神經膠質細胞活化產生 NO 及 TNF-α之強有效的抑制活性，是 新型的小神經膠質細胞活化抑制劑。
以上3b、4b、及 4d 等三種 9-benzycarbazole 衍生物之生物活性優異，
值得做進一步藥理學臨床可用性之研究。
第四章 實驗部份
第一節 試藥溶媒與材料
壹.
購自德國 E. Merck 公司者1. Acetic anhydride 2. Acetic acid
3. Aluminum chloride
4. Benzyl chloride ( 99 ﹪) 5. Chloroform ( ACS grade )
6. Chloroform-d for NMR spectroscopy (99.8 %) 7. Dichloromethane
8. Diethyl malonate
9. N, N-Dimethylformamide ( 99.5 ％)
10. Dimethyl sulfoxide-d6 for NMR spectroscopy (99.8 %) 11. Ethyl cyanoacetate
12. n-Hexane 13. Iodomethane 14. Iodoethane 15. 1-Iodopropane 16. 2-Iodopropane 17. Iodobutane
18. Magnesium sulfate 19. Malonic acid
20. Methanol for spectroscopy 21. Molecular sieve 0.4 nm 22. Piperidine
23. Phosphoryl chloride 24. Potassium hydroxide
25. Silica gel 60（70-230 mesh, ASTM）
26. Sodium acetate 27. Sodium bicarbonate 28. Sodium borohydride
29. Sodium hydride suspension ( 80 ％) 30. Sodium hydroxide
31. Tetrahydrofuran
32. TLC plates si 60 F254, 0.2 mm, 20 ×20 cm
貳.
購自瑞士 Fluka 公司者 1. Carbazole2. Hydroxylamine hydrocholride
參.
購自比利時 Acros 公司者 1. Ethyl cyanoacetate2. Semicarbazide hydrochloride
肆.
購自日本東京化成工業株式會社者 1. Anhydrous potassium carbonate2. Aluminum chloride 3. o-Chlorobenzyl chloride 4. m-Chlorobenzyl chloride 5. p-Chlorobenzyl chloroide
伍.
購自皓峰企業股份有限公司者1. Acetone 2. Ethyl acetate 3. n-Hexane
陸.
購自台灣菸酒公賣局1. 95 ﹪alcohol
第二節 重要儀器
1. 融點測定:
係採用 Yanaco MP-500D 融點測定器(Melting Point Apparatus)測定之, 溫度未經校正.
2. 紫外線-可見光光譜分析:
係採用 Shimadzu UV-160A UV-vis recording spectrophotometer 測定之, 使用甲醇當溶媒.
3. 紅外線光譜分析：
係採用 Nicolet Impact 400 FT-IR spectrophotometers 測定之,以溴化鉀
(KBr)粉末為打錠稀釋劑,光譜單位為波數(cm-1) 4. 質譜分析:
EIMS 以 VG Platform II GC-MS instrument 測定之，離子化電壓為 75 eV，單位為 m/z。
5. 核磁共振光譜分析：
係採用 Bruker Avance DPX-200 FT-NMR spectrometer 測定之，化學位 移以δ表示，單位為 ppm；偶合常數以
J 表示，單位為 Hz；以 s 表單
峰(singlet)，d 表二重峰(doublet)，dd 表雙二重峰(double doublet)，t 表 三重峰(triplet)，m 表多重峰(multiplet)，br 表寬峰(broad)。6. 元素分析:
係採用 Perkin-Elmer 2400 Series II CHNS / O analyzer 測定之，分析值 與理論值相差±0.4 %以內。
7. 紫外光燈:
係採用 CAMAG UV-CABINET II 紫外燈觀察箱,備有 254 nm 及 366 nm 之光源.
第三節 化合物之合成
關於目標化合物 3, 6, 9-substituted carbazole 之合成其方法如 Scheme 11-14 所示，以 carbazole 為起始原料，於第 3、6、9 位上導入不同的取代 基，合成一系列衍生物，各化合物之合成方法敘述如下：
I、9-Benzylcarbazole (2a) 56之合成
稱取 carbazole (1) (3.34 克，20 毫莫耳)溶於 50 毫升 tetrahydrofuran
（THF）中，於室溫下加入 KOH （2.24g，40 毫莫耳）和滴加溶於 10 毫 升 THF 中的 benzyl chloride（2.24g，20 毫莫耳）後，加熱迴流 16 小時，
將混合物倒入冰水中，以二氯甲烷（dichloromethane）萃取，萃取液經 sodium bicarbonate 洗滌，硫酸鎂（magnesium sulfate）乾燥後，再以管柱 層析（n-hexane / ethyl acetate）分離純化，n-hexane/CH2Cl2再結晶，即可 得 9-benzylcarbazole（2a）3.1 克，產率 60 ﹪，熔點 121-123 ℃。
EIMS m/z : 257 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε) : 251 (3.95) 元素分析 : 以 C19H15N 計算
實驗值: C: 88.62 ; H: 5.86; N: 5.45
1H NMR (CDCl3)δ: 5.54 (2 H, s, NCH2), 7.16-7.52 (11 H, m, H-1, H-2, H-3, H-6, H-7, H-8, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6'), 8.19 (2 H, d, J = 7.7 Hz, H-4, H-5)
II、9-(o-Chlorobenzyl)carbazole ( 2b )，9-(m-chlorobenzyl)carbazole ( 2c ) 和 9-(p-chlorobenzyl)carbazole ( 2d )
合成方法如同 I，分別加入溶於 THF 中的 2-chlorobenzyl chloride，
3-chlorobenzyl chloride、4-chlorobenzyl chloride，可得白色針狀結晶的 9-(o- chlorobenzyl)carbazole（2b）2.62 克，產率 45 %，熔點 120-121 ℃。
9-(m-chlorobenzyl)carbazole（2c）3.37 克，產率 58 ﹪，熔點 67-68 ℃，
和 9-(p-chlorobenzyl)carbazole（2d）3.21 克，產率 55 ﹪，熔點 169-170 ℃。
化合物2b：
EIMS m/z : 291 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε) : 250 ( 4.23) 元素分析 : 以 C19H14NCl 計算
計算值: C: 78.21 ; H: 4.84 ; N: 4.80 實驗值: C: 78.16 ; H: 4.81; N: 4.75
1H NMR (CDCl3)δ: 5.61 (2 H, s, NCH2), 6.52 (1 H, dd, J = 0.7, 7.6 Hz, H-6'), 6.98 (1 H,
dd, J = 7.5, 7.5 Hz, H-4'), 7.17-7.34 (8 H, m, H-1, H-2,
H-3, H-6, H-7, H-8, H-3', H-5'), 8.19 (2 H, d, J = 7.2 Hz, H-4, H-5)化合物2c：
EIMS m/z : 291 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 263 (4.45) 元素分析 : 以 C19H14NCl 計算
計算值: C: 78.21 ; H: 4.84 ; N: 4.80 實驗值: C: 78.16 ; H: 4.81; N: 4.75
1H NMR (CDCl3)δ: 5.47 (2 H,
s, NCH
2), 6.99 (1 H,d, J = 7.1 Hz, H-6'),
7.14-7.52 (9 H, m, H-1, H-2, H-3, H-6, H-7, H-8, H-2', H-4', H-5'), 8.18 (2 H, d, J = 7.6 Hz, H-4, H-5)化合物2d：
EIMS m/z : 291 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 250 (4.29) 元素分析 : 以 C19H14NCl 計算
計算值: C: 78.21 ; H: 4.84 ; N: 4.80 實驗值: C: 78.16 ; H: 4.83; N: 4.81
1H NMR (CDCl3)δ: 5.48 (2 H, s, NCH2), 7.07 (2 H, d, J = 8.5 Hz, H-2', H-6'), 7.21-7.50 (8 H,
m, H-1, H-2, H-3, H-6, H-7, H-8, H-3', H-5'), 8.16 (2
H, d, J = 7.7 Hz, H-4, H-5)III、9-Benzylcarbazole-3-carbaldehyde ( 3a )
稱取 9-benzylcarbazole（2a） （2.57 克，10 毫莫耳）溶於 20 毫升的
N,N-dimethyl formamide（DMF）中，降溫至 5 ℃後，滴加 POCl
3（1.4 毫倒入冰水中，以乙酸乙酯（ethyl acetate）萃取後，再以管柱層析（n-hexane / ethyl acetate）分離純化，可得 9-benzylcarbazole-3-carbaldehyde （3a） 2.34 克，產率 82 ﹪，熔點 133-134 ℃。
EIMS m/z : 285(M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 274 (4.56) IR : υC=O (KBr) cm-1 : 1690
元素分析 : 以 C20H15NO 計算 計算值: C: 84.19 ; H: 5.30 ; N: 4.91 實驗值: C: 84.17 ; H: 5.29; N: 4.90
1H NMR (CDCl3)δ: 5.53 (2 H, s, NCH2), 7.13-7.49 (9 H, m, H-1, H-6, H-7, H-8, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6'), 7.96 (1 H,
d, J = 6.8 Hz, H-2),
8.17 (1 H, d, J =5.0 Hz, H-5), 8.63 (1 H, dd, J = 1.0, 1.6 Hz, H-4), 10.08 (1 H, s, -CHO)IV、9-(o-Chlorobenzyl)carbazole-3-carbaldehyde ( 3b )，
9-(m-chlorobenzyl)carbazole-3-carbaldehyde (3c ) 和 9-(p-chlorobenzyl)carbazole-3-carbaldehyde (3d )
以化合物 2b， 2c 和 2d 為原料，參照化合物 3a 的合成方法，可得 白色針狀結晶的 3b（1.69 克，產率 53 ﹪，熔點 129-131 ℃），3c（2.17 克，產率 68﹪，熔點 113-144 ℃）和 3d（2.23 克，產率 70 ﹪，熔點 166-168
℃）。
化合物3b：
EIMS m/z : 319 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 273 (4.23)
IR, υC=O (KBr): 1686
元素分析 : 以 C20H14NOCl 計算 計算值: C: 75.12 ; H: 4.41 ; N: 4.38 實驗值: C: 75.16 ; H: 4.42; N: 4.39
1H NMR (CDCl3)δ: 5.54 (2 H, s, NCH2), 7.11-7.55 (8 H,
m, H-1, H-6, H-7,
H-8, H-3', H-4', H-5', H-6'), 7.98 (1 H, dd, J = 1.6, 8.6 Hz, H-2), 8.20 (1 H,d, J = 7.6 Hz, H-5), 8.65 (1 H, d, J = 1.6 Hz, H-4), 10.10 (1 H, s, -CHO)
化合物3c：
EIMS m/z : 319 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 260 (4.34) IR, υC=O (KBr): 1686
元素分析 : 以 C20H14NOCl 計算 計算值: C: 75.12 ; H: 4.41 ; N: 4.38 實驗值: C: 75.22 ; H: 4.42; N: 4.37
1H NMR (CDCl3)δ: 5.53 (2 H, s, NCH2), 6.96-7.57 (8 H, m, H-1, H-6, H-7, H-8, H-2', H-4', H-5' H-6'), 8.00 (H, dd, J = 1.4 ,8.4 Hz, H-2), 8.20(1 H, d,
J = 7.6 Hz, H-5), 8.66 (1 H, d, J = 1.4 Hz, H-4), 10.11 (H, s, -CHO)
化合物3d：
EIMS m/z : 319 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 273 (4.41) IR, υC=O (KBr): 1689
元素分析 : 以 C20H14NOCl 計算
實驗值: C: 75.26 ; H: 4.40; N: 4.39
1H NMR (CDCl3)δ:5.52 (2 H, s, NCH2), 7.04-7.56 (8 H,
m, H-1, H-6 H-7,
H-8, H-2', H-3', H-5', H-6'), 7.99 (1 H, dd, J = 1.6, 8.5 Hz, H-2), 8.19 (1 H,d, J = 7.6 Hz, H-5), 8.65 (1 H, s, H-4), 10.10 (1 H, s, -CHO)
V、9-Benzylcarbazole-3-carbinol ( 4a )
將化合物3a（1.0 克，3.5 毫莫耳）溶於甲醇 20 毫升中，加入 NaBH4
（150.0 毫克，4.0 毫莫耳）室溫下攪拌至成為澄明溶液，加入二氯甲烷 100 毫升，並依序以鹽水（2 × 50 毫升）和水（2 × 50 毫升）洗滌，有機 溶媒層經無水硫酸鎂乾燥及減壓濃縮後，以管柱層析（CH2Cl2）分離純化，
即可得到化合物4a（0.92 克，產率 92 ﹪，熔點 115-117 ℃）。
EIMS m/z : 287 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 253 (4.12) IR : νmax x (KBr) cm-1 :3325, 1331, 737 元素分析 : 以 C20H17NO 計算
計算值: C: 83.60 ; H: 5.96 ; N: 4.87 實驗值: C: 83.46 ; H: 5.98; N: 4.86
1H NMR (CDCl3)δ: 1.84 (1 H, br s, -OH), 4.85 (2 H, s, -CH2OH), 5.50 (2 H,
s, NCH
2), 7.11-7.46 (10 H,m, H-1, H-2, H-6, H-7, H-8, H-2,' H-3', H-4',
H-5', H-6'), 8.12-8.15 (2 H, m, H-4, H-5)VI、9-(o-Chlorobenzyl)carbazole-3-carbinol (4b), 9-(m-chlorobenzyl)carbazole- 3- carbinol (4c) 和 9-(p-chlorobenzyl)carbazole-3- carbinol (4d)
以化合物3b、3c 和 3d 為原料，參照化合物 4a 的合成方法，即可得 到白色粉末的化合物4b（0.98 克，產率 88 ﹪，熔點 113-115 ℃）。化合 物4c（1.0 克，產率 90 ﹪，熔點 108-109 ℃）和化合物 4d（0.99 克，產 率 89 ﹪，熔點 118-119℃）。
化合物4b：
EIMS m/z : 321 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 252 (4.11) IR : νmax (KBr) cm-1 :3452, 1431, 755 元素分析 : 以 C20H16NOCl 計算 計算值: C: 74.65 ; H: 5.01 ; N: 4.35 實驗值: C: 74.56 ; H: 5.00; N: 4.34
1H NMR (CDCl3)δ: 1.97 (1 H, s, -OH), 4.81 (2 H, s, -CH2OH), 5.52 (2 H, s, NCH2), 6.42(H, d, J = 7.5 Hz, H-6'), 6.87-7.46 (8 H, m, H-1, H-2, H-6, H-7, H-8, H-3', H-4', H-5'), 8.14 (2 H, s, H-4, H-5)
化合物4c：
EIMS m/z : 321 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 252 (4.23) IR : νmax (KBr) cm-1 :3221, 1331, 741 元素分析 : 以 C20H16NOCl 計算
計算值: C: 74.65 ; H: 5.01 ; N: 4.35 實驗值: C: 74.58 ; H: 5.02; N: 4.36
1H NMR (CDCl3)δ: 1.63 (1 H, s, -OH), 4.87 (2 H, s, -CH2OH), 5.48 (2 H, s, NCH2), 6.50-7.50 (9 H, m, H-1, H-2, H-6, H-7, H-8, H-2,' H-4', H-5', H-6'), 8.12-8.15 (2 H, m, H-4, H-5)
化合物4d：
EIMS m/z : 321 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 252 (4.34) 元素分析 : 以 C20H16NOCl 計算
計算值: C: 74.65 ; H: 5.01 ; N: 4.35 實驗值: C: 74.76 ; H: 5.00; N: 4.36
1H NMR (CDCl3)δ: 1.82 (1 H, br s, -OH), 4.85 (2 H, s, -CH2OH), 5.45 (2 H,
s, NCH
2), 7.04 (2 H, d, J = 8.4 Hz, H-2,' H-6'), 7.20-7.49 (7 H, m, H-1, H-2, H-6, H-7, H-8, H-3', H-5'), 8.11-8.14 (2 H, m, H-4, H-5)VII、3,6-Diacetyl-9-benzylcarbazole ( 5 ) 和 3-acetyl-9-benzylcarbazole ( 6 )
將化合物2a（5.14 克，20 毫莫耳）溶於二氯甲烷 100 毫升中，加入 acetic anhydride（20.4 克，20 毫莫耳）及過量之 AlCl3，室溫下攪拌 48 小 時後，將反應液倒入冰水 100 毫升中，以乙酸乙酯萃取，有機溶媒層經無 水硫酸鎂乾燥及減壓濃縮後，以管柱層析（hexane / ethyl acetate = 9:1）分 離純化，即可得到白色粉末的化合物5（3.07，產率 45 ﹪，熔點 341-342
℃）和化合物6 (2.27 克，產率 38 ﹪，熔點 132-134 ℃)。
化合物5：
EIMS m/z : 341 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 252 (4.58) IR : υC=O (KBr) cm-1 : 1667
元素分析 : 以 C23H19NO2 計算 計算值: C: 80.92 ; H: 5.61 ; N: 4.10 實驗值: C: 80.87 ; H: 5.60; N: 4.11
1H NMR (CDCl3)δ: 2.75 (6 H,
s, 2 ×-COCH
3), 5.59 (2 H,s, NCH
2), 7.10-7.31 (5 H, m, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6'), 7.44 (2 H, d, J = 8.7 Hz, H-1, H-8), 8.15 (2 H, dd, J = 1.4, 8.7 Hz, H-2, H-7), 8.84 (2 H, d, J = 1.4 Hz, H-4, H-5)化合物6：
EIMS m/z : 299 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 263 (4.42) IR : υC=O (KBr) cm-1 : 1667
元素分析 : 以 C21H17NO 計算 計算值: C: 84.25 ; H: 5.72 ; N: 4.68 實驗值: C: 84.10 ; H: 5.73; N: 4.68
1H NMR (CDCl3)δ: 2.72 (3 H,
s, -COCH
3), 5.50 (2 H,s, NCH
2), 7.10-7.49 (9 H, m, H-1, H-6, H-7, H-8, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6'), 8.09 (1 H, dd, J= 1.6, 8.7 Hz, H-2), 8.19 (1 H, d, J = 7.6 Hz, H-5), 8.78 (H, d, J = 1.6 Hz, H-4)
VIII、9-Benzy-3-hydroxymethylcarbazole-3-aldoxime (7)
將化合物3a（1.0 克，3.5 毫莫耳）溶於乙醇 20 毫升中，室 溫下一面攪拌一面加入 sodium acetate（0.3 克，3.7 毫莫耳）再 加入 hydroxylamine hydrochloride （257.0 毫克，3.7 毫莫耳）加 熱迴流 3 小時。反應液冷卻後以乙醚（ether）萃取，有機溶媒層 經無水硫酸鎂乾燥及減壓濃縮後，以管柱層析（hexane / ethyl acetate = 7:3）分離純化，即可得到白色粉末的化合物 7（0.95 克，
產率 90 ﹪，熔點 185-187 ℃）。
EIMS m/z : 300 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 274 (4.49) 元素分析 : 以 C20H16N2O 計算
計算值: C: 79.98 ; H: 5.37 ; N: 9.33 實驗值: C: 79.88 ; H: 5.36; N: 9.31
1H NMR (CDCl3)δ: 5.53 (2 H, s, NCH2), 7.12-7.50 (10 H, m, H-1, H-, H-6, H-7, H-8, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6', -CH=), 7.70 (1 H,
d, J = 8.5 Hz,
H-2), 8.14 (1 H, d, J = 7.7 Hz, H-5), 8.31 (1 H, s, H-4)IX、9-Benzylcarbazole-3-carboxylic acid ( 8 ) 57
將化合物2a（1.0 克，3.5 毫莫耳）懸浮於水和乙醇（3 : 1）
的混合液 40 毫升中，加熱至 70-80 ℃時，於 1 小時內分次慢慢
加入 KMnO4 （0.9 克，5.6 毫莫耳）水溶液 20 毫升，繼續加熱 攪拌 1 小時後，反應液以 10 % KOH 水溶液鹼化，趁熱過濾，殘 渣並以 20 毫升的熱水洗滌 3 次，合併濾液和洗液，冷卻後以 2 N HCl 酸化之，直至沒有沈澱繼續產生。將沈澱物過濾、水洗、乾 燥後，即可得到白色粉末的化合物 8（260.0 毫克，產率 25 ﹪，
熔點 264-267 ℃）。
EIMS m/z : 301 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 265 (4.53) IR, υC=O (KBr): 1668
元素分析 : 以 C20H15NO2 計算 計算值: C: 79.72 ; H: 5.02 ; N: 4.65 實驗值: C: 79.68 ; H: 5.03; N: 4.65
1H NMR (DMSO-d6)δ: 5.67 (2 H,
s, NCH
2), 7.14-7.65 (9 H,m, H-1, H-6,
H-7, H-8, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6'), 8.10 (1 H, d, J = 8.6 Hz, H-2), 8.19 (1 H, d, J = 7.6 Hz, H-5), 8.81 (1 H, s, H-4)X、9-Benzyl-3-methoxymethylcarbazole (9)
將化合物4a（0.5 克，1.7 毫莫耳）溶於 DMF20 毫升中，室 溫下 30 分鐘內一面攪拌一面加入 sodium hydride（NaH，80 %，
0.05 克，2.0 毫莫耳）再加入溶在 10 毫升 DMF 中的 iodomethane
（0.24 克，1.7 毫莫耳）攪拌反應 60 分鐘，以二氯甲烷萃取，萃 取液經硫酸鎂乾燥減壓濃縮後，再以管柱層析（n-hexane / ethyl acetate）分離純化，即可得到白色粉末的化合物 9（0.39 克，產
率 78 %，熔點 232-234 ℃）。
EIMS m/z : 301 (M+)
UV λmax nm (MeOH) (logε): 253 (4.63) 元素分析 : 以 C21H19NO 計算
計算值: C: 83.69 ; H: 6.35 ; N: 4.65 實驗值: C: 83.66 ; H: 6.32; N: 4.66
1H NMR (CDCl3)δ: 3.50 (3 H, s, -OCH3), 4.70 (2 H, s, -CH2O), 5.52 (2 H, s, NCH2), 7.15-7.49 (10 H, m, H-1, H-2, H-6, H-7, H-8, H-2', H-3', H-4', H-5', H-6'), 8.19-8.22 (2 H, m, H-4, H-5)
XI、9-Benzylcarbazole-3-ethycarboxylester (10)
在 30 毫升無水乙醇中通入 HCl 氣體，當液體呈淡黃色後，加入化合
在 30 毫升無水乙醇中通入 HCl 氣體，當液體呈淡黃色後，加入化合